刘冬冬，张嘉琪，宋莹，胡剑，尚陈宇，石文，林莉，林海标，黄译乐，徐建华（通信作者）

1 广州中医药大学第二附属医院·广东省中医院检验医学部 （广东广州 510120）；2 广州中医药大学顺德医院 （广东佛山 528333）

载脂蛋白A1（apoprotein A1，ApoA1）在肝及肠黏膜中合成，主要存在于高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）中[1]。有研究表明，ApoA1与心脑血管疾病的发病及患者死亡相关[2]，因此，ApoA1的有效检测对疾病诊断及预后具有重要的意义。干扰物常存在于日常检验工作中，可导致检验报告不可靠。近年来，生化检测试剂品种日益增多，全自动生化分析仪在同一个检测项目的检测中，使用不同厂家的试剂可能会导致检测结果不同[3]。罗氏公司试剂说明书指出，在Modular P800模块上，使用罗氏第二代低密度脂蛋白胆固醇（lowdensity lipoprotein chesterol，LDL-C）试剂会对罗氏ApoA1检测存在比色杯携带污染干扰，建议在“Special Wash”程序中设置针对罗氏LDL-C试剂检测该项目后进行酸性清洗液冲洗的步骤，以消除LDL-C试剂对ApoA1检测的携带污染干扰。本研究参照美国临床实验室标准化委员会（Clinical Laboratory and Stardards Institute，CLSI）的EP7-A2文件及仪器说明书，探讨罗氏Modular P800生化分析仪使用LDL-C试剂对ApoA1检测比色杯携带污染的干扰效应，并寻求有效的解决方案，供同行参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

罗氏Modular P800全自动生化分析仪；罗氏LDL-C试剂（批号：674 550-01）；积水LDL-C试剂（批号：805RJJ）；罗氏ApoA1（批号：683890-01）。

1.2 标本

1.3 方法

1.3.1 仪器校准

按照说明书和实验室标准操作程序（Standard Operation Procedure，SOP）文件对仪器进行校准，使仪器处于正常工作状态[4]。

1.3.2 罗氏Modular P800比色杯的使用规律分析

通过实验探讨罗氏Modular P800 160个比色杯的使用规律，设计方案使施污染项目（LDL-C）与受污染项目（ApoA1）共用同一个比色杯，且保证每圈检测将160个比色杯全部用完。

1.3.3 比色杯携带污染的验证分析

本实验以LDL-C（施污染项目）与ApoA1（受污染项目）为研究对象，分别检测LDL-C（高、低浓度）、ApoA1（高、中、低浓度）各10次，取平均值作为对照值。第1圈为实施污染：6、12、18……156、2、8、14、20号比色杯（间隔6个）检测LDL-C 低浓度样本，26、32、38……158、4、10、16……40号比色杯检测LDL-C 高浓度样本，剩余比色杯测试用水样本填充；第2圈检测受污染项目。将所得结果分别与对照值比较，携带污染率=（检测均值-对照值）/对照值×100%。比色杯携带污染率绝对值大于该项目室内质控变异系数（coefficient of variation，CV），被认为携带污染不可接受；本实验定义相差±5%以上为存在携带污染[5]。

1.3.4 比色杯携带污染的解决方案分析

根据试剂成分特征和厂家推荐，选择去离子水、酸性洗液对确认污染的项目进行特殊清洗。第1圈为实施污染，6、12、18……120号样本检测施污染项目，剩余以水样本填充；第2圈为特殊清洗，所有样本均为血清，166、172、178……220号为水清洗组，用水进行清洗，226、232、238……280号为酸清洗组，用酸性洗液进行清洗，剩余以水样本填充；第3圈检测受污染项目，321～350号样本检测受污染项目，其中321～330号为水清洗组，331～340号为酸清洗组，341～350号为对照组。将水清洗组、酸清洗组分别与对照组比较，携带污染率=（清洗组均值-对照组均值）/对照组均值×100%，相差±5%以上为清洗无效。

2 结果

2.1 罗氏Modular P800比色杯的使用规律

罗氏Modular P800有160个比色杯，实验发现其使用规律，无样本稀释的项目随着样本号的递增，比色杯的间隔是41个；有样本稀释的项目，连续测试时比色杯的间隔为86个，见表1。

