周淼

甲酸是一种无色而有刺激气味的液体。中国药典规定药物中甲酸残留量不得大于5000ppm，但没有统一的测定方法，为了保障药物的质量和用药安全，在药物分析中，能为甲酸含量的测定建立一个合适的方法，尤为重要。

本次试验主要利用高效液相法测定药物中甲酸含量，通过对方法的精密度、线性范围、耐用性、专属性、定量限及检测限的检测，以证明该方法适用测定甲酸残留量的检测要求。

1.色谱条件

色谱柱：C18，250mm×4.6mm，5μm

流动相：0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液，用磷酸调PH值为2.8，用0.45μm的微孔滤膜过滤，超声。

检测波长：210nm

检测温度：40℃

进样量：20ul

流速：0.3ml/min

运行时间：15min

2.试验方法

2.1甲酸含量的测定

精密量取1.0ml甲酸，放入预先盛有约20ml无二氧化碳的磨口的三角瓶中，加2～3滴酚酞指示液，用氢氧化钠标准滴定液（0.5mol/L）滴定至浅粉色，30秒不褪色即为终点。标定4份取平均值。

计算：

X= %

X1= =95.0%

X2= =95.2%

X3= =95.3%

X4= =95.2%

甲酸含量均值为95.2%

2.2精密度

2.2.1 溶液制备：

☆甲酸贮备溶液：精密吸取50μl的甲酸试剂置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

☆精密吸取甲酸贮备溶液2ml，置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。甲酸的浓度为76ug/ml。

2.2.2步骤与结果

取上述对照溶液20μl注入色谱仪，连续进样6次，精密度试验结果如下：

2.3准确度试验

2.3.1测定方法：以已知甲酸含量的阿奇霉素样品为参考品，以甲酸贮备液为待测品，将待测品加入到参考品，通过实测甲酸含量与加入含量比较，计算回收率。

2.3.2溶液制备：

精密称取阿奇霉素样品 2.0167g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸盐缓冲液溶解，并稀释至刻度，摇匀（溶液PH值为2.8），作为供试品溶液。

回收溶液（1）：精密称取阿奇霉素2.0542g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸盐缓冲液溶解，加入吸取0.3ml甲酸贮备液，再用PH1.6磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀（溶液PH值为2.8）。

回收溶液（2）：精密称取阿奇霉素2.1452g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸盐缓冲液溶解，加入吸取0.5ml甲酸贮备液，再用PH1.6磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀（溶液PH值为2.8）。

回收溶液（3）：精密称取阿奇霉素2.0639g置25ml容量瓶中，加PH1.6磷酸盐缓冲液溶解，加入吸取1.0ml甲酸贮备液，再用PH1.6磷酸盐缓冲液稀释至刻度（溶液PH值为2.8），摇匀。

2.3.3回收率试验结果如下 ：

试验结果表明回收率平均值为  102.8 %，此方法的回收率好。

2.4检测限、定量限

根据信噪比為3确定检测限，信噪比为10确定检定量限，检测限浓度为2.86ug/ml，定量限浓度为9.52ug/ml。

2.5线性

分别精密吸取甲酸标准贮备液0.25、0.5、1.0、2.0、5.0ml置25ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。取过滤液20μl进样。利用峰面积为y轴与甲酸含量（以μg计）为x轴，制作标准曲线。