杨朝雪，马 敏，张春阳，侯法利，范建立*

（河南承东生物科技有限公司，河南 郑州 450000）

羧宁为本公司自主研发的一款针对表面创伤的液体伤口敷料，其主要成分为聚氨基葡萄糖和有机硅抗菌剂。聚氨基葡萄糖被广泛应用，研究表明聚氨基葡萄糖是壳聚糖的衍生物，对壳聚糖进行季铵化，是壳聚糖化学改性的主要领域之一，具有良好的溶解性能易溶于水，具有良好的生物相溶性，具有无毒性，抗菌活性高和使用范围广，逐渐被医药行业广泛应用[1]；有机硅抗菌剂是一种新型阳离子表面活性剂，具有耐高温，持久的效果，抑菌范围广，能有效抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌和真菌，与聚氨基葡萄糖合用抗菌作用更强，起到双重抗菌作用。现对羧宁的抑菌性进行研究，报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

FA2004电子天平，上海津平设备仪器有限公司；XFH-30CA电热式压力蒸汽灭菌锅，浙江新丰医疗器械有限公司；BCC-1100112-X生物安全柜，山东博科生物产业有限公司；SHP-80生化培养箱，北京中兴伟业仪器有限公司；XK96-A快速混匀器，江苏新康医疗器械有限公司。

1.2 培养基

胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）均购自北京奥博星生物技术有限责任公司产品。

1.3 菌种

大肠埃希菌(Escherichia coli) [CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球菌(S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s)[CMCC(B)26003]、白色念珠菌(Candida albicns)[CMCC(B)98001]均来源于北纳创联生物技术有限公司。

2 实验内容

2.1 菌液的制备

取适量经34℃培养24 h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌平板培养物接入1 ml 0.9%无菌NaCl溶液（以下简称溶剂）中，用溶剂继续稀释100倍，制成5×105～5×106cfu/ml的菌液，备用。

2.2 方法

取供试品5 ml和对照液（无菌水）5 ml各3瓶，取上述制备好的菌液，分别在每个供试品和对照液中滴加100 μl，均匀混合，开始计时，作用20 min。将作用后的菌液用无菌水进行10倍和20倍稀释，分别取稀释后的菌液0.25 ml，均匀涂布在TSA（大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌）和SDA（白色念珠菌）平板上。TSA平板置于34℃，SDA平板置于25℃培养2～3天，对菌落计数并计算抑菌率。

2.3 计算抑菌率

抑菌率≥50～90%，产品有抑菌作用；抑菌率≥90%，产品有较强的抑菌作用。

3 结 果

表1显示，大肠埃希菌10倍稀释对照组与20倍稀释对照组菌落数均为0。金黄色葡萄球菌10倍稀释对照组与20倍稀释对照组菌落均为0。白色念珠菌10倍稀释对照组与20倍稀释对照组菌落数均为0；抑菌率≥90%，说明羧宁对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌均有较强的抑菌作用。

表1 羧宁抑菌性测试结果

4 讨 论

羧宁通过在创面表面形成保护层，起物理屏障作用，对创面有直接的表面性作用。研究表明，壳聚糖衍生物比壳聚糖的抑菌性强，壳聚糖季铵化形成了阳离子型高聚物，通常细菌表面带负电荷，阳离子性物质的加入改变了菌体的pH环境，改变细菌细胞壁的通透性，破坏细菌的细胞膜，因而产生抑菌作用[5]。周景润等研究表明，季铵化壳聚糖中带正电荷的季铵基团能够明显的促进壳聚糖分子和菌体细胞壁负离子间的相互结合，致使菌体死亡。谢瑜等研究表明，有机硅抗菌剂是一种新型的阳离子表面活性剂，它具有耐高温、耐水洗、持久的效果，抑菌范围广，能有效的抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌和真菌[7]。目前有机硅抗菌剂已应用到医疗行业，且对皮肤安全性高，无刺激。本研究结果显示，羧宁对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌均有较强的抑菌作用。

综上所述，推断羧宁的抑菌性机理：羧宁对细菌、真菌具有很强的吸附作用，可以改变细胞壁的通透性，破坏细胞膜，使细胞内代谢产物流出，从而达到抑菌的作用。