张世忠 江 斌 陈盛星 刘 倩 张桂云 刘 景＊

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013；2.中鲨动物保健品（厦门）有限公司厦门 361006；3.福建农林大学动物科学学院 福州 350002）

目前，对纤维性饲料的研究日益活跃，食物纤维在人类和动物营养方面有许多食疗和疾病预防功能，适量的食物纤维对刺激产蛋鸡胃肠道能动性和促进肠内微生物活动有益，被普遍认为有保健促进作用。不同种类的动物由于其消化系统、生理结构的不同而对纤维的消化利用能力是不同的。在饲粮中适当加入复合型纤维，有助于保持产蛋鸡胃肠道的正常结构和功能。肠道健康是制约蛋鸡生产性能的主要因素，肠道健康状态的改变直接影响营养素的利用。复合型纤维“美纤多”是植物细胞壁的主要组成成分，对动物有营养和非营养双重作用，适宜的饲粮粗纤维水平有助于维持动物胃肠道健康、改善能量利用，以便提高产蛋鸡的生长性能。本研究用复合型纤维“美纤多”添加在产蛋鸡育成和产蛋阶段的日粮中，能促进蛋鸡对矿物质的利用，并能降低氮及能量的利用，延长消化时间。本研究旨在探讨在产蛋鸡育成和产蛋阶段日粮中添加不同比例的复合型纤维“美纤多”对蛋鸡肠道结构、免疫指标及生长性能的影响。

1 材料与方法

1.1 美纤多 美纤多主要由甜菜粕纤维、海藻纤维等多种植物纤维混合而成，其中酸性洗涤木质素2.6%、中性洗涤纤维49.2%、酸性洗涤纤维26.2%，由中鲨动物保健品（厦门）有限公司提供。

1.2 试验动物与基础日粮 将384羽1日龄海兰褐蛋鸡随机分成4个处理组，每个处理组24个重复，每个重复4羽鸡。4个处理组分为试验组1、试验组2、试验组3、对照组，每组使用的基础日粮一致，试验组1、试验组2、试验组3中分别添加0.8%、1.0%、1.2%复合型纤维饲料。按照《标准化海兰褐蛋鸡饲养标准》进行饲养管理。

表1 试验日粮组成及营养水平

1.3 饲养管理 饲养管理全部与大规模蛋鸡场生产群保持一致。笼养，每天喂2次粉料，自由采食和饮水。鸡舍为全封闭式，鸡笼二列三层式，每笼4羽，固定专人饲养管理。每天记录产蛋数、破蛋率、耗料量、死淘数及鸡群健康状况等，疫苗防疫与消毒措施按常规方法进行。

1.4 主要仪器设备 生物组织自动脱水机、生物组织包埋机（浙江金华科迪仪器设备有限公司生产）；组织切片机(德国Leika公司生产)；光学显微镜、显微照相设备（日本Nikon公司生产）；全自动生化分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；电子分析天平FA-2204B。

1.5 测定指标 肠道绒毛高度、隐窝深度、成熟细胞数量、免疫球蛋白A（ImmunoglobulinA，IgA）、免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG，IgG）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）、采食量、粪便量、产蛋数。1.6 数据统计 应用Excel、SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析，差异显著后进行LSD多重比较，以P＜0.05作为差异显著性判断标准，以P＞0.05作为差异不显著判断标准，结果用平均数±标准差（Mean±SD）表示。

2 结 果

2.1 肠道结构形态 各组120日龄的蛋鸡经屠宰后，取十二指肠前端2～3 cm的肠道，经固定24 h（4%PA灌注取材后固定6～8 h）以后，流水冲洗24 h，置于70%～80%乙醇中。对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/mL，滴加于盖玻片上（置于6孔板中），培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。苏木素染液染色2～3min，自来水洗涤。镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。浸入伊红染液染色1 min，自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞，爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12～15 min、伊红染色5min即可。

小肠是消化道内营养物质吸收和转运的主要部位，吸收是小肠绒毛的主要功能，所以，动物小肠黏膜结构的良好状态是养分消化吸收和动物正常生长的生理学基础[1]。绒毛高度与隐窝深度反映了肠道的功能状况，绒毛高度与成熟细胞数量呈显著相关，只有成熟的绒毛细胞才具有吸收养分的功能。由图1可见，试验3组的绒毛高度比对照组、试验组1、试验组2更高，试验组2的绒毛高度比试验组1和对照组更高，试验组1的绒毛高度比对照组高，添加复合型纤维各组的绒毛高度都高于对照组。各组间十二指肠隐窝深度和成熟细胞数量与绒毛高度的结果一致，添加复合型纤维的试验组都好于对照组，且随着添加量的增加效果更明显。

