杭建雄，黄 岳，颜欣欣，刘云秋，赵 琪，何 龙，冉荣坤，李 秀，刘菊枚，李国清

(华南农业大学 兽医学院，广东 广州 510640)

钩虫病是一类被忽视的重要人畜共患寄生虫病，锡兰钩虫是唯一一种可在人体内发育为成虫并能引起人的腹泻、贫血等症状的动物源性钩虫[1]。定期服用驱虫药是目前治疗钩虫病的主要方法，但由于钩虫的反复感染以及长期用药后对药物产生的抗药性，导致药物防治未能取得良好效果[2]。因此，迫切需要探索控制钩虫感染的新方法。

谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase，GSTs)是与细胞解毒与抗氧化有关的一种多功能酶，也是蠕虫主要解毒酶之一。GSTs 不仅对内源性或宿主产生的有毒产物发挥重要的解毒作用，而且还可作为抗寄生虫感染的疫苗候选分子或药物靶标[3-4]。据报道，美洲板口线虫GSTs可参与吸血过程中血红素的解毒，用GSTs重组蛋白免疫金黄仓鼠可对钩虫的攻击感染产生保护性免疫，其中Na-GST-1已被遴选为抗人类钩虫感染的候选疫苗[5]。目前，在锡兰钩虫成虫肠道转录组中共鉴定出13种GSTs，其中编号为ANCCEY-00737的GST与Na-GST-1的相似性最高[6]，具有较高的研究价值，但近几年国内外却鲜有相关的报道。本研究旨在对该蛋白编码基因进行克隆表达与序列分析，并研究其对昆明小鼠的免疫原性，以便了解锡兰钩虫GST分子的致病作用和免疫学特性，为该病疫苗候选分子或药物靶标的筛选奠定基础。

1 材料与方法

1.1 虫体及菌株虫体采自广州华南农业大学外科实验室的实验犬，根据FU等[7]的方法鉴定虫种后置于RNA样品保存液中-20℃保存。……