吴小红

【摘要】目的 探讨细胞外信号调节激酶信号通路（MEK）通路抑制剂对人胰腺癌细胞生长及细胞周期相关抑癌基因表达的影响。方法 通过培养人胰腺癌PANC1、CFPAC1细胞系，用MEK通路抑制剂PD98059处理作为A组，用DMSO处理作为B组，比较两组用药后PANC1、CFPAC1细胞系的细胞数、用药后24 h胰腺癌细胞周期分布，统计A组干预后24h后抑癌基因表达变化。结果 用药3 d、6 d后A组PANC1、CFPAC1细胞系的细胞数低于B组，A组PANC1、CFPAC1细胞系的G0/G1期细胞比例高于B组，S期细胞数比例低于B组（P<0.05）;A组经PD98059干预后，PANC1、CFPAC1细胞p16INK4a、P21WAFl、P27K1PlmRNA表达上升。结论 MEK通路抑制剂PD98059可能通过上调细胞周期相关抑癌基因表达水平，抑制胰腺癌细胞增殖、细胞周期进展。

【关键词】MEK通路抑制剂;胰腺癌;抑癌基因

【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095.6681.2020.12..02

胰腺癌是临床常见恶性肿瘤病症，近年来随着国民生活方式的转变和生活节奏的加快，国内胰腺癌发病率呈不断升高趋势[1]。胰腺癌患者病情隐匿，缺乏典型症状，大多数病例在发病时病情已发展成晚期，生存率较低[2]。本文就细胞外信号调节激酶信号通路（MEK）抑制剂对人胰腺癌细胞生长及细胞周期相关抑癌基因表达的影响，旨在为胰腺癌的临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

中科院上海细胞生物学研究所提供的人胰腺癌PANC1、CFPAC1细胞系;美国Sigma公司提供的MEK通路抑制剂PD98059、DMSO;BIOBASE酶标仪;赛默飞Attune NxT流式细胞仪;BiO-Rad公司提供的无血清RPMI1640培养基;BIO-RAD TC20自动细胞计数器。

1.2 方法

通过培养人胰腺癌PANC1、CFPAC1细胞系，用MEK通路抑制剂PD98059处理（加入浓度50 ?mol/LPD98059）作为A组，用DMSO处理（加入浓度50 ?mol/LDMSO）作为B组。培养后1/3/6 d随机取三孔，使用细胞计数器完成细胞数检测。取对数生长期细胞，使用培养基培养24 h以同步化，比较两组干预24 h后的细胞周期，收集两组细胞，制作为单细胞悬液，取2 ml悬液，固定处理后去乙醇后孵育，染色后使用流式细胞仪检测细胞周期，重复3次。……