黄 林，丁浩轩，冯 杰

（浙江大学饲料科学研究所，浙江省动物营养重点实验室，浙江杭州 310058）

饲料中长期添加抗生素对动物生产及对人类健康所带来的危害越来越引起人们的关注，发展环保友好型的抗生素替代品是畜禽养殖业走向可持续化发展的源泉[1]。植物提取物是近年来科研与实际生产所关注的焦点之一。研究表明植物提取物（如植物精油、黄芪和姜黄素等）可以改善畜禽的生长性能[2]。杜仲（E.ulmoides）是我国传统中医中一种常见药材，常以干燥的杜仲叶入药，具有强壮筋骨、补益肝肾等功效[3]。杜仲提取物是从杜仲叶中萃取的一类物质，富含多种生物活性成分，具有促生长、抗菌、抗氧化和提高免疫力的功能[4-5]。研究发现，在肉鸡饲粮中补充适量杜仲提取物增加其平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG），降低耗料增重比（F/G），并改善免疫功能[6]。李金宝等[7]研究发现，日粮中补充250 mg/kg 杜仲提取物可以降低仔猪的F/G 并提高ADG。然而，目前关于杜仲提取物对黄羽肉鸡养分消化率、肠道形态和消化酶活性研究较少。本试验旨在探讨杜仲提取物对岭南黄肉鸡的生长性能、养分消化率、肠道形态和消化酶活性的影响，并对杜仲提取物取代抗生素的替代效果进行评估。

1 材料与方法

1.1 试验材料 本试验杜仲提取物购自山东龙昌动物保健品有限公司，其主要功能成分为绿原酸（≥5%）、黄酮类（≥8%）、多糖（≥20%）等。

1.2 试验设计 挑选900 羽1 日龄岭南黄公鸡，随机分成6 个处理，每个处理6 个重复，每个重复25 羽，饲养试验分为前期（1～21 日龄）和后期（22～50 日龄），试验期50 d。对照组饲喂基础日粮，抗生素组在基础日粮中添加40 mg/kg 吉他霉素+10 mg/kg 那西肽，其他4 组分别在基础日粮中添加100、200、300 mg/kg 杜仲提取物及抗生素+100 mg/kg 杜仲提取物。依据NRC（1994）肉鸡营养标准和中国饲料营养成分表制定基础日粮。基础日粮组成与营养养分见表1。

1.3 饲养管理 试验鸡在控温鸡舍内采用双层笼养，自由采食和饮水，各组饲喂对应试验日粮，全天连续光照。鸡舍温度按照常规养殖操作。提供清洁和充足的水源，每天清粪及刷洗水槽并定时通风换气，保证卫生良好。依据管理要求给肉鸡采取免疫程序。

1.4 样品采集与测定

1.4.1 生长性能 按照重复对各组肉鸡于1 日龄时进行全部称重，作为试验初始体重，前期试验和后期试验结束前12 h 停止饲喂饲料，在肉鸡22、51 日龄早晨禁饲后，按重复称重，作为试验末期体重，记录整个试验期的采食量并对ADFI、ADG 和F/G 进行计算。

1.4.2 养分消化率 试验期间进行2 次代谢试验，分别是试验前期（19～21 日龄）和试验后期（48～50 日龄），代谢试验实行全收粪法，3 d 预试期后开展3 d 正式代谢试验。预试期前控制体重差异给鸡群分组，每个处理组选择体重接近的12 只肉鸡放入代谢笼饲养，各组的鸡平均体重接近。预试期开始预饲试验日粮，空腹24 h后进入正试期。正试期饲喂试验日粮并记录2 d 采食量，每日收集粪便，共收集72 h 粪便。收集排泄物时，以1个重复为单位，吹风机仔细清理积粪盘内的饲料、毛发和杂物，收集期间多次喷洒10%盐酸对粪样起到固氮作用，试验期间收集的粪样用塑封袋装好后放入-20℃冰箱，收集完粪样后解冻，在65℃烘箱中烘干48 h 至恒重，25℃回潮后称量质量。粉碎后过筛除去部分杂质，用塑封袋保存，并进行指标测定。