2.2 免疫指数 于120日龄、180日龄，每个处理组选5羽体重相近的蛋鸡，用肝素钠管翅下静脉采血3 mL，立即送往离心室，3 000 r/min离心10 min，将上层清液分离到EP管中，-20℃低温保存。用全自动生化分析仪测定血清中免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）、免 疫 球 蛋 白M （Immunoglobulin M，IgM），依据酶联免疫分析试剂盒测定。

图1 各组鸡肠道形态结构显微观察

由表2可以看出，120日龄时，试验组3的IgA含量最高，为623.16μg/mL；试验组2次之，为621.32μg/mL，二者差异不显著。对照组IgA含量最低，为528.38μg/mL；试验组3与对照组相差94.78μg/mL；试验组2、试验组3与试验组1、对照组差异显著（P＜0.05）；试验组1与对照组差异显著（P＜0.05）。试验组3的IgG含量最高，为1761.56μg/mL；对照组最低，为1 692.73μg/mL，二者相差68.83μg/mL，各试验组间差异显著（P＜0.05）。试验组3的IgM含量最高，为682.30μg/mL；对照组最低，为620.36μg/mL，二者相差61.94μg/mL，各试验组间差异显著（P＜0.05）。

180日龄时，试验组3的IgA最高，为628.31μg/mL，比120 d时提升了5.15μg/mL；对照组最低，为603.31μg/mL，但与同组120 d时相比提升了20.93μg/mL；试验组1和试验组2的IgA含量较120 d均有所提高，各试验组间差异显著（P＜0.05）。试验组3的IgG最高，为1 778.75μg/mL，比120 d提高了17.79μg/mL； 对照组最低，为1 716.57μg/mL，比120 d提高了23.84μg/mL；试验组1和试验组2的IgG含量较120 d均有所提高，各试验组间差异显著（P＜0.05）。试验组3的IgM最高，为675.23μg/mL，比120 d下降了25.47μg/mL；对照组最低，为637.43μg/mL，比120 d提高了17.07μg/mL；试验组1和试验组2的IgM含量较120 d均有所提高，各试验组间差异显著（P＜0.05）。

可见，试验组3的IgA、IgG、IgM均比其它组高且差异显著，表明试验组3配方最能够有效刺激机体产生免疫球蛋白，提高机体免疫力。

2.3 生产性能 对120日龄开产后蛋鸡的采食量、粪便量、产蛋率和破畸蛋率进行统计，由表3可以看出，试验组3的产蛋率最高，为50.69%；对照组产蛋率最低，仅为41.9%；试验组3的产蛋率与对照组比较，差异显著（P＜0.05），其它组间差异不显著（P＞0.05）。各组间平均蛋重在49.51～50.54 g，组间差异不显著（P＞0.05）。试验组3的破畸蛋率最低，为30.83%；对照组最高，为33.84%；组间差异不显著（P＞0.05）；对照组粪便量最重，为9.58 kg；试验组3最轻，为8.79 kg；二者间差异显著（P＜0.05），其它组间差异不显著（P＞0.05）。

表2 美纤多对蛋鸡血清免疫球蛋白含量的影响

3 讨 论

时至今日，蛋鸡养殖业采用高能量、高蛋白的日粮已引发了一系列肠道健康问题，而在实际生产过程中，对高纤维日粮应用的认识不足[2]。目前，畜牧业饲料中添加的粗纤维主要以米糠、麦麸为主，米糠、麦麸中含有类似于大豆中的胰蛋白酶抑制因子（一种可能引起腹泻的抗营养因子）和含有植酸等抗营养因子，需经过加工处理，以免采食过量影响产蛋鸡的生产性能。米糠、麦麸中脂肪酶活性也较高，因此，贮存过长发霉产生霉菌毒素对产蛋鸡肠道健康带来危害。米糠、麦麸中的T-2毒素会使活鸡腹泻和肝脏等重要脏器坏死，脂肪肝、肝脏有出血班，血斑蛋、破蛋、软蛋增多；腺胃、肌胃黏液分泌物增多或出现溃疡，腺胃肿胀，严重的导致突然死亡，影响产蛋量甚至停产[3]。肠道健康是制约蛋鸡生产性能的主要因素，肠道健康状态的改变直接影响营养素的利用。随着我国在2020年全面禁止抗生素作为促生长剂在饲料中添加，蛋鸡肠道疾病问题将日益突出，因此，复合型纤维-美纤多的良好应用效果应给予更多的关注。

表3 美纤多对蛋鸡生产性能的影响