于 淼，李 潞，赵红丽，高 璐

根据《中国心血管病报告2016》指出，目前心血管病死亡占城乡居民总死亡原因的首位，随着社会经济的发展，心血管病危险因素流行趋势明显，导致心血管病发病人数持续增加，心血管病及疾病负担日渐加重，已成为重大的公共卫生问题，其防治工作刻不容缓。目前我国现患心血管病人为2.9亿人，其中冠心病(coronary heart disease，CHD)高达1 100万人，急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)作为冠心病较为严重的类型，更是严重威胁着人类的健康。冠心病是一种多种内在遗传因子和外在环境相互作用导致的疾病[1-2]，其中血脂异常是冠心病的主要危险因素。由于载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)的基因多态性与血脂之间、血脂异常与冠心病发病之间的密切联系，故ApoE的基因多态性与冠心病之间的内在联系成为人们关注的焦点[3-4]。目前ApoE的基因多态性研究多集中在对血脂水平、降脂疗效、药物副作用等方面，对冠心病的严重类型ACS研究较少。本研究旨在探讨ACS病人ApoE的基因多态性及其与冠状动脉病变严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本研究选取2017年9月—2018年9月就诊于沈阳医学院附属第二医院急诊或门诊并且收住院的ACS病人，且这些病人均急诊或择期行冠状动脉造影术，冠状动脉造影结果显示至少1支心外膜冠状动脉或其主要分支狭窄超过50%，并根据病变严重程度行单纯冠状动脉造影术、冠状动脉内球囊扩张术及(或)支架植入术、冠状动脉搭桥术。共收集ACS病人210例作为ACS组，其中男120例，女90例；年龄(59.6±13.2)岁。同时收集体检中心的健康体检人群110名作为对照组，此人群无明显胸闷胸痛、心电图无明显ST-T改变等冠心病的临床表现，其中男60名，女50名；年龄(57.6±10.2)岁。

1.2 排除标准 所有研究对象均排除家族性高胆固醇血症、甲状腺功能异常、肝肾功能异常、感染性疾病、恶性肿瘤以及免疫系统疾病。研究个体之间无血缘关系。

1.3 仪器和试剂 ApoE基因型检测试剂盒(PCR-荧光探针法)购自武汉友芝友医疗科技有限公司；血液基因组DNA提取盒购自天根生化科技(北京)有限公司；生化血检测试剂盒购自沈阳市威泽医疗用品经销部；全自动医用PCR分析系统为上海宏石医疗科技有限公司，型号规格：SLAN-96P。ApoE基因型检测及血液基因组DNA提取由沈阳市心血管疾病实验室完成，病人其他生化血检测由沈阳医学院附属第二医院检验科完成。

1.4 方法

1.4.1 ApoE基因多态性检测方法 采用PCR-荧光探针法，通过试剂准备区、样本准备区及核酸扩增区，利用仪器对PCR过程中相应通道信号强度进行实时监测和输出，完成ACS组及对照组ApoE基因型检测。

1.4.2 临床资料采集及血生化指标检测 病人入院后立即进行病史采集，包括一般情况、现病史、既往史、家族史、吸烟史、饮酒史及体格检查[包括体质指数(BMI)]，空腹8 h后于次日抽取静脉血，检测肝肾功能、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。

1.4.3 Syntax评分 所有病人均于冠状脉造影后进行Syntax评分，根据11项冠状动脉造影病变解剖特点定量评价病变复杂程度的危险评分方法，用于评价病人冠状动脉病变程度。Syntax评分中冠状动脉造影因素包括冠状动脉分布类型、狭窄部位、是否完全闭塞、三分叉病变、双分支病变、主动脉相关开口病变、严重扭曲、病变长度>20 mm、严重钙化、血栓、弥漫病变/小血管病变。Syntax评分的计算：冠状动脉直径≥1.5 mm、冠状动脉狭窄≥50%的冠心病病人通过计算机软件程序计算Syntax评分。

