鸡屎藤苷酸对IL-1β 诱导关节软骨细胞炎症反应的影响
2020-07-08史桂荣任博文杜旭召张啟威史栋梁
史桂荣 任博文 杜旭召 张啟威 史栋梁*
(1.商丘医学高等专科学校, 河南 商丘476100; 2.河南省中医院骨病一科, 河南 郑州450002)
中医药在中国和亚洲其他国家已经使用了数千年,可用于各种疾病的防治且副作用很小。鸡屎藤Paederia scandens(Lour.) Merr 是一种茜草科植物,主要分布于我国的长江中下游及以南各省。鸡屎藤在中国、日本、韩国等地有着悠久的药用历史,广泛用于缓解疼痛、炎症等症状。研究表明,环烯醚萜及其相关的环烯醚萜苷化合物(鸡屎藤苷、车叶草苷、鸡屎藤苷酸等) 是鸡屎藤主要的药理活性成分[1]。
骨关节炎(OA) 是滑膜关节的一种渐进性疾病,在许多老年人中导致进行性疼痛,但除了止痛药物和物理治疗外,目前还没有特别有效的治疗OA 的药物,这些药物的疗效有限。随着对OA 病理的日益清楚的了解,迫切需要获得一种有效的内源性修复药物,减缓OA 的进程。本研究旨在通过体外实验探讨鸡屎藤苷酸对IL-1β 诱导关节软骨细胞增殖和炎症反应的影响及其相关机制。
1 材料
1.1 细胞株 人关节软骨细胞(CH8 细胞) 购自中国科学研究院。
1.2 药物与试剂 鸡屎藤苷酸(paederosidic acid,PA,批号B20585,纯度≥98%,上海源叶生物科技有限公司);DMEM/F12 培养液、胎牛血清(美国Gibco 公司);MTT 溶液(美国Sigma 公司);ELISA 试剂盒(武汉博士德生物技术有限公司);PrimeScript RT reagent 试剂盒[宝日医生物技术(北京) 有限公司];兔抗MMP-3、MMP-13、p-p65、p65、p-IκBα、IκBα 抗体(美国Cell signaling 公司);IgG-辣根过氧化物酶(HRP) 标记的羊抗兔二抗(美国Invitrogen 公司)。
2 方法
2.1 细胞培养 将人关节软骨细胞(CH8 细胞) 接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12 培养基,37℃、5% CO2培养箱内进行培养。当细胞铺满瓶底80%时,进行传代,取第2 代软骨细胞进行后续实验。……
