张作松

摘 要：建立液相色谱-质谱法对食品中添加的糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜与三氯蔗糖进行检测。样品加入50%甲醇溶液后再添加蛋白质沉淀剂亚铁氰化钾和乙酸锌，去除蛋白质，超声、离心提取，上清液过0.22 μm有机滤膜制成待测样品供检测，流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液和乙腈，梯度洗脱，在负离子模式下通过MRM模式采集数据，加标浓度分别为1、5、10 mg/kg时，加标回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.95～6.33。

关键词：液相色谱-质谱;糖精钠;甜蜜素;安赛蜜;阿斯巴甜;纽甜;阿力甜;三氯蔗糖

甜味剂是能够赋予食品甜味的物质的总称，适量添加可使食品具有适口的感觉、良好的风味，又可保留新鲜的味道。甜味剂按其来源分为人工甜味剂和合成甜味剂。人工甜味剂主要是指一些具有甜味但不是糖类的化学物质，甜度一般比蔗糖高十倍至数百倍;其化学性质稳定，耐热、耐酸碱，不易出现分解失效现象，不具有任何营养价值[1]。常见的人工甜味剂有糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜、三氯蔗糖与糖精等。如果超量使用，则会危害人体健康，为此，国家对甜味剂的使用范围及用量进行了严格规定。为确保合成甜味剂的合理使用，必须对添加种类及含量进行准确测定[2]。本文通过实验建立了测定食品中7种甜味剂的超高效液相色谱-质谱法。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

Waters Xevo TQ-S液相色谱质谱联用仪;湖南赫西仪器装备离心机，甲醇（HPLC纯）;实验室自制超纯水;甲酸（色谱级），甲酸铵（分析纯），乙腈（HPLC纯）;安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜与三氯蔗糖（均≥98%）。

1.2 色谱条件

色谱柱：C18柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）;流动相：A为0.1%（体积分数）甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液，B为乙腈;柱温：35 ℃;进样量：10 μL，流动相的洗脱程序见表1。

1.3 质谱条件

离子源：ESI;扫描方式：负离子扫描;检测方式：多反应监测扫描模式（MRM），干燥气温度：500 ℃;气体流速：1 000 L/Hr。

1.4 样品前处理

取3 g左右样品于50 mL离心管中，加入20 mL甲醇-水（1∶1）超声提取30 min，加入2 mL 10.6%的亚铁氰化钾和22%的乙酸锌涡旋1 min混匀后，于10 000 r/min速率下离心20 min，上清液转移至100 mL容量瓶中，重复提取一次，合并上清液，用甲醇-水（1∶1）定容至刻度线，过0.22 μm有机滤膜，供液相色谱-质谱仪器上机检测。

2 结果与讨论

2.1 流动相条件的选择

参照SN/T3538-2013《出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱一质谱/质谱法》检测标准[3]，分别用纯水、0.1%乙酸铵溶液和0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵溶液作流动相水相，以甲醇和乙腈作为有机相进行试验，最终确定流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵溶液和乙腈。

2.2 標准曲线的建立与分析

以空白糕点样品为基质制备基质空白标准溶液，7种甜味剂用空白标准溶液配制成系列标准浓度。图1是七种甜味剂样品的质谱图，实现了7种样品的同时检测。将质谱检出的峰面积与标准溶液浓度进行拟合计算出目标物的线性回归方程、相关系数、线性范围和检出限，如表3所示。回收率试验的加标浓度分别为1、5、10 mg/kg，每份样品分别测定5次，平均回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.95至6.33。

3 结论

本文通过液相色谱-质谱法检测糕点中的甜味剂，参考SN/T3538-2013《出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱-质谱/质谱法》，并优化质谱和色谱条件，提高检测效率，为甜味剂检测提供一种高效、快捷的检测方法。利用液相色谱-质谱联用技术建立同时测定多组分甜味剂的方法将成为将来食品安全检测技术的发展方向之一，确保检测结果的准确性。

参考文献

[1]刘婷，吴道澄.食品中使用的甜味剂[J].中国调味品，2010，35（11）：35-39.

[2]舞太鹏，马康.合成甜味剂检测技术的研究进展[J].化学分析计量，2017，26（6）：109-115.

[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.SN/T3538—2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱一质谱/质谱法[S].北京：中国质检出版社，2013.