肖美芳 陆 喆 陈柳英 陈 芬

（海南省妇女儿童医学中心， 海南 海口570206）

宫颈癌是常见的恶性肿瘤，在全球女性中其发病率仅次于乳腺癌，居于第2 位，对妇女的健康有着重要的影响［1］。近年来，宫颈癌的发病机理及治疗手段受到了广泛的关注，2016 年世界卫生组织公布，全球每年宫颈癌新发病例超过47 万。宫颈癌的死亡率较高，在中国每年新发病例超过13 万，其中死亡约5.3 万，且死亡率仍呈上升趋势［2］。木犀草素（Luteotin） 是一种天然的黄酮类化合物，具有多种药理作用，如抗炎、抗氧化和抗癌［3-4］。本研究探讨了木犀草素对宫颈癌Hela 细胞的增殖和凋亡的作用，以及其相关信号通路。

1 材料

1.1 细胞株 Hela 细胞株购于普如汀生物技术（北京）有限公司。

1.2 药物与试剂木犀草素（纯度为98%，批号20180112） 购自大连美仑生物技术公司；DMEM 培养基（批号64017510）、胎牛血清（批号1616626） 购自美国Gibco 公司；二甲基亚砜（DMSO，批号SHBB5 172 V） 购自美国Sigma 公司；AG490（批号20170524）、MTT（批号20180121） 购自北京索莱宝科技有限公司；JAK2 抗体（货号ab108596，批号GR171114-1）、p-JAK2 抗 体（货 号ab32101，批号 GR171514-2 ）、STAT3 抗 体（货 号ab119352，批号 GR171514-2）、p-STAT3 抗 体（货 号ab76315，批号GR161326-2）、BAX 抗体（货号ab32503，批号GR88385-2）、BCL-2 抗 体（货 号ab185002，批号GR161516-2），辣根过氧化酶标记山羊抗兔IgG（H ＋L）（货号ab205718，批号GR84261-1） 均购自英国Abcam公司。

1.3 仪器 化学发光凝胶成像系统（ChemiDoc MP，美国Bio-Rad 公司）；水平摇床（WD-9405B，北京六一仪器有限公司）；转移槽（DYCZ-40D，北京六一仪器有限公司）；双垂直蛋白电泳仪（DYCZ-24DN，北京六一仪器有限公司）；CO2培养箱（HF-90，上海力申科学仪器有限公）；酶标仪（ELX-800，美国Bio-Tek 公司）。

2 方法

2.1 细胞培养 人宫颈癌Hela 细胞培养于含有10% 胎牛血清和1% 链霉素和青霉素双抗液DMEM 培养液中，于37℃、5% CO2恒温恒湿培养箱中常规培养，每2～3 天用胰酶消化，进行传代。……