表1 基础日粮组成及营养成分

表观代谢能饲粮=[（试验饲粮采食量×饲料热能）-（粪便排出风干量×粪便热能）]/总的采食量

养分的表观消化率=（食入养分-排泄养分）/食入养分×100 %

1.4.3 肠道样品与测定 在22、51 日龄，选择基础日粮组、抗生素组、添加杜仲提取物组中ADG 最高组和抗生素+100 mg/kg 杜仲提取物组各重复体重形态相近的2 只肉鸡取样。禁饲期间自由饮水，12 h 后屠宰采样。收集一段长度1 cm 的十二指肠，生理盐水清洗彻底，在滤纸上吸干后，泡入固定液中，用来制作普通光镜观察切片。HE 染色后，光镜检测十二指肠肠道形态，记录隐窝深度、绒毛高度和绒隐比。收集十二指肠食糜于离心管，并冷藏于液氮中后续待测，随后依据南京建成生物工程研究所试剂盒测定十二指肠内容物胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。

1.5 统计分析 使用SPSS 22.0 软件中GLM 法进行分析，单因子完全随机设计选择方差分析，LSD 法进行平均数的差异显著性检验，各项结果的差异显著性判断标准为0.05。

2 结果与分析

2.1 杜仲提取物对黄羽肉鸡生长性能的影响 如表2 所示，试验前期，300 mg/kg 杜仲提取物组ADG 显著高于对照组、抗生素组及100、200 mg/kg 杜仲提取物组，300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组的F/G 显著低于对照组和抗生素组。试验后期，300 mg/kg 杜仲提取物组的ADFI 和ADG 显著高于除抗生素+提取物组外的其他组；300 mg/kg 杜仲提取物组的F/G 显著低于对照组。在整个试验期，300 mg/kg 杜仲提取物组的ADFI和ADG 显著高于对照组、抗生素组及100、200 mg/kg杜仲提取物组。

2.2 杜仲提取物对黄羽肉鸡养分消化率的影响 如表3所示，试验前期，相比于对照组，抗生素组、300 mg/kg杜仲提取物组和抗生素+提取物组的干物质、粗蛋白质、粗脂肪的消化率显著提高。在试验后期，300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组的干物质、粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率分别提高了10.61%、10.62%、17.52%和15.12%、13.98%、17.29%（P＜0.05）。

2.3 杜仲提取物对黄羽肉鸡肠道形态的影响 如图1 所示，基础饲粮组十二指肠绒毛出现断裂；300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组绒毛完整性较好，排列较整齐紧密。

如表4 所示，与对照组相比，21 日龄时300 mg/kg杜仲提取物组黄羽肉鸡十二指肠绒毛高度提高了13.56%（P＜0.05）。50 日龄时，抗生素组、300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组十二指肠绒毛高度较对照组分别提高了21.36%、26.76%和28.28%（P＜0.05）。相比于对照组，300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组绒隐比显著提高（P＜0.05）。

2.4 杜仲提取物对黄羽肉鸡肠道消化酶活性的影响 由表5 可知，21 日龄时，抗生素+提取物组胰蛋白酶活性最佳。相比于对照组，抗生素组和抗生素+提取物组十二指肠内容物胰蛋白酶活性显著升高（P＜0.05）。在50 日龄时，相比于对照组，抗生素组、300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组显著改善了十二指肠内容物中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力，300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组胰蛋白酶以及淀粉酶活性显著高于抗生素组，另外300 mg/kg 杜仲提取物组和抗生素+提取物组的胰蛋白酶、淀粉酶以及脂肪酶无显著差异。

表2 杜仲提取物对黄羽肉鸡生产性能的影响

表3 杜仲提取物对黄羽肉鸡饲料养分消化率的影响 %

3 讨 论

3.1 杜仲提取物对黄羽肉鸡生长性能的影响 植物提取物富含生物活性物质，具有抗菌功能，在动物生产中被认为是有潜力的抗生素替代物[8]。本试验表明，杜仲提取物能改善黄羽肉鸡生长性能，提高ADG，降低F/G，而采用低剂量杜仲提取物与抗生素的配伍在提高黄羽肉鸡生长性能方面存在一定互补效应。饮水中补充含杜仲叶水煎液5 g/L 同样会减少肉鸡的饲料消耗量，改善饲料转化率[9]。杜仲叶提取物减少肉鸡的饲料消耗量的原因可能是杜仲具有一定安神功效，减弱了神经系统功能，减少了肉鸡活动的能量代谢消耗。对于杜仲提取物提高动物生长性能的可能原因，普遍认为与其所含的绿原酸、黄酮、多糖等活性成分密切相关。李金宝等[7]认为，杜仲提取物中的绿原酸类成分具有抗应激、抑菌等功效，可以提升机体免疫水平。研究发现，绿原酸对肠道中的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增殖活性均有较强抑制作用，其抑制机理是因为它可以非竞争性地结合芳基胺乙酰转移酶，破坏细菌细胞膜，降低细菌细胞壁的刚度，协同杀菌限制细菌增殖[10]。黄酮类化合物同样对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌等具有抑制作用。此外，黄酮类物质还具有抗氧化、调节血栓消融、舒张血管、降血脂、提高机体免疫力等功能，可预防疾病，促进肉鸡健康生长[11]。多糖类可以调节肠道菌群，其可作为肠道中有益菌群（如双歧杆菌、乳酸杆菌）的食粮，促进有益菌其增殖[12]。肠道菌群和杜仲提取物的相互作用，一方面肠道菌群是杜仲提取物中的活性成分的调节靶点，另一方面肠道菌群反作用于杜仲提取物修饰其功能活性成分，协同促进肉鸡健康生长。

