崔忠心

【摘  要】目的：探讨不同的流感病毒检验方法的应用效果。方法：选取2018年10月-2019年12月本疾控中心收治的160例流感样病例作为研究对象，对其分别实施了胶体金免疫层析技术（GICA）和实时荧光RT-PCR两种方法进行相关流感病毒检测，并对比分析两种方法的检验结果。结果：RT-PCR检测法阳性患者有78例，阳性率为48.75%;GICA检测法阳性患者有73例，阳性率为45.63%。通过比较分析两种方法的检测结果发现结果一致的患者数为61例，检测结果差异无统计学意义（P>0.05）。结论：GICA检测方法具有简单、快速、便捷的特点，可提高临床诊断的准确性，以便于制定更及时、更准确、更科学的治疗方案。

【关键词】流感病毒;胶体金;荧光RT-PCR;比较研究

【中图分类号】R197      【文献标识码】A      【文章编号】1672-3783（2020）08-0022-02

流感在临床上属于流感病毒引发的一种急性呼吸道传染病，因流感病毒属于RNA病毒，且潜伏期短，传染性较强及已发生变异等特点，一旦感染流感病毒，严重降低了患者的生活质量，甚至威胁生命健康。临床通常采取分离病毒、鉴定病毒或细胞培养作为检测流感病毒的常用手段，但因消耗时间长，特别是针对爆发疫情时难以满足病毒诊断的要求[1]。本研究采用胶体金免疫层析技术（GICA）和实时荧光RT-PCR两种方法进行相关流感病毒检测，现将对比结果报告如下：

1. 资料与方法

1.1一般资料

选取2018年10月-2019年12月本疾控中心收治的160例流感样病例作为研究对象，其中男74例，女86例，年龄6个月-80岁，平均（40.31±2.85）岁;发热时间 1-5d，平均（2.85±0.26）d。

1.2方法

1.2.1样本提取方法

将压舌板抵于患者的舌根部，将两根咽拭子同时探入患者的咽部，将扁桃体隐窝处上皮细胞组织取下。把一根咽拭子放入pH值在7.4-7.6的Hank's溶液中，而将另一根咽拭子放入胶体金快速检测的裂解液中。

1.2.2GICA检测方法

对装有样本的细胞裂解液进行充分搅拌，用吸管取3-4滴裂解液于检测卡的加样孔中，待15min后观察分析检测结果。若检测区和对照区分别出现一条红色带，则表示检测结果为阳性;若仅对照区出现一条红色带而检测区未出现红色带，则表示检测结果为阴性。

1.2.3 RT-PCR检测方法

提取方法为king? sher duo自动核酸提取仪及其配套试剂提取病毒核酸，检测试剂为上海之江的甲型流感病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法），PCR仪器为美国ABI 7500型实时荧光定量PCR扩增仪。

1.3统计学处理

应用SPSS 17.0统计软件，计数资料组间比较采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2. 结果

RT-PCR检测法阳性患者有78例，阳性率为48.75%;GICA检测法阳性患者有73例，阳性率为45.63%。通过比较分析两种方法的检测结果发现结果一致的患者数为61例，检测结果差异无统计学意义（P>0.05）。

3. 讨论

流感病毒属于正粘病毒科，根据流感病毒核蛋白和基质蛋白抗原性不同，将流感病毒分类为甲型、乙型、丙型3個属。再根据病毒表面血凝素和神经氨酸酶抗原不同，将甲型流感病毒分为诸多亚型，即H1-H18，N1-N11。流感潜伏期为1-5d。传播途径通过打喷嚏、咳嗽及说话时产生的细小液滴直接吸入传播。据世界卫生组织估计在非大流行的正常年份，流感病毒每年仍然感染全球5%-15%人口，造成约50万人死亡。流感临床表现多以发热突然发病，体温38-40℃，持续1-5d，可伴有咽喉痛、咳嗽、头痛、肌肉酸痛、畏寒和全身不适。流感临床表现并非特异，与其他呼吸道病原体感染不易区别。临床诊断疑似流感经病毒培养或核酸检测最终确认的仅有12.8%-26.2%[2]。因此，流感的实验室诊断是必要的，尤其对流感病毒神经氨酸酶抑制剂一线药物治疗，以及公共卫生感控尤为需要。

目前，流感病毒感染进行实验室诊断的方法有病毒培养、RT-PCR及GICA等。流感病毒培养纵然是检测的金标方法，可分别进行病毒分型及抗原变异分析的检测，但由于其检测周期过长，而操作十分繁琐，进而对检验人员的自身素质有着极高的要求，不适合爆发式疫情进行病原学的快速诊断。RT-PCR检测法也有许多优点，但RT-PCR的实验室需大型专用设备仪器，且实验室分区严格而要求洁净程度高，造成了极高的检验成本。胶体金免疫层析法是近年来兴起的一种免疫学检测技术，其核心是对流行性感冒病毒核心蛋白进行检测，稳定性好，检测速度快，操作简单，对操作人员的要求低，且完成现场检测。本研究中使用的国产试剂盒，目前只能检测出甲型流行性感冒病毒和乙型流行性感冒病毒，难以鉴定病毒亚型[3]。此外，本研究对流行性感冒样患者的快速检测结果进行系统化分析，经研究发现，检测结果阳性患者的咽痛、咳嗽、全身酸痛和流行病学史所占比例均高于阴性组。当两组患者就诊结束且停止使用抗菌药物和就诊后开始用抗菌药物均存在一定的差异性，这说明流行性感冒病毒快速检测可为流行性感冒的早期诊断提供技术支持和科学依据，这与以往报道中的研究结果存在较大相似性。但对于流行性感冒普通感冒患者而言，临床上不建议其使用抗菌药物进行治疗。

本研究结果显示，RT-PCR检测法阳性患者有78例，阳性率为48.75%;GICA检测法阳性患者有73例，阳性率为45.63%。通过比较分析两种方法的检测结果发现结果一致的患者数为61例，检测结果差异无统计学意义（P>0.05）。综上所述，在流行性感冒患者的临床诊断上，一方面要重视患者的临床症状和相关流行病学史，同时还需要结合胶体金免疫层析法的快速检测结果。胶体金免疫层析法具有简单、快速、便捷的特点，可提高临床诊断的准确性，以便于制定更及时、更准确、更科学的治疗方案。

参考文献

[1] 罗周正，张丽艳，李贺，等.探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析[J]. 中国医药指南，2020，18（16）：96-97.

[2] 史志坤.实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析探讨[J].中国医疗器械信息，2018，24（21）：129-130.

[3] 钟小婷，肖仁威，江秀兰，等.胶体金免疫层析法快速检测流感病毒的临床研究[J].深圳中西医结合杂志，2019，29（6）：71-72.