数据通过SPSS 21.0统计学软件作统计学处理，其中并发症发生率、子宫肌瘤残留率、复发率、成功妊娠率等计数资料[n（%）]通过χ2检验，而空腹血糖水平等计量资料（±s）以t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 罗氏Modular P800比色杯的使用规律（前10个样本号和比色杯号）

2.2 LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染的干扰效应验证

2.2.1 罗氏LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染的干扰效应验证

罗氏LDL-C 试剂在Modular P800上测试其对罗氏ApoA1检测比色杯的携带污染干扰情况，以±5%为可接受范围，结果显示，均存在干扰，见表2。

表2 罗氏LDL-C 试剂在Modular P800上对罗氏ApoA1检测的干扰情况

2.2.2 积水LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染的干扰效应验证

积水LDL-C 试剂在Modular P800上测试其对罗氏ApoA1检测比色杯的携带污染干扰情况，以±5%为可接受范围，结果显示，均不存在干扰，见表3。

表3 积水LDL-C 试剂在Modular P800上对罗氏ApoA1检测的干扰情况

2.3 罗氏LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染干扰不同清洗方案的效果分析

比色杯携带污染干扰效应验证结果显示，在罗氏Modular P800全自动生化分析仪上存在罗氏LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染，为消除此干扰，实验室采用酸性洗液和去离子水进行清洗，发现清洗后干扰均消除，见表4。

表4 罗氏LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测比色杯携带污染干扰不同清洗方案的效果分析

3 讨论

全自动生化分析仪是临床实验室必备的检验仪器，是生化检测系统的重要组成部分，精密度、准确性和效率特性均高。但是，仪器使用过程中会出现携带污染现象，其中，比色杯的携带污染是临床生化项目检测不正确度的来源之一[6]。携带污染将影响检测结果的准确性和重复性，导致结果失真，误导临床诊断和治疗，因此，在使用全自动生化分析仪检测标本时，应对可能发生携带污染的项目采取相应的清洗措施，以科学的处理方法和解决措施，有效降低携带污染的影响程度，确保检测结果的准确、可靠[7]。

比色杯污染实验的难点在于比色杯定位，罗氏Modular P800有160个比色杯。本研究发现，未进行样本稀释的项目随着样本号的递增，比色杯的间隔是41个，观察到一圈160个比色杯全部用完后，第161个测试开始和第1个测试的比色杯号相同，该现象可以通过测试项目的反应曲线得到验证，由于要保证1～160的测试连续进行，才能进行验证，所以实验安排上应确保连续测试160个才可进行第2圈比色杯重新排序测试；进行样本稀释的项目，用0.9%氯化钠注射液作预稀释，连续测试时比色杯的间隔为86个，主要原因为稀释过程需要增加5个加样机械动作，设计实验方案需考虑第2圈受污染项目进行了样本稀释动作，所用比色杯号和第1圈施污染项目测试所用比色杯号要一一对应才能达到评价干扰的目的。

携带污染的常见类型：试剂中含有下一测定的待测成分；残留物作为下一测试的中间产物；残留物影响下一测试的吸光度；残留物与下一测试标本发生其他反应产生与下一测试类似的产物；原因不明等[8]。随着使用时间的延长，全自动生化分析仪比色杯内表面黏附作用增强，冲洗能力下降，携带污染相应地增加。比色杯携带污染不仅与仪器清洗效率有关，还与所测项目的检测方法及试剂成分有关。本实验中，罗氏LDL-C 试剂高、低浓度对罗氏ApoA1高、中、低浓度的6组数据显示，均存在严重的比色杯携带污染，且LDL-C 高浓度影响较大，由清洗效果可以看出，经过特殊清洗（去离子水、酸性洗液）后，可以排除携带污染的影响，且水清洗与酸清洗效果基本一致；而积水LDL-C 试剂对罗氏ApoA1检测不存在比色杯携带污染。因此，在罗氏Modular P800全自动生化分析中，当罗氏LDL-C 和罗氏ApoA1项目组合时，临床实验室可采用水清洗方法解决比色杯携带污染问题，节约特殊清洗通道及清洗成本。本实验结果显示，干扰效应与特定试剂、仪器等因素相关，本实验的比色杯携带污染干扰效应评价方案可为临床提供参考。

本研究仅针对罗氏公司和积水公司特定试剂进行分析，其他品牌试剂尚不可轻易判定干扰效应是否有意义，因此，实验室应根据干扰评价实验数据、检测成本，综合考虑并选择合理的清洗液。