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体外培养鼠胚实验对IVF实验室质控的评估

2020-05-21刘永刚

大理大学学报 2020年4期
关键词:实验室实验检测

彭 涛,刘永刚,李 琴

(云南九洲医院生殖医学科,昆明 650000)

IVF(体外受精)实验室是辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)能否顺利实施的关键环节,是产生胚胎的重要场所,直接决定患者接受辅助生殖技术后的结局。近年来,虽然胚胎体外培养技术得到了长足发展,但体外培养仍然无法完全模拟体内生长环境,胚胎实验室实行严格的质量控制和质量保证体系,不但有利于构建稳定的培养环境,而且有助于分析对胚胎培养造成影响的因素。因此,在培养人类胚胎前需要检测实验室的环境以确定该实验室是否符合使用条件,检测培养箱的各参数以确定能否成功开展胚胎培养。最后使用科学的方法对实验室、仪器设备、人员操作进行综合评估。而对此综合评估的检测方法通常有体外培养鼠胚生物学实验(mouse embryo assay,MEA)和人精子体外存活实验(human spermmotility assay,HSMA)。

1 材料与方法

1.1实验动物SPF级昆明种小鼠购自昆明医科大学实验动物中心,动物合格证SCXK(滇)2015-0002。雌鼠:18只,6~8周龄,体质量25~28 g;雄鼠:8只,8~10周龄,体质量33~35 g。适应性喂养3~5 d后进行实验。

1.2主要药品与试剂孕马血清促性腺激素(PMSG,宁波三生生物制品公司);人绒毛膜促性腺激素(HCG,丽珠医药集团公司);精子梯度分离液(Sperm Grad),洗精受精液(G-ivf plus),卵子收集液(G-mops plus),卵裂培养液(G-1 plus),囊胚培养液(G-2 plus),胚胎培养矿物油均为瑞典Vitrolife培养液系列(瑞典Vitrolife公司)。

1.3设备与耗材IVF实验室设备包括日本Nikon SMZ解剖显微镜;Nikon Ti倒置显微镜;日本Astec培养箱;美国Thermo 3111培养箱;VWR培养箱专用温度计;丹麦K-system Daul-126工作站;Epoc血气分析仪;英国G-100 CO2浓度测定仪等。培养皿、试管等耗材均为美国BD Falcon公司产品,一次性使用。……

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