于季红，赵秀梅

（中国人民解放军总医院医学创新研究部 临床生物样本研究中心，北京 100853）

手足口病（hand-foot-mouth disease,HFMD）是一种大多由肠道病毒71 型（简称EV-A71）和柯萨奇病毒A 组5、8、16 型（CV-A5、CV-A8 和CV-A16）等病原体引起的传染病，儿童6 岁前多发，婴幼儿感染较为常见[1]。EV-A71 病毒是长度约7.4 kb 的无包膜二十面体RNA 病毒颗粒，虽然EV-A71 感染的HFMD 通常是一种自限性疾病，但是通过粪便-口腔、口腔-口腔、呼吸道飞沫接触等途径使该病具有很高的传染性。儿童感染EV-A71 的轻微症状包括高烧、呕吐，手部、脚底和臀部的斑丘疹或水泡及口腔溃疡，但也可产生更严重的症状，如并发脑干和小脑脑炎、心肺衰竭甚至最终导致死亡[2]。随着全球化进程加快，HFMD 疫情目前正以周期性流行病的形式出现在全球各个地区。根据世界卫生组织统计，2008 ～2012年全球700 多万例患者感染了EV-A71 并导致HFMD，其中我国因该病死亡2 457 例[3]。因此研究与该病相关的检验诊断指标并评价其临床意义具有重要价值。血清淀粉样蛋白A（SAA）、血清降钙素原（PCT）、白细胞计数（WBC）被认为是临床常见且灵敏的感染标志物，但评价其对HFMD 诊断价值的报道较少。此外，EV-A71 感染的HFMD 患儿在重症时期常并发心肌损伤，以往大多采用肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CKMB）、乳酸脱氢酶（LDH）等指标作为参考[4]，而SAA、PCT、WBC 在重症感染时期的诊断价值尚未有明确研究。因此，本研究旨在探讨SAA、PCT、WBC 对EV-A71感染的HFMD 患儿的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2018年10月—2019年10月中国人民解放军总医院收治的60 例EV-A71 感染的HFMD 患儿作为研究对象。按照病情分为重症组和普通组，各30 例。另取同期本院健康体检儿童30 例作为对照组。纳入标准： ①符合我国在2018年发布的《手足口病诊疗指南》[5]并经医院感染科EV-A71-IgM 抗体检测确诊的EV-A71 感染的HFMD 患儿，普通患儿和重症患儿的划分依据也参考该诊疗指南；②病程＜5 d，检测前未进行抗病毒治疗或免疫增强治疗；③未同时患有其他肠道疾病或感染类疾病；④家属知情并同意参与本研究。排除标准： 合并其他肠道疾病、感染类疾病、精神类疾病或其他严重基础疾病。各组EV-A71 感染HFMD 患儿在性别比例、年龄、体重方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 各组患儿临床资料比较 （n =30）

1.2 方法

1.2.1 样本采集研究对象在入院后次日早晨抽取2 管空腹静脉血，其中含EDTA 抗凝剂的管血样本进行血细胞分析，不含抗凝剂的另血管样本离心操作后取上层血清进行血清学检测，检测过程在抽血后3 h 内完成。

1.2.2 检测方法每例患儿采集血液样本后采用EV-A71-IgM 抗体检测试剂盒（广州宜康生物科技有限公司）进行确诊，确诊后分别进行血细胞分析和血清学指标检测。其中血细胞分析采用全自动血液分析仪[SYSMEX-XN3000，希森美康医用电子（上海）有限公司]，血清学指标SAA 采用SAA 检测试剂盒（武汉明德生物科技股份有限公司，化学发光免疫分析法）进行检测，PCT 采用PCT 检测试剂盒（北京九强生物技术股份有限公司）进行检测，CK、CKMB、LDH 采用Cobas6000 全自动生化分析仪[罗氏诊断产品（上海）有限公司]进行检测。

1.3 观察指标

比较各组SAA、PCT、WBC，利用ROC 曲线分析各组SAA、PCT、WBC 对HFMD 患儿的诊断价值。分析各组CK、CKMB、LDH 与上述指标的相关性。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 21.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用方差分析，进一步两两比较用LSD-t检验；绘制ROC 曲线，相关性分析用Spearman 法，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 EV-A71 感染HFMD 患儿临床症状分析

普通组患儿仅出现发热和皮疹症状，其中发热时间＜48 h 1 例（3.33%），约72 h 2 例（6.67%），＞72 h 17 例（56.67%）；皮疹分布为单纯手部 1 例（3.33%），单纯足部 1 例（3.33%），单纯口部 2 例（6.67%），手足口部位 10 例（33.33%），手足口臀部位 16 例（53.33%）。

重症组患儿以出现神经系统和呼吸系统症状为主，且并发肺炎、心肌炎和脑膜炎等严重疾病。其中神经系统症状中嗜睡乏力25 例（83.33%），惊厥谵妄14 例（46.67%），恶心呕吐21 例（70.00%），阵挛抽搐18 例（60.00%），脑膜刺激征10 例（33.33%）；呼吸系统症状中，呼吸频率加快16 例（53.33%），肺部湿啰音7 例（23.33%），呼吸困难5 例（16.67%）；合并症中肺炎5 例（16.67%），心肌炎10 例（33.33%），脑膜炎5 例（16.67%）。

2.2 各组患儿SAA、PCT、WBC 水平比较

各组患儿SAA、PCT、WBC 比较，经方差分析，差异有统计学意义（P＜0.05）。普通组和重症组SAA、PCT、WBC 高于对照组（P＜0.05）；重症组SAA、PCT 高于普通组（P＜0.05）。见表2。

