焦 哲，梁继翔，严治山，刘晓丽，谷长勤，胡薛英，程国富，张万坡

(华中农业大学 动物医学学院，湖北 武汉 430070)

猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus，PSV)是小RNA病毒科萨佩罗病毒属的一类无囊膜球形单股正链RNA病毒，主要通过粪—口传播，引起腹泻、肺炎、繁殖障碍等多系统综合征或无明显特征的亚临床症状[1]。PSV可与猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、肠道病毒等混合感染导致病猪临床症出现非典型症状[2-5]。由于PSV隐性感染以及混合感染往往使其造成的症状被掩盖而被忽略，造成PSV感染扩散，给我国养猪业带来巨大威胁[6]。目前PSV普遍存在国内规模化猪场中，华南、华东、西南等地猪场均有检出，因此检测PSV对其感染相关疾病的诊断十分重要[7]。原位杂交是目前最为有效的分子病理学、分子遗传学技术之一，但目前为止国内暂无PSV的原位杂交检测方法的报道[8]。本研究建立了一种猪萨佩罗病毒的原位杂交检测方法，为猪萨佩罗病毒在感染仔猪后器官和组织中病毒核酸分布及致病机理研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 病毒株及抗体猪萨佩罗病毒及鼠抗PSV多克隆抗体由本实验室保存。

1.2 动物试验动物试验遵循《湖北省实验动物管理条例》中的规定，将经PSV RT-PCR检测阴性的21日龄的断奶仔猪分成2组，每组3头。感染组仔猪口服15 mL的 1×107TCID50/mL的PSV毒株，未感染组仔猪口服等量DMEM培养基作为对照。仔猪在接种后3 d后处死取其小肠组织甲醛固定后石蜡包埋。

1.3 主要试剂及仪器Easy Pure Viral DNA/RNA Kit试剂盒为北京全式金生物技术有限公司产品；……