许鑫燕，王延龙，杨 倩，吴艳涛，2，张小荣，2*

(1.扬州大学 兽医学院，江苏 扬州 225009；2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009)

近年来，由Ⅰ群禽腺病毒感染引起的心包积水-肝炎综合征(hydropericardium hepatitis syndrome,HHS)和包涵体肝炎(inclusion body hepatitis,IBH)在我国的发病率呈上升趋势，给养鸡业造成很大的经济损失。其中HHS主要由FAdV-4引起，而IBH则主要由FAdV-8b引起[1]。Ⅲ型干扰素(IFN)又称为IFN-λ，是2003年发现的一种新型IFN家族，具有与Ⅰ，Ⅱ型IFN类似的抗病毒特性，但利用不同的配体-受体系统，主要在一些上皮细胞及免疫细胞上发挥作用[2]。本研究旨在评价应用昆虫杆状病毒表达系统制备的基因工程chIFN-λ对Ⅰ群禽腺病毒的感染抗病毒效果，以期为禽Ⅰ群腺病毒感染的防控开辟新的途径。

1 材料与方法

1.1 病毒及细胞表达chIFN-λ的重组杆状病毒AcMNPV-chIFN-λ[3]、FAdV-4 GX2013株、FAdV-8b QD2016株[4]、水泡性口炎病毒、Sf9草地贪夜蛾卵巢细胞均由扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室保存。

1.2 主要试剂Sf900 Ⅱ SFM培养基和DMEM培养基购自Thermo Fisher Scientific公司;Lonsera特级胎牛血清购自上海双洳生物科技有限公司；其他各类分析纯试剂均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.3 细胞和实验动物鸡肝癌细胞系LMH购自ATCC(CRL-2118)；SPF鸡购自济南斯派福瑞禽业科技有限公司。

1.4 chIFN-λ在昆虫细胞中的表达与纯化将液氮冻存的Sf9昆虫细胞进行复苏，用Sf-900TMⅡ SFM培养液进行培养和扩繁。将扩繁到足够数量的细胞用含1% FCS的Sf-900TMII SFM培养液重悬至2×106细胞/mL的浓度，接种到细胞培养瓶中，在27℃培养箱放置1 h待细胞完全贴壁后，按照MOI = 1的比例接种重组杆状病毒AcMNPV-chIFN-λ，27℃继续培养。72 h后，首先收……