张永刚

（重庆邮电大学移通学院体育部，重庆 401520）

色钉菇（Chroogomphus rutilus） 又称血红铆钉菇，俗称红蘑、肉蘑、松树伞、松蘑等，隶属于担子菌亚门 （Basidiomycotina） 层菌纲 （Hymenomycetes） 伞菌目 （Agaricales） 铆钉菇科 （Gomphidiaceae） 色钉菇属（Chroogomphus）；其肉质肥嫩且鲜美可口，是一种名贵的野生食用菌，但无法人工栽培。色钉菇富含氨基酸、蛋白质、多糖、内酯等多种化学成分，具有抗氧化、增强免疫功能、抗运动病的作用。研究表明，植物神经功能紊乱而引发的恶心、眩晕等是导致患者产生运动病的主要原因[1]。随着交通出行的不断便捷，运动病的发病率呈不断递增的趋势。对于一般患者而言，其造成的影响主要体现在影响生活质量和身心健康方面，但对于航天飞行员来说，患病造成的影响较为严重。因此，对于运动病的研究重点在于如何提高药物的适用性，降低毒副作用[2]。此外，对于运动病的行为检测指标则体现在条件性味觉厌恶，主要利用复制运动病前予以大鼠糖精水喂养建立起的条件性味觉厌恶反射，使大鼠的糖精水摄取量减少，以作为检测运动病程度的主要指标。为更好的发挥色钉菇的药理活性，通过行为学和生化等检测方法，探讨色钉菇多糖对大鼠抗运动病的防治效果，为抗运病药物的研制提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验动物为成年雄性SD大鼠20只，平均体重为210 g～240 g。色钉菇、食用糖精、氯化钠、戊巴比妥钠、大鼠胃动素ELISA试剂盒、大鼠5-HT ELISA试剂盒。偏离垂直轴旋转仪、冷冻离心机、磁力加热搅拌器、电子分析天平。

1.2 试验方法

1.2.1 色钉菇多糖的制备

采用试验室标准蒸馏水对所选色钉菇子实体进行洗涤，完全洗涤干净后于45℃的烘箱恒温烘干，后予以粉碎称重。用1∶10的比例混合色钉菇子实体粉末与蒸馏水，并放入水浴锅内80℃水浴加热，辅以电动搅拌棒充分搅拌，浸提8 h，3 000 r·min-1离心处理15 min后提取上清液，并将子实体进行回收处理，水浴离心浸提3次，将3次离心提取的上清液混合并蒸发浓缩，后加入95%的3倍体积乙醇，4℃过夜沉淀，直至产生色钉菇多糖絮状物，用无水乙醇反复冲洗后采用真空冷冻方式获取色钉菇多糖。

1.2.2 试验分组处理

将20只大鼠采用随机分配的方式分为试验组和对照组，每组10只，每组中的5只用于行为学检测，另外5只用于血清5-羟色胺（5-HT）和胃动素水平含量检测。大鼠购入后饲养3 d以适应环境，禁水24 h后使大鼠自由饮用0.15%糖精水45 min。

1.2.3 血清5-HT和胃动素含量检测试验

对照组大鼠灌胃2 mL 0.9%的10 mL·kg-1氯化钠溶液，试验组大鼠灌胃2 mL 200 mg·kg-1的色钉菇多糖溶液，30 min后对2组大鼠进行OVAR旋转刺激（偏离垂直轴10°、旋转频率1.5 Hz、持续旋转时间1.5 h） 诱发运动病，然后进行试验指标检测，并检测大鼠血清5-羟色胺及胃动素含量水平。

1.2.4 行为学检测试验

1）糖精水条件性味觉厌恶试验

将空白对照组与试验组进行OVAR旋转刺激（方法参照1.2.3）。旋转结束后，各组大鼠均即刻进行旷场试验检测，并在第2天8:00自由饮用0.15%糖精水45 min，记录2组糖精水的饮用量，连续记录3 d。

2） 旷场试验

将大鼠放入旷场中央格内，用录像机记录大鼠10 min在旷场内的活动情况。每次试验结束后用消毒酒精擦拭箱底和四壁，以去除上只大鼠尿液、粪便的影响。统计大鼠潜伏期（旷场底面中央的9个格为中央区域，在中央区域的停留时间）、修饰行为（舔毛、舔足、两前肢理毛、抚嘴等）。

