田妮娜，刘兴国，李 岩，王月玲

（兰州市食品药品检验所，甘肃 兰州 730050）

兔眼刺激性试验（Draize 试验）是指动物眼球接触到化学物质产生炎症反应的过程，是目前评估眼刺激性的金标准[1-2]，通过实验人员肉眼观察血红蛋白的漏出和变性进行评分，方法周期长、成本高，存在一定的主观性和差异性；同时,随着动物保护运动的兴起和人们对“3R”运动的关注[3],体外替代试验的研究已广泛开展[4-7]。

红细胞溶血试验（RBC）的基本原理是化学物质损伤细胞膜，改变其渗透性，引起血红蛋白的漏出和变性，进而导致溶血发生[8]。含表面活性剂的产品主要通过破坏眼部脂质和蛋白结构导致损伤，这和红细胞溶血试验的基本原理类似[9]。故本研究收集易触及眼睛的4类淋洗类化妆品（洗发、护发、沐浴和洁面），参照《化妆品卫生规范》(2007年版)规定的眼刺激试验的要求，进行红细胞溶血试验和Draize试验，并评价其相关性，以考察红细胞溶血试验用于评价淋洗类化妆品眼刺激性的可行性。

1 材料与方法

1.1 样品

样品一部分来自兰州市药品检验所送检的化妆品，其余部分市场购买，洗发、护发、沐浴和洁面4类各20批次，配方中均含有表面活性剂。

1.2 2%红细胞悬液（牛、羊、猪、兔）

购自北京博尔西科技有限公司和岑溪鸿泉生物科技有限公司，100ml/瓶，2-8℃保存，3-4周内使用。PBS（Na2HPO4·12H2O 3.63g，KH2PO40.24g，NaCl8g，KCl 0.2g,溶于1000ml纯化水中，pH 为7.4，121℃灭菌30min），十二烷基硫酸钠（SDS）（1000mg/L）。

1.3 实验动物

新西兰大耳白兔，普通级，雌雄兼用，雌性未孕，购自兰州畜牧兽医研究所，并饲养在兰州市食品药品检验所药理室普通级动物房。……