程铭 管文琦 许颖茗 张蕙 张婵 刘红

[摘要]目的：探讨半乳糖凝集素3（Galectin-3）在尿素干预眼部静脉畸形组织中的表达情况。方法：选择2015年7月-2019年3月笔者医院收治的56例眼部静脉畸形患者作为研究组，并选择同期入院但眼部静脉组织正常的56例患者作为对照组，比较两组Galectin-3水平，并观察眼部静脉畸形患者经尿素干预后Galectin-3水平变化。结果：研究组患者的Galectin-3蛋白阳性表达率55.36%、Galectin-3 mRNA阳性表达率62.50%显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。研究组患者经尿素干预后的Galectin-3蛋白阳性表达率35.71%、Galectin-3 mRNA阳性表达率42.86%显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：眼部静脉畸形组织中Galectin-3表达升高，经尿素干预可有效减轻Galectin-3水平，延缓眼部静脉畸形侵袭发展。

[关键词]眼部静脉畸形;半乳糖凝集素3;尿素干预;表达情况;原位杂交染色法;Galectin-3 mRNA

[中图分类号]R77    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2020）07-0091-03

Abstract： Objective  To investigate the expression of Galectin-3 in ocular venous malformation after urea intervention. Methods  56 patients with ocular venous malformation admitted to our hospital from July 2015 to March 2019 were selected as the research group， and 56 patients with normal ocular venous tissue admitted to our hospital during the same period were selected as the control group. The level of Galectin-3 was compared between the two groups， and the changes of Galectin-3 in patients with ocular venous malformation were observed after urea intervention. Results  The positive expression rate of galectin-3 protein was 55.36% and the positive expression rate of galectin-3 mRNA was 62.50% in the study group， which was significantly higher than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of galectin-3 protein and positive expression rate of galectin-3 mRNA in the study group after urea intervention were 35.71% and 42.86%， which were significantly lower than those before treatment （P<0.05）. Conclusion  Galectin-3 expression is increased in ocular venous malformation tissues， and urea intervention can effectively reduce Galectin-3 and delay the invasion and development of ocular venous malformation.

Key words： ocular venous malformation; Galectin-3; urea intervention; expression; in situ hybridization staining; Galectin-3 mRNA

眼部靜脉畸形是一种比较罕见的先天性血管发育畸形，会呈终身渐进性发展，还会累及眼睑与部分眼肌，严重时会导致眼球萎缩，造成患者视力丧失[1]。研究发现，半乳糖凝集素3（Galectin-3）在血管发生、形成中起着重要作用[2]。而尿素对于血管瘤和静脉畸形的治疗作用已有报道，发现其对于静脉畸形可起到预防作用，减少对眼球产生进一步的伤害，且尿素属于人体代谢产物，对于人体无明显不良反应，在手术前使用可以让畸形静脉硬化[3]。因此，本研究探讨Galectin-3在尿素干预眼部静脉畸形组织中的表达情况，以期为临床诊断、治疗提供科学参考依据，现报道如下。

1  资料和方法

1.1 一般资料：经医学伦理委员会同意，选择2015年7月-2019年3月笔者医院收治的56例眼部静脉畸形患者作为研究组，纳入标准：①均经检查符合国际脉管性疾病研究学会（International Society for the Study of Vascular Anomalies，ISSVA）提出的眼部静脉血管畸形的诊断标准[4];②均接受手术治疗;③签署知情同意书。排除标准：①精神系统疾病者;②沟通交流障碍者;③合并其他眼部疾病者;④合并其他静脉畸形组织者;⑤临床资料不完整者。并选择同期入院但眼部静脉组织正常的56例患者作为对照组。研究组：男17例，女39例;年龄7～64岁，平均（37.42±7.10）岁。对照组：男20例，女36例;年龄9～68岁，平均（37.66±9.98）岁。两组基础资料比较差异无统计学意义（P>0.05），均衡可比。

