肖 敏 徐洪来

(广西柳州市人民医院1 皮肤科，2 肝胆外科，柳州市 545006，电子邮箱：501880191@qq.com)

恶性黑素瘤简称为黑素瘤，起源于黑素细胞，恶性程度高，进展迅速，极易发生远处转移，致死率高，预后差[1]。目前黑素瘤的治疗方法有手术、化疗、放疗、免疫治疗和靶向治疗等，但效果均不理想[2]。尤其是针对黑素瘤的化疗药物常难以渗透至肿瘤深部，且毒副作用大，极易发生耐药，疗效并不显著[3]。近年来，有关中草药治疗恶性肿瘤的研究日益增多，寻找治疗黑素瘤的敏感中药已成为目前研究的热点。最近的研究显示，川芎嗪具有较好的抗肿瘤效应[4]。但川芎嗪对黑素瘤细胞的作用还鲜有研究报告。本研究探讨川芎嗪对人恶性黑素瘤A875细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响，旨在为临床治疗黑素瘤提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、药物和试剂 人皮肤恶性黑素瘤A875细胞(中国典型培养物保藏中心)；川芎嗪(远大医药中国有限公司，批号：H42021600)；RPMI 1640培养基(美国HyClone公司，批号： SH30809.01B)；四甲基偶氮唑盐试剂盒(武汉谷歌生物科技有限公司，批号：G4101)；一抗含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)3兔单抗(美国Abcam公司，批号：ab44976)，环氧化酶(cyclooxygenase，COX)-2兔单抗(北京中彬金桥生物技术有限公司，批号：ZA.0515)，二抗(北京中彬金桥生物技术有限公司，批号：ZF.0311)。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养：将人黑素瘤A875细胞置于含10%胎牛血清的 RPMI-1640培养基中，于5% CO2、37℃、相对湿度90%的条件下传代培养，每2天传代1次，取对数生长期细胞用于实验。

1.2.2 细胞增殖检测：将人黑素瘤A875细胞接种于96孔培养板……