疏肝和胃丸对糖尿病胃轻瘫模型大鼠胃电节律及胃窦Cajal 间质细胞表达的影响
2020-10-21林辉孙必强黄群
林辉,孙必强,黄群
(1.湖南中医药高等专科学校,湖南 株洲 412012;2.湖南中医药高等专科学校附属第一医院,湖南 株洲 412000)
0 引言
糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)为糖尿病常见慢性并发症[1],胃窦Cajal 间质细胞 (interstitial cells of Cajal,ICC)作为胃肠道动力的起搏细胞,能通过调节胃肠平滑肌细胞内的慢波,从而掌控胃肠道的自主节律运动。有研究表明[2]ICC 的数量减少、功能降低、超微结构破坏等是导致糖尿病患者胃肠平滑肌正常收缩功能发生障碍的重要机制。基于ICC 已经成为治疗DGP 的重要靶点,本研究从ICC 表达和胃电节律角度,探索疏肝和胃丸治疗DGP 的相关机制。
1 材料与方法
1.1 动物
Wistar 大鼠150 只,60-80 日龄,体重(200±20)g,雄性,湖南省斯莱克景达实验动物有限公司提供(许可证号:SYXK(湘)2011-0003),饲养温度25℃,湿度50%,分笼喂养,自由进食进水。
1.2 药物与试剂
多潘立酮片(10 mg/片,西安杨森制药有限公司生产,国药准字:H10910003)。注射用链脲佐菌素(Steptozotocin,STZ,美国Sigma 公司);柠檬酸(天津市博迪化工有限公司);兔抗c-kit 多克隆抗体(一抗)(武汉博士德生物公司)。
疏肝和胃丸中药饮片由本校中药教研室采购经鉴定为真品,按每剂中加蒸馏水500 mL,煎煮40 分钟,过滤,浓缩为浸膏,每克浸膏含生药18.75 g,冷藏备用。
1.3 造模方法及分组
高糖高脂饲料喂养2 周,禁食不禁水12 h,编号后随机抽取10 只为正常组,余为造模组。参照文献[3]造模:造模组动物在第1 天和第8 天分别两次腹腔注射新鲜配制1%STZ 液,注射剂量为45 mg/kg,正常组大鼠相应腹腔注射0.1 mol/L 柠檬酸缓冲液,注射剂量为1 mL/只。第2 次STZ 注射后6w 尾尖采血测空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG)。选取FBG>16.7 mmol/L 同时伴有腹部胀大、体质量减轻等胃轻瘫症状动物随机分为模型组、西药组、疏肝和胃丸低、中、高剂量组,每组20 只。……
