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辣根过氧化物酶和荧光碳点的复合物研究

2020-08-19丁海贞

生物学杂志 2020年4期

刘 利, 丁海贞, 房 伟, 毕 红,3

(1. 安徽大学 化学化工学院, 合肥 230601; 2. 安徽大学 生命科学学院, 合肥 230601; 3. 现代生物制造安徽省重点实验室, 合肥 230601)

辣根过氧化物酶(HRP)是临床检测试剂中的一种常用酶,它是由棕色的铁卟啉与无色的酶蛋白结合而成的糖蛋白,其辅基活性位点中含有Fe (III)。当HRP与底物孵育时,可产生一种着色、荧光或发光标记的分子衍生物,因此广泛用于多个生化检测项目和免疫类(ELISA)试剂盒[1]。酶作为一类生物催化剂,具有专一性和高效性,但受酸碱度、温度等外界环境条件影响较大,易失活或者变性,这极大限制了酶的应用。因此,酶的修饰和固定化就显得非常重要,酶修饰和固定化后不仅保持酶自身的催化特性,也可改善其反应条件等[2-3]。Shen等[4]将HRP与磁性介孔二氧化硅纳米粒子以及碳点(CDs)复合,提供了一种能消除细胞中应激产生的活性氧(ROS)的方法。Hu等[5]制备了可调节漆酶活性的手性CDs,发现具有左旋结构的CDs与漆酶复合后可以将漆酶的活性提高至20.2%,而右旋结构的CDs与漆酶复合后却将其活性降低至10.4%。CDs这一类碳纳米材料因其表面富含官能团,且具有良好的生物相容性等优点使其易于与HRP等生物大分子复合。

CDs是一类具有10 nm以下尺寸的碳基纳米粒子的总称[6-7]。CDs具有尺寸小、荧光量子产率高、光致发光性能可调和生物相容性好等优良特性,在化学传感、生物显影等方面都有很大的应用潜力[8-9]。CDs中心一般是结晶的碳核,表面含有大量的有机官能团,从而易于对CDs表面进行修饰和功能化,来调节其表面结构和光学性质[10]。……

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