1.3 数据处理

将所有研究数据使用SPSS 20.0软件处理，其中计量资料对比通过（±s） 表示，t值检验；最后，判定统计学差异的标准为P＜0.05。

2 结果

2.1 两组大鼠血清中神经递质和激素含量的试验结果对比

2组大鼠血清5-HT和胃动素含量的试验对比结果见表1。

表1 血清神经递质和激素含量的试验结果对比Tab.1 Comparison of experimental results of serum neurotransmitters and hormones

如表1所示，对照组大鼠5-HT水平含量显著增加，试验组大鼠5-HT水平含量显著降低P＜0.05；对照组大鼠胃动素水平含量降低，试验组大鼠胃动素水平含量增高，P＜0.05。

2.2 两组大鼠糖精水条件性味觉厌恶检测结果对比

2组大鼠糖精水条件性味觉厌恶检测结果见表2。

表2 2组大鼠糖精水条件性味觉厌恶检测结果对比Tab.2 Comparison of test results of conditional taste aversion in saccharin water between two groups of rats

如表2所示，对照组大鼠与OVAR旋转刺激转后相比，糖精水摄入量显著减少P＜0.05，直至转后第3天摄入量才开始恢复增加，与转前相比，仍差距显著P＜0.05。试验组大鼠与OVAR旋转刺激转前相比，糖精水摄入量无明显差异P＞0.05。

2.3 两组大鼠潜伏期及修饰时间对比

试验组大鼠行为表现正常，意识清楚、行动正常、肢体活动灵敏，探索行为正常，饮食行为与饮水状态均处于正常水平。对照组大鼠在经过OVAR旋转刺激后表现为显著的运动病状态，行为迟缓、呼吸急促、颤抖炸毛、自主行为活动减少，存在大小便失禁等症，修饰行为增加。2组大鼠潜伏期及修饰时间对比见表3。

表3 试验结果对比Tab.3 Comparison of test results

如表3所示，对照组大鼠自主活动显著减少，多呈静卧的状态，试验组大鼠活动正常，自主探究行为较多，对照组的潜伏期显著高于试验组，P＜0.05。对照组大鼠转后，自主探究活动减少，为显著的运动病状态，行为迟缓、呼吸急促、颤抖炸毛、存在大小便失禁等症，修饰时间长；试验组大鼠转后自主活动正常，修饰行为正常，意识清楚、肢体活动灵敏，探索行为正常，饮食行为与饮水状态均处于正常水平。修饰时间短于对照组P＜0.05。

3 讨论

目前，对于运动病的发病机制进行了较多研究并存在多种假说，主要以中枢神经递质失衡、内分泌功能异常为主要原因，且抗运动病药物研制多以检测血液内激素变化，并辅以观察动物行为变化，以确定药效。目前广泛使用的抗运动病药物均具有良好的减轻症状效果，但大多都存在一定的副作用，如视力模糊、注意力下降等，无法满足航空领域人员的专业需求[3]。通过采取偏离垂直轴旋转复制运动病模型的方式对成年雄性SD大鼠进行抗运动病药物的研究，运动病模型复制成功的大鼠主要表现为自主活动减少，鼠类修饰行为增多，修饰时间增加，且颤抖、炸毛情况增多。研究表明，在对大鼠进行复制运动病前予以灌胃色钉菇多糖可有效改善大鼠的运动病症状。5-HT与胃动素是调节胃肠激素分泌的关键因素，而运动病的主要临床表现为患者出现恶心呕吐、胃肠功能紊乱，主要体现在胃动素含量的降低与5-HT分泌的增加[4]。相关研究表明[5]，运动病患者普遍存在胃肠道5-HT分泌增加，导致无法通过血脑屏障在血液中充分内扩散，进而使得肠壁内迷走神经被激活而传入末梢，导致信号传至孤束核而引发反射。抑制5-HT的分泌是治疗运动病的关键所在，且目前临床研究将抗运动病的药物治疗方向转移到了5-HT受体拮抗剂方向，并取得了一定的研究成果[6]。此外，胃动素的水平含量也是影响运动病的主要指标之一。通过研究发现，大鼠服用色钉菇多糖后，可有效降低运动病的临床症状，降低大鼠血清中的神经递质含量，促进胃动素的分泌。不仅表明了抗运动病的治疗关键与5-HT与胃动素有关，还证实了色钉菇多糖具有良好的抗运动病作用[7]；对比2组大鼠的行为表现、潜伏期时间、糖精水条件性味觉厌恶检测结果、修饰时间与血清中神经递质和激素含量等试验结果，皆体现出色钉菇多糖具有显著的抗运动病疗效，促进大鼠胃动素分泌且抑制其5-HT分泌，该结果可作为临床医学的研究依据，为防止和开发与选择抗运动病药物提供新方向。