刘得水 周建文 程昊 赵诗瑶 李洋 张英华 徐广有

摘  要：目的  本研究探讨氯喹对肝癌细胞在低氧环境下的增殖和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法  取肝癌细胞HepG2细胞分成空白对照组，阴性对照组，和氯喹干预组，采用qPCR检测氯喹在肝癌细胞HepG2以及正常肝组织上皮细胞SMMC-7721中氯喹的表达水平。用氯喹处理HepG2细胞;通过MTS微量酶反应比色法、流式细胞术、western blot，葡萄糖和乳酸检测分析试剂盒，检测给予氯喹刺激后对HepG2的增殖、侵袭的影响、以及其对Wntβ-catenin通路表达的影响。结果  与空白对照组相比，氯喹组的HepG2迁移能力显著降低（P<0.05），氯喹组总凋亡率为35.5%，对照组总凋亡率为13.4%，氯喹组总凋亡率显著升高（P<0.05）。氯喹组OD 520值为（8.51±0.45），对照组为（2.97±0.33），氯喹组细胞侵袭能力降低（P<0.05）。Wntβ-catenin通路的相关蛋白表达降低。结论  氯喹可通过调控Wntβ-catenin通路表达，调控HepG2细胞增殖，凋亡及侵袭能力。

关键词：肝癌;氯喹;增殖;Wntβ-catenin通路

中图分类号：R735.7    文献标识码：A    文章编号：1009-8011（2020）-11-0039-03

肝癌是我国发病率非常高的分泌系统恶性肿瘤，易复发，5年生存率极低。目前迫切需要找到新的分子靶点和治疗策略来遏制肝癌发展恶化[1-3]。氯喹是一种抗疟原虫药，其作用机制在于本品与核蛋白有较强的结合力，插入到DNA的双螺旋两股之间，可与DNA形成复合物，从而阻止DNA的复制与RNA的转录[4-5]。目前肿瘤细胞代谢方面的研究已成为当今肿瘤研究的热点。本研究将通过分子实验预测氯喹对肝癌细胞增殖与分化以及糖代谢的影响，为临床诊治提供新靶标。

1  材料与方法

1.1  细胞培养

肝癌HepG2（ATCC○ CRL-1420TM）细胞购自中国科学院细胞库，正常肝组织上皮细胞SMMC-7721（由广州烨善生物科技有限公司提供）用10%FBS（Hyclone，USA）、DMEM（Gibco Corporation，USA）培养于37℃、5%C02潮湿大气细胞培养箱中。将实验分为三组：空白对照组，阴性对照组，氯喹干预组。

1.2  氯喹浓度及给药方式