梁靖怡 杨子峰 刘勇 江梅

1广州呼吸健康研究院 广州医科大学附属第一医院510120;2广州金域医学检验中心有限公司510330

急性呼吸道感染是最常见的感染性疾病,其中大约70%～80%由病毒引起,包括鼻病毒、冠状病毒、腺病毒、流感和副流感病毒、呼吸道合胞病毒、埃可病毒、柯萨奇病毒等,另有20%～30%的上呼吸道感染可由细菌或真菌引起。

尽管部分急性呼吸道感染病情轻微且有自限性,但在2015年全世界有近3亿起急性呼吸道感染案例,其中274万人死于下呼吸道感染［1-2］。据估计,2010年全世界的幼儿因严重急性呼吸道感染需要住院治疗多达1 490万例［3］。此外,急性呼吸道感染相关性肺炎是造成发展中国家＜5岁儿童死亡的主要原因［4-5］。再者,据WHO 2019年最新揭示,流感和埃博拉病毒等高危呼吸道病原体均列入十大影响健康的危险因素［6］。

由此可见,急性呼吸道感染对人群健康影响较大,发病率高,传播快,是不可忽视的重大公共卫生问题。广东地处亚热带沿海,属海洋性亚热带季风气候,毗邻港澳地区。同时也是21世纪海上丝绸之路的重要一环,人口密集,国际贸易频繁,这为各种呼吸道病原体活动提供了条件,对该地区进行呼吸道病原体流行病监测调查更显得意义重大。

1 对象与方法

1.1 研究对象 回顾性研究2018年5月至2019年5月广东省21 个市内急性呼吸道感染的人群。急性呼吸道感染定义为:急性起病,病程72 h以内;体温(腋下温度)≥37.3 ℃,伴呼吸道症状;白细胞计数＜10.0×109/L。

送检医院包括115 家三级医院、104 家基层医院。共收到41 487份呼吸道样本,其中≤1岁人群13 508份 (占32.56%),1 岁以上至97 岁人群27 160 份 (占65.47%), 年 龄 不 明 819 份(占1.97%)。本研究符合 《赫尔辛基宣言》的原则。

2.2 人群特征分布 各年龄段检出率前三位的病原体均有不同(图1)。0～2岁婴幼儿为呼吸道合胞病毒、腺病毒和副流感病毒,3～12岁儿童为甲型流感病毒、腺病毒和肺炎支原体,13～18岁青少年为甲型流感病毒、EB 病毒和柯萨奇CA16病毒,19～25岁青壮年为腺病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒,26～40岁人群为柯萨奇CA16 病毒、乙型流感病毒和EB病毒,41～60岁中老年人群为甲型流感病毒、EB病毒和柯萨奇CA16病毒,60岁以上老年人为甲型流感病毒、EB病毒、巨细胞病毒。

甲型流感病毒高发于3～18岁人群,阳性检出率都高于20%,其次是41～60岁人群。巨细胞病毒、EB病毒、柯萨奇CA16病毒都随人群年龄段升高检出率增加。乙型流感病毒在19～40岁青壮年人群检出率最高,高达15%,但在0～2岁年龄前儿童检出率最低,仅为0.18%。腺病毒在19～25岁人群检出率最高(22.76%),在13～18岁青少年人群检出率最低(1.75%)。

1.2.1 样本采集及处理 首先让患者尽量张口,采用无菌聚酯纤维塑料柄拭子采集患者双侧后咽和扁桃体部位分泌物,采集后立即将咽拭子装入含有2 ml病毒运输培养液的无菌小瓶中,置于-80 ℃冰箱中待检。

随着非洲猪瘟病毒影响范围的不断扩大，这一疾病在我国国内也受到更多的关注，为避免这一病毒在我国进一步扩散，对猪的养殖以及其他普通消费者生命健康带来的影响，针对这一疾病的流行方式、防控办法以及带来的风险进行研究非常有必要。结合现状分析，我国大部分养殖人员对于非洲猪瘟已有初步的认识，但对于具体防控工作的展开，由于对这一疾病的作用方式、致死概率等的了解不深入，相关人员在防控工作展开中经常会出现掉以轻心甚至敷衍了事的现象。一旦非洲猪瘟在我国养殖市场中的影响范围不断扩大，那么必然会对猪的养殖及贩卖等带来极大的打击[1]。

