黄 优，陈海云，何超明，庞明武，颜 博，王 景，李华坚，高唯一

0 引言

脑梗死是最常见的缺血性脑血管疾病，颈动脉狭窄是缺血性脑血管病的重要危险因素，流行病学统计显示，颈动脉狭窄是进行性脑梗死的重要危险因素[1]，其同侧脑梗死的发病率可以达到90%以上。丁苯酞(Butyphthalide)是从芹菜籽中提取的天然产物，可以发挥神经保护功能[2]，次级线粒体源性Caspase激活因子(Smac，又称低等电点的IAP直接结合蛋白)是决定脑缺血后脑细胞凋亡的关键蛋白[3]。本研究构建颈动脉狭窄大鼠模型，在此基础上探讨丁苯酞对模型大鼠脑组织缺血再灌注后Smac蛋白的影响以及神经保护作用，为丁苯酞的临床应用提供更多的理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物、试剂和仪器 SPF级健康雄性SD 大鼠，8周龄，体重260～310 g，购自海南医学院动物实验中心，动物许可证号：SCXK(琼)2018-0004。丁苯酞胶囊购自石药集团恩必普药业有限公司(批号：20180216)，Smac和β-actin多克隆抗体购自美国Santa公司，HRP标记二抗购自北京中杉生物科技股份有限公司，Bradford蛋白定量试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒购自北京碧云天生物技术有限公司，显微镜和HPIAS-1000图像分析系统为德国Leica公司产品，电泳仪为美国Bio-Rad公司产品。

1.2 大鼠动物模型的建立 SD大鼠适应性喂养1周后建模，随机分为假手术组(15只)和颈动脉狭窄模型组(60只)，参照郑文婧等[4]的方法，造模简述如下：10%水合氯醛1 ml腹腔注射，大鼠麻醉后沿颈部正中切开，分离右颈总动脉后平行放置5 ml注射器针头，6-0号尼龙线扎紧针头和颈总动脉，抽出针头，见血流恢复后间断缝合肌肉和皮肤，假手术组只分离右颈总动脉，不做尼龙线结扎，术后注射青霉素钠防止感染。……