3.2 杜仲提取物对黄羽肉鸡养分消化率的影响 本试验结果表明，黄羽肉鸡在不同年龄阶段对养分的消化吸收率存在差异，随着日龄的增长，饲料中的养分消化率均有提高，消化系统发育逐渐成熟，且添加适宜浓度的杜仲提取物可以改善肉鸡对日粮中干物质、粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率。绿原酸对于家禽养分消化率的影响未见报道。绿原酸提高家禽养分消化率的原因可能是绿原酸具有保肝利胆的功能，促进胃液的分泌，并加强了消化酶的活性。此外，杜仲提取物所含活性成分多糖类可以作为肉鸡有益菌的营养来源，能够改善肠道健康[13]。在黄羽肉鸡日粮中加入杜仲可显著减弱肠道中金黄色葡萄球菌等有害菌的生长繁殖速度，加强养分消化吸收[14]。杜仲提取物提高肉鸡养分消化率也可能是因为杜仲可以有效改善肠道菌群的分布，进而增强肠道摄取养分的效率。

3.3 杜仲提取物对黄羽肉鸡肠道形态和消化酶活性的影响 十二指肠绒毛高度和隐窝深度是评价肠道形态的关键参数，肠绒毛高度与肠道对养分摄取的效率正相关。隐窝较浅，则表明肠道细胞成熟率增加，肠道分泌加快。研究表明在基础日粮中补充杜仲黄酮可以改善肠道的绒毛长度和隐窝深度[15]。本研究表明，300 mg/kg 杜仲提取物组十二指肠的绒毛较长、隐窝较浅，表明上皮细胞的表面积增加，更利于吸收营养素。十二指肠绒毛高度增加可能是绿原酸和黄酮对脂质过氧化的缓解。脂质过氧化会影响猪肠道绒毛形态，进而降低对营养物质的消化和吸收[16]。杜仲提取物中的绿原酸和黄酮是天然抗氧化剂，能够消除自由基[17]。杜仲提取物对脂质过氧化的缓解作用可能保护了肉鸡肠道的完整性，改善了肠道形态，促进肠道绒毛的生长发育，有利于肉鸡肠道健康。饲料中的营养成分经过胃肠道消化酶的分解降解成小分子物质后被机体吸收，参与到生命活动进程中，消化酶活性强弱对畜禽养殖具有重要意义。本试验中，日粮中添加杜仲提取物可显著加强试验后期肉鸡十二指肠胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。杜仲提取物提高消化酶的活性原因可能是其成分绿原酸可以促进肝胰腺的生长，加强消化酶的分泌。研究发现，基础日粮中补充0.15%杜仲提取物可改善异育银鲫对营养物质消化率并提高小肠内消化酶活性，这是因为杜仲中的绿原酸具有促进胃肠道括约肌收缩，可以加强肠道消化酶对饲料的分解消化[18]。此外，这也可能是因为中草药中富含多种生物活性因子，可以刺激肠道消化腺的分泌，改善消化酶功能[19]。

表4 杜仲提取物对黄羽肉鸡十二指肠肠道形态的影响

表5 杜仲提取物对黄羽肉鸡十二指肠内容物酶活性的影响 U/mg prot

4 结 论

本研究发现，日粮中补充杜仲提取物可增强肉鸡生长性能；日粮中补充300 mg/kg 杜仲提取物对黄羽肉鸡的饲料消化率、十二指肠肠道形态和消化酶活性的改善效果最佳；日粮中补充100 mg/kg 杜仲提取物并配伍抗生素在促进动物生长发育上具有较好功效。在畜禽养殖业中，日粮中补充杜仲提取物能够部分替代抗生素。