电动工况运行时，变频发电机及变频电动机不投入运行，10台1 600 kW主电机运行电动抽水工况，独立起停；励磁装置的开机及工作流程为常规方式。10台1600kW主电机在电动抽水工况运行时，电机的机端电压为6 kV，频率为50 Hz，在发电工况运行时，电机的机端电压为3 kV，频率为25 Hz。励磁装置配置在发电开机及运行时选择25Hz工作模式，外环调节采用恒无功功率（无功功率设定值设置为0，即cos φ=1）闭环调节，内环采用恒励磁电流调节；在电动抽水运行时选择50 Hz工作模式，外环调节采用恒功率因数闭环调节，内环采用恒励磁电流调节。

课题承担单位完善财务管理制度，加强财务管理的内部控制，明确审批制度的权限，严格按照规章制度检查费用，保证课题经费能够按照预算执行，保障经费的安全。

2 结果

高校在制定课程监测与评价体系时，要尽可能囊括制约课程建设质量的全部因素，其中涉及课程数量、授课师资结构、授课方式等。当能对指标进行定性表述时，一定要确保用词准确、标准具体，使监测与评价结果具有客观可信度。同时，对于学生接受效果、教师授课感染力、课程实效性等无法用具体评价标准表述的隐形因素时，要尽可能将其转化为可以定性评价的显性指标，以增强监测与评价的可测性。

1.3 统计学分析 采用SPSS 20.0进行统计学分析。计数资料以百分率表示,组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

1.2.2 检测方法 病原体采用荧光定量PCR 核酸检测,检测前用涡旋振荡器充分混匀,标本试剂盒购于广州呼吸健康研究所医药科技有限公司,操作流程与试剂盒说明书一致。检测仪器为ABI7500荧光定量PCR 仪,阳性标准为Ct值＜40。

表1 不同呼吸道病原体检出情况

1.2 研究方法

采用黄希庭等编制的《大学生学习动机问卷》，问卷分为26个项目，分6个维度：求知进度、社会取向、物质追求、害怕失败、个人成就、小群体取向，采用6点计分。

呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、人鼻病毒、副流感病毒在0～2岁婴幼儿群体检出率最高,其中呼吸道合胞病毒检出率高达19.48%,副流感病毒检出率为10.48%。此外,单纯疱疹病毒在老年人群(＞60岁)检出率高达11.76%,在12岁以下人群检出率都高于5%。非典型病原体方面,肺炎支原体在3～12岁人群检出率为12.25%,明显高于其他年龄段;肺炎衣原体在各个年龄段都有散发,没有明显的年龄分布。送检的样本中,肠道病毒EV71仅在13～18岁人群检出。

2.1 呼吸道病原体检出总体分布情况 41 487份标本中共检出阳性标本3 813份,平均检出率为9.19%。其中呼吸道合胞病毒检出率最高,为14.69%,其他依次为腺病毒(13.98%)、EB病毒(10.09%)、甲型流感病毒 (9.31%)、柯萨奇CA16病毒 (7.99%)、肺炎支原体 (6.44%)、副流感病毒(6.18%)、巨细胞病毒(6.16%)、人鼻病毒 (5.91%)等。冠状病毒229E、NL63 均未检出。见表1。

图1 不同年龄组的呼吸道病原体构成谱

2.3 季节分布 柯萨奇CA16 病毒主要流行于2018年夏秋季节之间,在秋季到次年春季的检出率低(＜1%)。EB 病毒、鼻病毒在秋季过后检出率开始增加,但副流感病毒和乙型流感病毒的检出率临近冬季逐渐增加,这些病原体都在次年春季的检出率达到了峰值。甲型流感病毒在秋季至次年春季间均有检出,并在冬季达到了峰值 (检出率＞25%)。见图2。

图2 甲型流感病毒等6种呼吸道病原体季节分布

腺病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒的检出率在秋季后开始上升,在冬季达到峰值。肺炎支原体、人偏肺病毒在秋季后到次年春季检出率逐渐上升。单纯疱疹病毒在4个季节均有检出。见图3。