1.2 方法：對照组患者手术前均不接受尿素注射治疗。研究组患者接受每日尿素局部注射治疗，连续治疗7～10d，再开展手术治疗。在病理科收集眼眶静脉畸形标本，所有病理标本均常规石蜡包埋后制成3μm、6μm厚连续切片，取1张HE染色复查诊断。其余切片分别进行原位杂交染色、免疫组织化学（Galectin-3蛋白表达采用免疫组织化学法检测，Galectin-3 mRNA表达采用原位杂交染色法检测）。切片常规脱蜡至水，体积分数在3%水在室温环境下处理12min，将内源性过氧化物酶灭活，然后再使用柠檬酸与新鲜配置的胃蛋白酶在室温环境下消化15min，将DNA结合蛋白去除掉。每张切片需要加入20μl预杂交液，再经过洗涤之后，加入封闭液37℃环境下30min。另外加入生物素化鼠抗地高辛，加入原位杂交专用PBS液洗涤之后，再加入SABC，接受类似前步骤的洗涤，观察DAB显色情况。

1.3 统计学分析：采用SPSS 25.0计算数据，使用“%”代表计数资料，采用χ2检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2  结果

2.1 两组Galectin-3蛋白、Galectin-3 mRNA干预前阳性表达率比较：研究组患者的Galectin-3蛋白阳性表达率为55.36%、Galectin-3 mRNA阳性表达率为62.5%显著高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。Galectin-3蛋白表达情况见图1，研究组Galectin-3蛋白表达阳性颗粒主要表达于细胞质以及细胞核中，而对照组的蛋白表达少数在细胞核处。

2.2 研究组尿素干预前后Galectin-3蛋白、Galectin-3 mRNA表达水平比较：研究组患者经尿素干预后的Galectin-3蛋白阳性表达率35.71%、Galectin-3 mRNA阳性表达率42.86%显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3  讨论

常见的眶内血管畸形是静脉性血管畸形，也称静脉性血管瘤。因病变范围常较广泛，CT显示眶内病变呈界限清楚，形状不规则，且范围较广泛的高密度占位病变，但也有单个的血管畸形性病变[5]。眼静脉性血管畸形因其基本病理组织学成分是为管壁厚薄不一的静脉团块，往往被混同于静脉畸形（如静脉曲张），又由于肿物内有许多高度扩张的薄壁血管而被病理学家诊为海绵状血管瘤。静脉性血管瘤在国人中较为多见，世界卫生组织（WHO）肿瘤分类的血管瘤中包括静脉性血管瘤，并称静脉性血管瘤是一种由不规则形的中等至大的血管，主要以静脉型血管所构成的良性病变，可伴有散在的平滑肌纤维及脂肪组织。眶内静脉血管瘤自有其特点，与发生于其他部位者有所不同[6]。静脉管径较小，纤维组织多，但基本病理组织学改变应属于这一范畴。也曾以蔓状血管瘤来命名此类肿瘤，蔓状血管瘤虽有动脉性、静脉性及动、静脉之分，但一般都意味着动、静脉并存，且有直接交通。病理学检查该肿瘤缺乏包膜，在多量的纤维组织中有丰富的小静脉，有时被诊断为纤维血管瘤[7]。

