柱前衍生化-HPCE法测定霍山石斛中游离氨基酸
2020-06-15陈乃东王荣花徐文冬石敏珠
陈乃东, 朱 赛, 王荣花, 徐文冬, 石敏珠
(1. 皖西学院 生物与制药工程学院, 六安 237012; 2. 安徽省中药资源保护与持续利用工程实验室院, 六安 237012)
游离氨基酸作为中药炮制或食品加工过程中参与米拉德反应的底物,是影响中药炮制中组分变化和食品风味的关键物质[1-2]。霍山石斛(DendrobiumhuoshanenseC. Z. Tang et S. J. Cheng),是兰科石斛属的草本植物[3-5],含多糖、多酚、皂苷、生物碱等成分[6-10],具有抗氧化、增强免疫、明目、预防治疗心血管疾病、延缓衰老等功效[11-12]。由于霍山石斛鲜品难以保存,传统用药方式以其加热炮制成干燥品的茎入药,开展霍山石斛游离氨基酸研究对于揭示霍山石斛炮制机制、霍山石斛资源综合利用具有重要意义。
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)具有仪器简单、样品用量少、应用范围广、分离效率高、污染小、成本低等优点,已在中药的指标成分含量分析研究中应用广泛[13-17]。在本课题组的前期研究中,采用柱前衍生化HPLC对霍山石斛总游离氨基酸进行分析[18],本文构建一种异硫氰酸苯脂柱前衍生化-HPCE分离和测定多种游离氨基酸方法,对霍山石斛中游离氨基酸进行定性定量分析,为深入研究霍山石斛在炮制过程中所发生的化学变化、揭示其炮制机制及其资源开发利用提供候选方法。
1 材料与方法
1.1 材料
实验材料2018年4月采自皖西学院植物园,品种经皖西学院陈乃东教授鉴定为霍山石斛(DendrobiumhuoshanenseC. Z. Tang et S. J. Cheng),洗净,取其根,茎,叶,-50 ℃冷冻干燥至恒重,粉碎以备用。
十水合四硼酸钠,磷酸氢二钾,氢氧化钠(纯度≥99.7%,均购自西陇化工股份有……