图3 呼吸道合胞病毒等6种呼吸道病原体季节分布

2.4 与流感监测数据比较 本研究甲型流感病毒监测结果呈现2个流行高峰,分别是2018年22～26周和2018年48周至2019年18 周,而国家流感中心发布的甲型流感病毒数据只有1 个流行高峰,为2018年45周至2019年18周。见图4。

图4 2018年18周至2019年22周甲型流感病毒监测数据比较

3 讨论

现有对广东地区呼吸道感染病原体构成谱进行介绍的研究不多,邹丽容等［7］曾对2009-2011年广东地区急性呼吸道感染1 234份标本进行分析,而大部分研究的主体对象是急性呼吸道感染患儿［8-13］,其中部分检测方法是利用血清学Ig M 检查。本研究利用核酸检测方法对广东地区人群送检的41 487份标本进行检测分析,能够更准确、更全面地反映本地区呼吸道病原体的流行情况。经分析总体检出率可知,2018年5月至2019年5月广东地区呼吸道感染人群中检出的病原体主要为呼吸道合胞病毒、腺病毒、EB 病毒和甲型流感病毒,阳性检出率为10%左右或者以上。由此可见,广东地区呼吸道病原体构成谱比较丰富。另外值得注意的是,肺炎每年导致近100万儿童死亡,但肺部感染的确切原因往往难以诊断,迫使医师依赖抗生素,其疗效往往受到制约。最近有研究发现病毒是引起儿童肺炎的主要病原体,而不是细菌。其中呼吸道合胞病毒最多,占所有病例的近1/3［14］。然而,从年龄分布可知广东地区0～2岁婴幼儿主要病原体为呼吸道合胞病毒、腺病毒和副流感病毒,其中呼吸道合胞病毒检出率高达19.48%,在冬春季达到流行高峰,这与陈炫炜等［15］报道一致。因此本地区儿童呼吸道感染治疗过程中应注意尽快明确病原体,及时进行抗病毒药物治疗,减少儿童肺炎的发生。另外,巨细胞病毒、EB 病毒、柯萨奇CA16病毒都随人群年龄段升高检出率增加。这提示免疫低下的中老年人要注意对以上病毒进行适当防护。从季节分布来看,柯萨奇CA16病毒仅在夏秋季之间流行,单纯疱疹病毒全年均有散发流行。大部分病原体进入秋季后检出率明显上升,例如人鼻病毒、EB病毒、甲型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、人偏肺病毒、巨细胞病毒,其中在冬季达到高峰的有呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒。除以之外,乙型流感病毒、副流感病毒在冬季后检出率才有明显上升。大部分病原体有比较明显的季节分布特征,本地医疗工作者可结合季节流行情况和实验室检测数据对急性呼吸道感染人群进行诊断。最后,流感病毒是第一个实现全球共同监测的传染病,这是由流感病毒本身的特性决定的。第一,流感病毒的传染性和传播力比较强;第二,流感病毒自我复制的错误率较高,没有纠错功能,容易产生变异［16］;第三,流感病毒有不同的基因片段,不同流感病毒混合感染时容易产生基因重配,从而提高变异性。我国流感监测网络不断发展,2009 年已扩大至411 家流感网络实验室和556 家哨点医院。但是现有的流感监测网络还存在以下缺陷［8］:病原体种类单一;需要政府长期的人力和财力支持;监测数据未被有效转化。本研究通过转换医疗检验大数据,同时反映了12种呼吸道病原体流行趋势。而且通过与国家流感中心发布的流感监测数据对比发现,本研究的监测数据显示一个甲型流感高峰会在夏季出现,具有一定的广东地区代表性。本研究还存在一定的局限:比如讨论的呼吸道病原体数量较多,仅对其流行情况做了简单的描述性分析,下一步需结合病毒分型进行详细讨论,以获得更详细的流行结果;其次,仅与国家流感中心发布的甲型流感监测数据作了比较,还未与乙型流感数据比较;再者,本研究仅分析了不同呼吸道病原体的年龄分布和时间分布情况,未进一步分析不同地区分布情况,需后续进一步分析研究。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突