陈海霞 白晓红

摘要：目的  評估ICSI显微操作技术在体外助孕Half-ICSI治疗中的有效性。方法  回顾性分析2007年4月～2018年12月于我院接受Half-ICSI治疗的不孕患者中213例周期，同一患者卵子分为两组分别采用IVF和ICSI两种受精方式，比较IVF组和ICSI组的受精情况、胚胎发育潜能、临床妊娠结局及出生缺陷。结果  纳入研究的213个取卵周期共获卵4374枚，平均获卵（19.97±7.53）枚，2159枚卵行IVF，2215枚卵行ICSI，其中成熟卵1840枚。Half-ICSI治疗中，ICSI组的正常受精率（74.62%）高于IVF组（68.18%）（P<0.05）;两组间卵裂率，优胚率，每周期优质胚胎数比较，差异无统计学意义（P>0.05），ICSI组异常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF组（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。两组种植率、出生缺陷率、累积妊娠率、累积活产率、流产率比较，差异无统计学意义（P>0.05）;两组活产单胎、活产双胎的体重比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论  在Half-ICSI治疗中，ICSI可获得较为满意的受精结局，但临床妊娠结局无明显改善。

关键词：体外受精-胚胎移植;Half-ICSI;卵子;临床结局;出生缺陷

中图分类号：R714                                   文献标识码：A                                  DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.05.022

文章编号：1006-1959（2020）05-0074-03

Abstract：Objective  To evaluate the effectiveness of ICSI micromanipulation technology in Half-ICSI in vitro fertility treatment. Methods  A retrospective analysis of 213 cycles of infertility patients who were treated with Half-ICSI in our hospital from April 2007 to December 2018. The eggs of the same patient were divided into two groups using IVF and ICSI respectively.The fertilization status， embryo development potential， clinical pregnancy outcomes and birth defects were compared between the IVF and ICSI groups. Results  A total of 4374 eggs were obtained from the 213 egg retrieval cycles included in the study， with an average of （19.97±7.53） eggs， 2159 eggs lined IVF， 2215 eggs lined ICSI， of which 1，840 mature eggs. In Half-ICSI treatment， the normal fertilization rate of ICSI group （74.62%） was higher than that of IVF group （68.18%）（P<0.05）. There was no difference in cleavage rate， superior embryo rate， and number of high-quality embryos per cycle between the two groups（P>0.05）. The abnormal fertilization rate （1PN rate 2.28%， 3PN rate 2.23%） in the ICSI group was lower than that in the IVF group （1PN rate 3.84%， 3PN rate 8.31%）（P<0.05）. There was no significant difference in implantation rate， birth defect rate， cumulative pregnancy rate， cumulative live birth rate， and miscarriage rate between the two groups（P>0.05）.There was no significant difference in body weight between single and twin births between the two groups（P> 0.05）.Conclusion  In Half-ICSI treatment， ICSI can obtain satisfactory fertilization outcomes， but clinical pregnancy outcomes have not improved significantly.

Key words：In vitro fertilization-embryo transfer;Half-ICSI;Eggs;Clinical outcome;Birth defect

ICSI技术自1992年被提出并成功用于男性不育症，使该病治疗有了较大突破[1]，此后逐漸扩展用于体外受精（IVF）周期失败、受精低下等方面，逐渐成为辅助生殖技术领域中的主要组成部分。原发不孕时间较长（≥5年），不明原因不孕或仅有轻度弱精子症的患者可能存在精卵结合障碍[2]，因此根据取卵日获卵数情况建议采用Half-ICSI受精方式[3]。但ICSI的选择指征尚不明确，常规IVF受精方式可能存在受精失败的风险，受精一旦失败，患者可能因无可移植胚胎而被迫放弃周期，精神压力较大。ICSI显微操作技术属于一项侵入性操作，其有效性和安全性目前尚无统一定论。本研究结合我中心接受Half-ICSI治疗的患者临床资料，分析这两种方式受精情况、临床妊娠和出生缺陷等，评估实行ICSI显微操作技术在Half-ICSI治疗中的有效性和安全性，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料  选择2007年4月～2018年12月天津医科大学总医院妇产科生殖医学中心接受辅助生殖助孕治疗行Half-ICSI受精方式的患者312例，纳入患者均为原发不孕5年以上不明原因性不孕，排除受精率小于60的99个周期，剩余213个取卵周期。

1.2方法

1.2.1促排方案  根据患者基础性激素、卵巢窦卵泡数等病情制定个性化促排方案，包括长方案、短方案、拮抗剂方案。当主导卵泡直径1个≥18 mm或者3个≥17 mm时，当天予以HCG 5000～10000 IU板机，扳机后36～38 h取卵。

1.2.2受精方案  每位患者所获卵子随机分为2部分，其中IVF组2159枚，ICSI组2215枚。IVF方案：采用过夜受精，ICSI方案：取卵后2 h后，用透明质酸酶去除颗粒细胞，以第一极体是否排出判定是否为成熟卵，进行单精子显微操作，次日观察受精情况。

1.3胚胎评分以及移植  根据伊斯坦布尔共识对胚胎进行形态学评分，取卵后第2天或第3天选取优质胚胎进行移植或者冷冻。在新鲜周期中，将评估符合移植条件者进行新鲜胚胎移植，如果有严重的卵巢过度刺激综合征、内膜厚度太薄、子宫内膜容受性差、促排方案不适合新鲜移植，则将胚胎冷冻，在下1个解冻周期中，将胚胎解冻，进行胚胎移植。在1个移植周期中优先选择IVF来源胚胎进行移植，在IVF无可移植胚胎的情况下选择移植ICSI来源的胚胎。