2 结 果

2.1 ACS组与对照组ApoE基因型及等位基因频率分布 本研究检测到5种ApoE基因型，分别是E3/3、E3/2、E4/3、E4/4及E4/2，未发现E2/2。ACS病人与对照组人群，ApoE基因中等位基因E3频率均最高。本研究入选的210例ACS病人及对照组110名健康体检者的基因型分布见表1。在等位基因分布方面，ACS组E4等位基因频率高于对照组(17.6%与12.3%，P<0.05)，ACS组E2、E3等位基因频率低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)；在ApoE基因型分布方面：由于E4/4、E4/2人数较少，未进行统计分析，ACS组E3/3频率低于对照组(57.6%与64.5%，P<0.05)。其他基因型比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

表1 ACS组与对照组ApoE基因型及等位基因分布情况

与对照组比较，①P<0.05。

2.2 ACS组不同ApoE异构体病人Syntax评分比较 ACS组根据不同ApoE异构体进行分组，3组病人冠状动脉Syntax评分所占比例见图1。纵坐标指各组Syntax评分所占比例，ApoE4冠状动脉Syntax>32分的比例明显高于ApoE2、ApoE3(32%与12%、14%，P<0.05)，ApoE4冠状动脉Syntax<22分的比例明显低于ApoE2、ApoE3(23%与48%、39%，P<0.05)，其他各组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。

与ApoE4组比较，＊P<0.05。

3 讨 论

ApoE基因位于19号染色体长臂，属于常染色体显性遗传基因，具有显著遗传多态性[5]，含有3种等位基因(E2、E3、E4)，产生6种基因型：3种纯合子(E2/2、E3/3、E4/4)和3种杂合子(E2/3、E2/4、E3/4)，编码3种异构体ApoE2(E2/2和E2/3)、ApoE3(E3/3)、ApoE4(E3/4和E4/4)。大量研究证实，ApoE基因可作为一种遗传因子参与动脉硬化的发生与发展[6]，并且指出E4等位基因为动脉硬化发展的独立危险因素，而E2等位基因为动脉硬化发挥保护作用。在ApoE基因多态性与心肌梗死相关性的研究中，不同试验得出的结果不尽相同。一些报道提示E4是急性心肌梗死发病的危险因素[7]，但也有研究指出，ApoE基因多态性与急性心肌梗死的发病风险有很小的相关性。ApoE基因多态性与冠状动脉血管狭窄程度相关性报道较少，且结果不尽相同[8]。有研究结果显示，冠心病病人E4等位基因携带者其冠状动脉病变明显加重，但也有研究持相反观点，提出ApoE基因多态性与冠心病冠状动脉血管严重程度无关，与冠状动脉受累数目亦无关。故目前随着ApoE基因多态性研究的深入，其与冠心病、高血压、心肌梗死、心力衰竭等的关系研究层出不穷，但因心血管疾病发病机制的多元性及复杂性[9]，故研究得出的结论不尽相同。本研究入选ACS病人为研究对象，进一步与对照组比较ApoE的基因多态性分布情况及与冠状动脉病变严重程度的关系，研究结

果显示，ACS组与对照组ApoE基因中等位基因E3频率最高，这与以往的研究结果吻合，ACS组E4等位基因频率高于对照组(17.6%与12.3%)，ACS组基因型E3/3频率低于对照组(57.6%与64.5%)。ACS组根据不同ApoE异构体进行分组，ApoE4冠状动脉Syntax评分>32分的比例明显高于ApoE2、ApoE3(32%与12%、14%，P<0.05)，ApoE4冠状动脉Syntax评分<22分的比例明显低于ApoE2、ApoE3(23%与48%、39%，P<0.05)，其他各组比较差异无统计学意义(P>0.05)，可见含有ApoE4异构体的ACS病人冠状动脉病变严重者所占比例较大，3种异构体中，ApoE2病人冠状动脉病变相对较轻。 基因多态性与临床疾病相关性是精准医学的一部分。精准医学是在大数据分析时代背景下，进一步升华个体化医学的精准性。ApoE的基因多态性相关研究依托于沈阳市心血管重点实验室，本实验室已陆续开展了不同人群的ApoE的基因多态性的研究及与药物疗效及副作用关系等的研究，其他基因型研究亦在进行，旨在通过精准医学与临床医学不断联系起来，进一步指导复杂疾病细致分组诊疗、药物疗效及副作用个体差异等工作。

本试验入选病例较少，相关病例还在持续收集中，明确的结论还需大样本研究进一步证实。