石典花 张 军* 苏本正 戴衍朋 孙立立

（1.山东省中医药研究院， 山东济南250014； 2.山东中医药大学， 山东济南250355）

柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinenseDC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifoliumWilld.的干燥根。按性状不同，习称前者“北柴胡”，后者为“南柴胡”。柴胡味辛、苦，微寒，归肝、胆、肺经，具有疏散退热、疏肝解郁、升举阳气的功效［1］。现代研究表明柴胡具有解热、抗内毒素、抗炎、镇痛、镇咳、抗菌、中枢神经抑制等多种药理作用［2⁃7］。柴胡历来临床需求量巨大，因此有效保障柴胡药材及饮片质量对于有效保障临床疗效具有重要意义。

中药材产地加工是根据中药材的性质和储运、销售要求进行产地初步加工。目前由于中药材市场的无序竞争和假药、劣药的冲击，使中药材及其饮片质量现况不容乐观。近年来，虽然国家加大了中药材及饮片的监管力度，但中药流通中故意掺杂、掺假现象始终存在。基于上述问题，有学者提出中药材产地加工与中药炮制一体化概念，从源头抓起，杜绝问题隐患，确保药材及饮片的质量及临床安全［8⁃12］。中药材经过产地加工，不仅起到去除其非药用部位、停止其生理状态以便干燥等操作，而且通过合适的加工方法，使药用部位中有效成分最大保留、毒性成分有效减少［13］。基于此，本研究对柴胡产地加工工艺进行探究，以期有效保证柴胡及其饮片质量，保障临床疗效。

1 材料

1.1 仪器 Waters 2695 高效液相色谱仪、Waters 2996 DAD 检测器［沃特世科技（上海） 有限公司］；瑞士MET⁃TLER XS205 DU10-5电子天平（梅特勒⁃托利多仪器上海有限公司）；LC⁃350 A 型超声波中药处理机（济宁市中区鲁超仪器厂）；WFH⁃201B 型紫外透射反射仪（上海精科实业有限公司）；XMT804 型电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）；DHG⁃9146 型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。

1.2 试剂与药物 本研究所用柴胡均由山东百味堂中药饮片有限公司提供当年产鲜品药材。柴胡皂苷a、b1、b2、c、d 对照品均购自成都普瑞法科技有限公司（批号分别为PRF7032246、PRF8062241、PRF8062242、PRF71220142、PRF8082905）；柴胡对照品（批号120992⁃201509，中国食品药品检定研究院）。乙腈为色谱纯，乙酸乙酯、甲醇、乙醇、硫酸、氨水均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 样品制备 柴胡药材的加工方式分别为三成干晾干、三成干烘干、五成干晾干、五成干烘干、晾至全干、烘至全干。

柴胡饮片的加工方式分别为①鲜切2～4 mm 厚片，晾干；②鲜切2～4 mm 厚片，烘干；③晾至三成干，切2～4 mm厚片，晾干；④晾至三成干，切2～4 mm 厚片，烘干；⑤晾至五成干，闷润后切2～4 mm 厚片，晾干；⑥晾至五成干，闷润后切2～4 mm 厚片，烘干；⑦晾至全干，蒸30 min 切2～4 mm 厚片，晾干；⑧晾至全干，蒸30 min切2～4 mm 厚片，烘干。（其中烘干温度均为60 ℃）。

2.2 外观性状鉴别 不同加工方式的柴胡药材图片见图1，不同加工方式的柴胡饮片图片及主要特点描述见图2。

图1 不同加工工艺柴胡药材样品性状

图2 不同加工工艺柴胡饮片样品特点

柴胡药材外观性状无明显差异。均呈圆柱形或长圆锥形，长6～15 cm，直径0.3～0.8 cm。根头膨大，顶端有3～15 个茎基或短纤维状叶基，下部有分枝。表面黑褐色或浅棕色，具纵皱纹、支根痕及皮孔。

《中国药典》 规定柴胡饮片呈不规则厚片，外表皮浅棕色，具纵皱纹和支根痕，切面显淡黄白色，纤维性，质硬，气微香，味微苦。柴胡鲜切，直径5 mm 以下切片完整。三成干切制的饮片，直径5 mm 以下切片完整，7 mm以上不完整且表皮易脱落，内部湿润，连接地上部分易碎。五成干闷润15 min 切制的饮片，直径2～8 mm 切片完整，1 mm 可切，但内部微松散。全干蒸30 min，5～7 mm 较好切。同时发现柴胡浸润快，失去水分速度也快。

