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试纸法测定蛋白质的研究

2020-06-08高俊杰

沈阳理工大学学报 2020年1期

高俊杰,陈 达

(沈阳理工大学 环境与化学工程学院,沈阳 110159)

测定蛋白质含量的方法有很多,从原始的一百多年前的浊度法、凯氏定氮法中走出来,改变原体系的光谱性能,从而达到定量测定的目的。目前研究较多、应用较广、操作较为简便的是吸光光度法[1-3]、荧光光度法[4],以及新发展起来的共振瑞利散射法[5]、高效液相色谱法[6]等等。这些方法都需要专业人员用专业仪器进行测定。

试纸法[7]是纸层析法中的一种,纸层析法用滤纸作为载体,用一定溶剂(展开剂)展开而达到分离的目的。根据其分离原理可分为:吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。

试纸法具有携带方便、使用方便、快速,适用于现场检测,没接受过专业培训的人员也可以使用,拓宽了应用范围。

现在常用的试纸法是在滤纸上以一定的方法负载上相应的试剂,使其对某种物质具有反应性能,能指示出该物质的存在和含量。目前市售的测定试纸都是通过颜色变化,利用色标指示试样含量的。

本文测定蛋白质试纸是利用刚果红与蛋白质在一定条件下生成红色复合物为基础,制作试纸,根据试纸变色的长度,由工作曲线或长度标尺确定蛋白质含量。这种方法使测定结果的精密度和准确度比观看颜色更精确。此法目前报道的不多,是一种行之有效有发展前景的测定方法。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

0.1mol/L盐酸;0.1mol/L柠檬酸钠;5.0×10-5mol/L刚果红;0.1%(十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB);5mg/mL淀粉溶液;5mg/mL抗坏血酸溶液;……

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