基于干眼症细胞凋亡模型观察淫羊藿总黄酮含药血浆对foxp3mRNA的作用*
2020-06-20万咪咪卢书娟胡文婧石玉恒
王 方,万咪咪,卢书娟,胡文婧,石玉恒
(1.贵州中医药大学第二附属医院眼科 贵阳 550003;2.贵州中医药大学 贵阳 550003)
干眼症是一种慢性眼表疾病,据统计全球有超过10亿干眼患者,发病率约为5.5%~33.7%,而我国干眼患者人数就超过1亿人,患病率占21%~30%。眼科门诊30%的病人以“眼干、眼涩”为主症前来就诊,已成为目前患病人数最多的眼科慢性病,因此,患者本人和社会医疗都投入非常大的资金来投入干眼的治疗。干眼症是由许多要素引起的眼表疾病。患者出现长期疲劳、瘙痒、疼痛等刺激症状为主要临床表现,严重扰乱患者的正常生活。免疫相关的炎症反应是干眼发病中的关键要素,大量炎症因子被激活,加速泪腺、角结膜上皮细胞凋亡[1],使眼球的表面功能受到侵害,泪膜的相对稳定性降低[2]。早在《本草纲目》中就有对淫羊藿治疗眼疾的记载,大量研究证实淫羊藿苷具有调节免疫系统功能的活性[3]。为中药干预免疫炎症所致的干眼症开辟了新的机会,在此基础上,本研究观察了淫羊藿总黄酮含药血浆对干眼症细胞凋亡模型免疫反应相关因子的影响。
1 和实验材料和操作步骤
1.1 实验动物
本研究实验动物约2.0~2.5 kg/只的一个月龄远交系新西兰大耳雄兔,用普通饲料喂养。
1.2 主要试剂、耗材和仪器
本研究的主要试剂、耗材和仪器:DMEM/F12(Hyclone,SH30023.01B)、胎 牛 血 清(Hyclone,SH30070.03)、青霉素/链霉素(Hyclone,SV30010/100 mL)、胰酶(Hyclone,SH30042.01/100 mL)、10%水合氯醛(100 mL蒸馏水,完全溶解10 g水合氯醛)、3.8%枸橼酸钠溶液(100 mL蒸馏水加入3.8 g枸橼酸钠)、PBS(南 京 生 兴 物,SN331SN331)、DMSO(sigma,C6295C6295-50 mL)、SYBR®Premix Ex Taq(Takara,RR820A,即SYBR green溶液)、RNAiso Plus(Takara,9108,即Trizol)、氯仿(Trichloromethane,上海阿拉丁生……
