王呈谕，刘晓璇，李轶群，李登科，孙震晓*

(北京中医药大学生命科学学院，北京 102488)

何首乌(Polygoni Multiflori Radix)、虎杖(Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix)、大黄(Rhei Radix et Rhizoma)为临床常用中药[1]，近年来其在临床及动物试验中多有致肝损伤报道，如何首乌与制何首乌及二者相关制剂可引起患者肝损害[2]，临床调研发现含虎杖复方制剂可致肝功能异常[3]，动物实验表明大黄可致老年大鼠肝细胞坏死及轻度胆道增生[4]。前期研究表明，何首乌和大黄的肝毒性可能与其含有的游离蒽醌(如大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚等)有关[5-6]。3种中药均含游离蒽醌，虽然所含游离蒽醌种类及含量不同，但游离蒽醌在体内可以相互转化[7]，因而比较3种药材游离蒽醌含量与其肝细胞毒性的关系可为阐明3种中药可能的肝毒性物质基础及机制提供思路。

游离蒽醌含量测定常采用高效液相色谱色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)[8]。HepaRG细胞为人正常肝祖细胞，分离于慢性丙肝患者肝组织，可在体外长期继代培养，一定条件下能分化为明显的肝细胞形态和胆管样结构，能表达正常肝细胞相关的Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶，如CYP450及UGT1A1等，是体外研究药物肝毒性的良好工具[9-11]。本研究主要通过比较3种中药水提物中游离蒽醌含量及其对人正常肝细胞的毒性作用探究游离蒽醌与3种中药肝细胞毒性的关系。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

实验用何首乌(产地湖北，批号01106600)、大黄(产地甘肃，批号401004095)、虎杖(产地浙江，批号401004461)饮片均购自北京同仁堂(亳州)饮片有限责任公司，经北京中医药大学中药学院刘春生教授鉴定，均为正品。……