表2 各组患儿SAA、PCT、WBC 水平比较（n =30，±s）

表2 各组患儿SAA、PCT、WBC 水平比较（n =30，±s）

注： ①与对照组比较，P ＜0.05；②与重症组比较，P ＜0.05。

组别 SAA/（mg/L） PCT/（ng/ml） WBC/（×109/L）普通组 56.17±22.26①② 0.27±0.15①② 13.02±3.35①重症组 88.63±21.92① 0.88±0.31① 15.93±2.33①对照组 8.44±1.09 0.02±0.02 9.12±3.38 F 值 88.849 94.396 24.943 P 值 0.000 0.000 0.000

2.3 SAA、PCT、WBC 对EV-A71 感染HFMD患儿的诊断价值

重症组与对照组SAA、PCT、WBC 的曲线下面积（AUC）分别为0.993（95% CI： 0.976，1.000）、0.995（95% CI： 0.982，1.000）和0.939（95% CI： 0.868，1.000）；重症组与普通组SAA、PCT、WBC 的AUC 分别为0.913（95% CI： 0.796，1.000）、0.911（95% CI： 0.793，1.000）和0.756（95% CI： 0.607，0.906），说明上述指标对HFMD 患儿具有较好的诊断价值。见表3和图1、2。

表3 不同分组SAA、PCT、WBC 的诊断价值参数

图1 重症组与对照组SAA、PCT、WBC 诊断HFMD 的ROC 曲线

图2 重症组与普通组SAA、PCT、WBC 诊断HFMD 的ROC 曲线

2.4 各组患儿CK、CKMB、LDH 水平比较

各组患儿CK、CKMB、LDH 比较，经方差分析，差异有统计学意义（P＜0.05）。重症组CK、CKMB、LDH 高于普通组和对照组（P＜0.05）；普通组CK、LDH 高于对照组（P＜0.05）。见表4。

2.5 相关性分析

经Spearman 法，CK 与SAA、PCT、WBC呈正相关（P＜0.05）；CKMB 与SAA、PCT、WBC 呈正相关（P＜0.05）；LDH 与SAA、PCT、WBC呈正相关（P＜0.05）。SAA、PCT、WBC 可作为评价HFMD 患儿病情严重程度的参考指标。见表5。

表4 各组患儿CK、CKMB、LDH 水平比较（n =30，±s）

表4 各组患儿CK、CKMB、LDH 水平比较（n =30，±s）

注： ①与对照组比较，P ＜0.05；②与重症组比较，P ＜0.05。

组别 CK/（u/L） CKMB/（ng/ml） LDH/（u/L）普通组 254.99±8.96①② 7.40±5.25② 261.79±67.92①②重症组 368.57±13.91① 13.61±4.97① 363.79±69.02①对照组 105.19±8.85 5.39±1.61 142.60±12.02 F 值 2974.874 20.057 77.231 P 值 0.000 0.000 0.000

表5 相关性分析参数

3 讨论

EV-A71 是目前重要的具有较强威胁性的传染病病原体，其导致的HFMD 好发于学龄前儿童，常于春秋季节爆发[6-7]。患儿常出现低烧、手掌和脚底部的斑丘疹或丘疹以及较为严重的口腔溃疡，以上轻微症状通常在7 ～10 d 消失。然而在极少数情况下，重症患儿可能会出现神经系统或呼吸系统症状或心肺并发症，从而可能导致严重的神经紊乱、循环系统障碍甚至幼儿死亡[8-10]。从本研究中患儿的临床症状分布来看，普通组以出现发热和皮疹症状为主，其中发热时间常持续72 h 以上，皮疹以分布在手足口部或者手足口臀部为主，该症状分布具有一定的典型性，与黄全发等[11]和陈庆会等[12]一致。与普通组相比，本研究中重症组出现了多种神经系统、呼吸系统症状和心肺脑并发症，其中神经系统症状以嗜睡乏力、恶心呕吐和阵挛抽搐为主，呼吸系统症状以呼吸频率加快为主，并发症以合并心肌损伤为主。该症状分布与邹明霞等[13]和张玉榕等[14]报道一致。

除了症状分布以外，本研究对SAA、PCT、WBC对HFMD 患儿的诊断价值进行研究，结果显示重症组和普通组上述指标均较对照组高，此外重症组SAA、PCT 较普通组高。ROC 曲线分析结果表明重症组与对照组SAA、PCT、WBC 的AUC 分别为0.993、0.995 和0.939，重症组与普通组SAA、PCT、WBC 的AUC 分别为0.913、0.911 和0.756，说明上述指标对EV-A71 感染HFMD 具有一定的诊断价值，该结果与赵睿等[4]一致。

何海燕等[15]报道了EV-A71 感染对患儿心肌损伤的影响，其结果表明重症HFMD 患儿常并发不同程度的心肌损伤，主要表现为心肌酶谱类指标升高和心电图异常，心肌损伤可作为发现重症HFMD 的早期指标。与上述研究结果类似，本研究结果显示重症HFMD 患儿的并发症以合并心肌损伤为主，因此检测了HFMD 患儿的CK、CKMB、LDH，结果表明，重症组均较普通组、对照组高，该结果与高侠等[16]一致。CK、CKMB、LDH 分别与SAA、PCT、WBC 呈正相关，可作为评价HFMD 病情严重程度的参考指标。

综上所述，SAA、PCT、WBC 对HFMD 病情有一定诊断价值，与CK、CKMB、LDH 共同检测在预示HFMD 由轻症转为重症方面具有指导意义。