半乳糖凝集素（Galectin）是凝集素家族中的一员，Galectin家族的蛋白都具有识别并结合B-半乳糖苷的特点，现已发现十多个成员，并按发现的时间先后顺序依次命名为Galectin-1、Galectin-2…，其中对Galectin-3的研究最为广泛，人Galectin-3基因由6个外显子和5个内含子组成，长约17kb，Galectin-3具有一个独特的嵌合体结构，包括一个长的氨基末端结构域和羧基末端的单一碳水化合物识别结构域以及两者之间的脯氨酸、甘氨酸、酪氨酸富含区的重复胶原样序列构成.Galectin-3首先发现于巨噬细胞中，主要定位于胞核、胞质，它的表达取决于细胞增生的不同阶段，当细胞处于静止状态时主要位于胞质，当细胞位于增殖状态时则主要位于胞核，其通过非典型途径分泌到胞外组织间隙[8]。Galectin-3也广泛分布于各种正常组织和肿瘤细胞，参与多种生理和病理过程，包括细胞生长和凋亡、细胞黏附及新生血管形成和肿瘤浸润与转移等，被称为肿瘤相关蛋白[9]。有多项研究报道，Galectin-3能够参与到血管形成中，且能够调节细胞功能[10-11]。乔军波等认为，Galectin-3在眼部病变中起着重要作用，能够减轻缺血诱导下眼部视网膜发生变性。本研究结果中，研究组患者的Galectin-3蛋白阳性表达率、Galectin-3 mRNA阳性表达率显著高于对照组（P<0.05）。本研究结果与相关研究结果相似，进一步说明Galectin-3在眼部静脉畸形组织中呈高表达[12]。表2中，研究组患者经尿素干预后的Galectin-3蛋白阳性表达率、Galectin-3 mRNA阳性表达率显著低于治疗前（P<0.05）。结果说明，经尿素干预能够有效降低眼部静脉畸形组织中Galectin-3表达。

综上所述，眼部静脉畸形组织中Galectin-3表达升高，经尿素干预可有效减轻Galectin-3促进眼部静脉畸形侵袭发展的能力。

[参考文献]

[1]乔军波，李金，柴昌，等.半乳糖凝集素3基因在眼部静脉畸形组织中的检测及临床意义[J].中华整形外科杂志，2018，34（10）：867-871.

[2]李金，刘秋雨，乔军波.半乳糖凝集素3在尿素干预眼部静脉畸形组织中的表达[J].中华整形外科杂志，2017，33（4）：285-289.

[3]李金，柴昌，王卫群，等.探讨尿素注射联合手术治疗眼部动静脉血管畸形伴动静脉瘘[J].中华整形外科杂志， 2018，34（2）：128-132.

[4]Li J，Qiao JB，Liu QY.Pingyangmycin pretreatment influences the biological behavior of ocular venous malformation and relates with Galectin-3 expression[J]. Chin Med J （Engl），2017，130（15）：1804-1809.

[5]Junbo Qiao，Yongwei Chen，Changxian Dong，et al.Clinical significance of galectin-3 expression in malformed hepatic venous tissue[J].Indian J Med Res，2018，148（6）：728-733.

[6]喬军波，李金，马玉春，等.四肢静脉血管畸形组织中67000层粘连蛋白受体基因的检测及其临床意义[J].中华实验外科杂志，2017，34（6）：1020-1022.

[7]Flaherty MM，Palmer OR，Diaz JA.Galectinin venous thrombosis： A possible new target for improved patient care[J].Res Pract Thromb Haemost，2018，2（2）：399-400.

[8]Andrade FEC，Corrêa MP，Gimenes AD，et al. Galectin-3： role in ocular allergy and potential as a predictive biomarker[J].Br J Ophthalmol，2018，102（7）：1003-1010.

[9]Elsharkawy SL，Abdel-Aal WE，Esmal RSE，et al.Preoperative evaluation of thyroid epithelial lesions by DNA ploidy and Galectin-3 expression in FNAC[J].Nephron Clin Practice，2015，7（4）：585-594.

[10]苏智雄，叶新平，尚丽明.小干扰RNA沉默半乳糖凝集素3基因表达对胆管癌细胞增殖凋亡的影响及机制[J].中华实验外科杂志，2018，35（1）：79-81.

[11]张熙洋，丁秋玲，温宏峰，等.血清半乳糖凝集素-3和摄食抑制因子-1在糖尿病肾病中的表达[J].中华实用诊断与治疗杂志，2019，33（5）：25-26.

[12]宫蓓蕾，胡俊锋，赵成岭，等.半乳糖凝集素-1在肺癌中的表达及其临床价值[J].包头医学院学报，2019，10（6）：21-20.

[收稿日期]2019-07-29

本文引用格式：程铭，管文琦，许颖茗，等.半乳糖凝集素3在尿素干预眼部静脉畸形组织中的表达情况分析[J].中国美容医学，2020，29（7）：91-93.