2.3 薄层鉴别 取本品粉末0.5 g，加甲醇20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。另取北柴胡对照品0.5 g，同法制备对照品溶液。再取柴胡皂苷a 对照品、柴胡皂苷d 对照品，加甲醇制成每1 mL 各含0.5 mg 的混合对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502） 试验，吸取上述3 种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸乙酯⁃乙醇⁃水（8 ∶2 ∶1） 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60 ℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯（365 nm） 下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。TLC鉴定结果见图3～6，由图3～6 可以看出，不同加工工艺的柴胡药材和饮片中在柴胡对照药材、柴胡皂苷a 和柴胡皂苷d，相应位置上均显相同颜色的斑点，且均未见明显差异。

图3 不同干燥工艺柴胡样品TLC 图谱（日光）

图4 不同干燥工艺柴胡样品TLC 图谱（365 nm）

2.4 检查 按2015 年版《中国药典》 一部柴胡项下【检查】 测定，结果见表1。药材水分为5.84～7.31%，饮片为5.12～6.96%，均符合药典不得过10.0%规定。

2.5 浸出物 按2015 年版《中国药典》 一部柴胡项下【浸出物】 测定，结果见表1。药材含有量为24.44～26.93%，饮片为24.85～28.27%，均符合药典不少于11.0%要求。

2.6 样品含有量测定［14⁃15］

图5 不同产地加工工艺柴胡样品TLC 图谱（日光）

图6 不同产地加工工艺柴胡样品TLC 图谱（365 nm）

表1 不同加工工艺柴胡药材及饮片水分和浸出物含有量（%， n＝2）

2.6.1 色谱条件 Waters symmetry shield C18色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 μm）；流动相水（A） ⁃乙腈（B），梯度洗脱（0～20 min，70%A；20～25 min，70%～65%A；25～45 min，65%A；45～80 min，65%～50%A）；体积流量1 mL／min；检测波长0～40 min，210 nm；40～57 min，250 nm；57～80 min，210 nm；进样量10 μL。

2.6.2 对照品溶液制备 取柴胡皂苷a、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d 对照品适量，精密称定，加甲醇制备成每1 mL 分别含柴胡皂苷a 0.997 mg、柴胡皂苷b10.450 mg、柴胡皂苷b20.494 mg、柴胡皂苷c 0.512 mg、柴胡皂苷d 1.013 mg 的对照品溶液。

2.6.3 供试品溶液制备 取柴胡粉末（过4 号筛） 约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入含5% 浓氨试液的甲醇溶液25 mL，密塞，30 ℃水温超声 （200 W，40 kHz） 处理30 min，滤过，用甲醇20 mL 分2 次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解，转移至5 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.6.4 含有量测定 分别精密吸取“2.6.2” “2.6.3” 项下对照品溶液、供试品溶液各10 μL，在“2.6.1” 项色谱条件下进样测定。结果见表2～3。

表2 不同加工工艺柴胡药材中柴胡皂苷含有量测定结果（%， n＝2）

表3 不同加工工艺柴胡饮片中柴胡皂苷含有量测定结果（%， n＝2）

3 讨论与结论

柴胡药材加工方面，不同加工工艺的柴胡药材浸出物含有量在±10%之内，无显著性差异。不同加工工艺的柴胡药材中均为柴胡皂苷a 和柴胡皂苷d 的含有量最高，柴胡皂苷c 次之，柴胡皂苷b1、b2最低。结果虽以三成干烘干的柴胡皂苷总量最高，但柴胡皂苷a 和柴胡皂苷d 的总含有量不如烘至全干的含有量高。同时发现晾至全干、烘至全干、三成干烘干柴胡药材的皂苷总含有量RSD 为1.40%，这3 种加工工艺的柴胡皂苷a 含有量RSD 为2.61%，柴胡皂苷d 含有量的RSD 为1.26%，因此3 种加工工艺的柴胡药材中皂苷a、d、皂苷总含有量及浸出物值均差别不大，所以从节约能源成本和操作难易程度来看，柴胡药材以晾干较为适宜。

柴胡饮片加工方面，以药材全干后蒸30 min 再切2～4 mm 厚片，烘干，制得的饮片中柴胡皂苷a 和柴胡皂苷d的含有量最高，且该加工工艺的柴胡皂苷总量也最高，浸出物含有量也相对较高，由此初步得出柴胡饮片最佳产地加工工艺为： 取柴胡药材，洗净，蒸30 min，切2～4 mm厚片，烘干。不同加工工艺的柴胡饮片浸出物含有量在±10%之内，同时发现鲜切晾干、三成干切晾干、三成干切烘干、五成干切晾干、五成干切烘干5 种方法所得的柴胡饮片皂苷总含有量RSD 为1.52%，柴胡皂苷a 含有量RSD为3.39%，柴胡皂苷d 含有量RSD 为3.60%，因此从节约成本方面考虑，认为鲜药材到五成干药材切后晾干均较为适宜。