1.4统计学分析  采用SPSS 23.0统计软件进行统计学处理，计数资料以[n（%）]表示，组间比较采用？字2检验;计量资料采用（x±s），比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组实验室指标比较  纳入研究的213个取卵周期共获卵4374枚，平均获卵（19.97±7.53）枚，其中成熟卵1840枚。IVF组和ICSI组在受精率、正常受精率、1PN率、3PN率比较，差异有统计学意义（P<0.05）;两组间卵裂率，优质胚胎率，优质胚胎数比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 两组新鲜移植周期中妊娠结局分析  IVF组和ICSI组的种植率、临床妊娠率、活产率、流产率、活产单胎及活产双胎的体重比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

2.3 两组新鲜加解冻移植周期中妊娠结局分析  IVF组累积移植周期242例，ICSI组累积移植周期83例。IVF组和ICSI组累积妊娠率、累积活产率、流产率比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

3讨论

ICSI技术避开了受精和精子选择所需要的自然步骤如精子透明带结合及卵黄膜的融合与穿透，对于男性因素不孕有明显的治疗效果，应用范围包括临界精液质量、常规IVF受精失败、不明原因不孕及非男性因素不孕等多个方面，但其在显微操作过程中有可能损伤细胞骨架或纺锤体或人为的不适当精子优选，外源物质及污染物的侵入等[4]。因此ICSI技术的和有效性和安全性是临床关注的热点。

本研究中213例行Half-ICSI的不孕患者，同一患者的卵母细胞分配到IVF组和ICSI组两个治疗组。每个患者以自身为对照，从而减少女方年龄、卵巢刺激方案选择、卵母细胞质量和精子质量及实验室环境等因素影响。研究显示[5]，ICSI正常受精率高于IVF，异常受精率降低，ICSI保证较高的受精率同时显著的降低多精受精率的发生。本研究中ICSI组的正常受精率（74.62%）高于IVF组（68.18%），异常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF组（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。ICSI操作需对卵母细胞裸化后进行成熟度评估，只有成熟的卵母细胞才进行显微操作，而IVF则是所有卵子均进行常规过夜受精，次日观察受精情况，这种选择偏移可能是导致ICSI受精率高的原因之一。ICSI操作是直接将单根精子注射到卵母细胞中，理论上避免了多精受精的发生，从而降低异常受精率。

本研究中两组在种植率、卵裂率、优胚率、妊娠率、活产率、累积妊娠率、累积活产率、出生缺陷例比较，差异无统计学意义（P>0.05），说明ICSI对卵母细胞受精、胚胎发育潜能、临床妊娠结局及出生缺陷与IVF相比并无明显差异，与Foong SC等[6]报道结果一致。Bonduelle M等[7]对2995例IVF和2889例ICSI出生的孩子进行随访显示，ICSI并未增加出生婴儿畸形风险。另有研究显示[8]，IVF和ICSI出生的2周岁左右的儿童在发育方面无明显差异。但Catford SR等[9]的研究表明行ICSI的儿童发生自闭症和智力受损的风险可能会增加。本研究中对出生半年以后的孩子通过电话随访未发现出生后代缺陷的发生，但本研究样本量比较小并且随访仅追踪到出生阶段，仍需进一步长期随访研究观察ICSI对胚胎的潜在影响及ICSI来源的后代是否出生缺陷。

总之，Half-ICSI治疗中，ICSI显微操作较IVF可获得较为满意的受精结局，但临床妊娠结局无明显改善。本研究对研究对象均来自本中心且纳入研究周期数少，有待进一步多中心、大样本的研究。

参考文献：

[1]Esteves SC，Roque M，Bedoschi G，et al.Intracytoplasmic sperm injection for male infertility and consequences for offspring[J].Nat Rev Urol，2018，15（9）：535-562.

[2]Tannus S，Son WY，Gilman A，et al.The role of intracytoplasmic sperm injection in non-male factor infertility in advanced maternal age[J].Hum Reprod，2017，32（1）：119-124.

[3]Larbuisson A，Raick D，Demelenne S，et al.ICSI diagnostic：a way to prevent total fertilization failure after 4 unsuccessful IUI[J].Basic and Clinical Andrology，2017，27（1）：18.

[4]Sánchez-Calabuig MJ，López-Cardona AP，Fernández-González R，et al.Potential Health Risks Associated to ICSI： Insights from Animal Models and Strategies for a Safe Procedure[J].Front Public Health，2014（2）：241.

[5]Ohgi S，Hagihara C，Anakubo H，et al.A comparison of the clinical outcomes of embryos derived from intracytoplasmic sperm injection after early fertilization check and conventional insemination using sibling oocytes[J].Arch Gynecol Obstet，2016，293（4）：887-892.

[6]Foong SC，Fleetham JA，O'Keane JA，et al.A prospective randomized trial of conventional in vitro fertilization versus intracytoplasmic sperm injection in unexplained infertility[J].Journal of Assisted Reproduction and Genetics，2006，23（3）：137-140.

[7]Bonduelle M，Liebaers I，Deketelaere V，et al.Neonatal data on a cohort of 2889 infants born after ICSI （1991-1999） and of 2995 infants born after IVF （1983-1999）[J].Human Reproduction，2002，17（3）： 671-694.

[8]Zheng Z，Chen L，Yang T，et al.Multiple pregnancies achieved with IVF/ICSI and risk of specific congenital malformations： a meta-analysis of cohort studies[J].Reprod Biomed Online，2018，36（4）：472-482.

[9]Catford SR，McLachlan RI，O'Bryan MK，et al.Long-term follow-up of intra-cytoplasmic sperm injection-conceived offspring compared with in vitro fertilization-conceived offspring： a systematic review of health outcomes beyond the neonatal period[J].Andrology，2017，5（4）：610-621.

收稿日期：2019-12-06;修回日期：2020-01-09

編辑/肖婷婷