王艳杰，巨敏莹，王秀明，刘亭岐，刘东霞，刘建奇，孔彩平，范秀丽，赵丽霞，宋庆庆*

（1. 金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030； 2. 国家工程实验室，内蒙古 呼和浩特 010030；3. 内蒙古农业大学，内蒙古 呼和浩特 010018）

犬腺病毒（Canine adenovirus，CAV）属腺病毒科，哺乳动物腺病毒属，其基因组为双股，线状DNA 病毒，根据其血凝和中和试验等特性不同可将CAV 分为I 型和II 型[1-2]， CAV-I 型主要引起犬的致死性肝炎，引起野生犬脑炎病理学变化；CAV-II 型则引起上呼吸道感染和肠道感染，不引起肺炎症状，可引起幼犬咳嗽又叫犬窝咳[1-3]。

犬细小病毒病又称犬传染性出血性肠炎（Ca⁃nine prvovirus，CPV），属于细小病毒科，细小病毒属成员，是一类无囊膜、单股DNA 病毒。临床症状表现分为肠炎型和心肌炎型，肠炎型潜伏期1～2周，多见于青年犬，病情较轻且治愈率高，而心肌炎型多见于8 周龄以下的幼犬，突然发病，数小时死亡[4-6]。

这两种病毒单一感染或混合感染均可给养犬业带来严重的打击，两种犬病原临床症状较为相似，且常伴有混合感染，给临床诊断造成了一定的困难[7-8]。现有学者建立了用于同时检测犬瘟热病毒（CDV）、CPV、CAV-II 型和犬副流感病毒（CPIV）的多重普通PCR 检测技术[3]，以及CDV、CPV、I 型和II 型CAV 多重普通PCR 检测方法[1]，本研究拟建立CAV 和CPV 双重TaqMan 荧光定量PCR 检测方法，以提高产品检测敏感度和提高产品检测的效率，并降低气溶胶污染的风险，本研究利用TaqMan 检测技术原理，设计了扩增CAV 的Hexon 基因和CPV 的VP2 基因的2 对引物和2 条探针，建立双重TaqMan荧光定量PCR 检测方法，以实现CAV 和CPV 的快速鉴别检测，为两种病毒的检测提供有效的技术保障，同时为CAV 和CPV 疫苗半成品的抗原定量和疫苗产品的质量监控提供技术手段。……