文│韩海燕 蔡扩军（新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心）

王承（新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所）

大肠杆菌O157∶H7血清型是肠出血性大肠杆菌的代表菌株，为革兰氏染色阴性菌，具有较强的耐酸性，可产生大量的Vero毒素，是主要的致病因子，能引起人的出血性腹泻和肠炎，患者大多数急性起病，严重的感染者一周后可发生溶血性尿毒综合征，并可出现窦性心动过缓、惊厥和血小板减少性紫癜等并发症，可导致死亡。该病多发生于夏秋两季，主要以散发性为主。大肠杆菌O157∶H7的携带者可能是海鸥、羊、猪、马、鹿、鸽子、牛、鸡等动物，畜禽肉食品供应链中牛肉是主要的传播载体。

为了解大肠杆菌O157∶H7在新疆维吾尔自治区乌鲁木齐地区畜禽肉供应链中的存在风险，本研究用荧光PCR方法对畜禽肉供应链的肉品以及环境拭子中的大肠杆菌O157∶H7进行监测，以期为保障本地区畜禽肉食品安全提供技术支撑。

一、材料与方法

1.主要试剂。大肠杆菌O157∶H7荧光PCR检测试剂盒；细菌基因组DNA提取试剂盒；改良EC肉汤。

2.主要仪器。荧光PCR仪（ABI 7500型）；全自动核酸提取仪；II级生物安全柜；恒温培养箱；高压灭菌器。

◎图1 荧光PCR检测结果

3.取样环节及数量。畜禽肉供应链的五大环节一共取样量588份，各个环节取样数量见表1。

二、实验室检验

1.增菌。将肉类样品（100克）放入一次性培养皿，用弯剪和镊子取样品的中间和四周，剪碎，取25克样品加入到含有225毫升EC肉汤增菌液的均质袋中，于（36±1）℃培养18～24小时。

表1 各个环节取样数量表 份

取环境拭子或粪便样品时，提前将6毫升EC肉汤在无菌操作台内分装至离心管。在采样地点，将离心管盖子快速打开，将涂抹好的环境拭子或粪便快速放入，盖上盖子，运输至实验室后在（36±1）℃培养箱内培养18～24小时。

2.荧光PCR检验。取1～5毫升菌液，按照细菌基因组DNA提取试剂盒说明书提取细菌基因组DNA作为模板，根据大肠杆菌O157∶H7荧光PCR试剂盒说明书对DNA模板进行PCR扩增，并对结果进行判定。

三、检验结果

经荧光PCR检测，588份样品中均未检出大肠杆菌O157：H7。说明在此次检测过程中所取样品未发现受大肠杆菌O157：H7污染。

四、结论

所取的588份样品均未检出大肠杆菌O157：H7，说明目前该地区在养殖、屠宰、运输、贮存、销售等环节上大肠杆菌O157：H7污染的风险较低。但是有其他省市分离鉴定出大肠杆菌O157：H7相关文献报道，鉴于大肠杆菌O157：H7的对食品安全造成的危害性较大，需要密切关注。在实地研究过程中发现，屠宰环节是畜禽肉供应链中食源性病原微生物污染风险最高的环节，如果操作不规范很容易造成细菌的交叉污染，相关部门和企业应加强对畜禽肉供应链涉及人员的宣传培训。同时，建议有关部门建立畜禽交易市场、农贸市场、超市的清洗消毒规范，尤其对畜禽肉类直接接触的环境和物品进行规范的清洗和消毒，减少食源性病原微生物传播的概率。