胡彩霞,刘美霞,高 娃,满都呼,常建军

(内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司,内蒙古 呼和浩特 011517)

磷是乳品中的主要营养成分之一，准确快速测定乳制品中磷含量对保证产品质量是非常重要的。在采用国际法的实际检测中，电热板加热消解乳制品是在一个较开放的空间内消解，容易带入干扰物质，进而影响检测结果。高氯酸加热分解产生二氧化氯、氯气等对环境产生污染，同时在消解后期实验产生的白烟如遇有机物极易产生威力强大的爆炸现象，而且实验消解耗时长。

本研究在原有国标法基础上,开发出一种测定乳制品中磷含量的前处理方法,采用恒温热消解试样中有机物,再依据国标方法测定消解液中磷含量。用此前处理方法测定乳制品中磷含量结果准确、操作安全简便,环境污染小。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

紫外可见分光光度计、恒温可控干燥箱、钢化消解管、分析天平。

钒钼酸铵试剂：A液，25 g 钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O)]，溶于400 ml水中；B液，1.25 g 偏钒酸铵(NH4VO3)溶于300 ml沸水中，冷却后加250 ml硝酸。将A液缓缓倾入B 液中，不断搅匀，并用水稀释至1 L，贮于棕色瓶中。

浓硝酸、双氧水、2,6-二硝基酚、氢氧化钠。

1.2 检测方法

1.2.1样品组

称取乳样0.5 g(m)于钢化消解管，再加入8 ml硝酸及2 ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6 h，得到消化液。

1.2.2空白组

向钢化消解管中加入8 ml硝酸及2 ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6 h，得到消化液。

1.2.3冷制标准曲线

分别吸取0、2.5、5.0、7.5、10、15 ml磷的标准储备液(10 μg/ml)到50 ml容量瓶中，在每个容量瓶中加入10 ml钒钼酸铵试剂，用水定容至刻度，常温下静置15 min后用1 cm比色皿在440 nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以磷的梯度浓度为横坐标，绘制标准曲线。

1.2.4制备符测空白液和试样液

将消化液转移至容量瓶中并定容至50 ml(V)，吸取10 ml(V1)消化液于50 ml容量瓶中，加10 ml钒钼酸铵试剂，混合均匀，在25～30℃下显色15 min，加水定容至50 ml(V2)，得到待测空白液和待测试样液。

1.2.5计算磷含量

在440 nm波长下，以待测空白液调零，然后测定待测试样液的吸光度，从标准曲线上查到吸光度对应的磷浓度(c)，并按照下列公式来计算磷的含量：

式中，X为样品中磷的含量，mg/(100 g)；ρ为测定用试样液中磷的质量浓度，μg/ml；ρ0为测定用空白溶液中磷的质量浓度，μg/ml；V为试样消化液定容体积，ml；V2为试样比色液定容体积，ml；V1为测定用试样消化液的体积，ml；m为试样称样量，g；1 000为换算系数；100为换算系数。

2 结果与分析

2.1 改进后的前处理方法与国标的不同之处

本研究前处理方法与国标处理方法的不同之处见表1。

表1 改进后方法与国标方法对比

由表1可知,改进后的前处理方法在操作可控性、安全性、等方面要优于国标方法，且对环境的污染小。

2.2 检测结果对比

取同一样品分别用改进方法，和国标GB 5009.87-2016的第二法钒钼黄分光光度法测定乳制品中磷含量，检测结果如表2所示。

表2 国标方法和改进后的方法测定磷含量的比较

国标中要求在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%，改进方法与国标方法测得结果相对偏差均在国标要求范围内，但是改进方法的测定结果均高于国标方法的测定值，原因主要是国标测定时消解是在开放的条件下进行，测定元素会随消解蒸汽挥发损失一部分，从而导致检测结果偏低。

取国家标准物质质控样品分别用改进方法和国标法GB5009.87-2016的第二法钒钼黄分光光度法测定，检测结果如表3所示。

由表3可知，改进方法检测磷含量与质控定值相对偏差小，比国标方法检测更接近定值。

表3 国标方法和改进方法测定质控定值样品磷含量结果比较

2.3 重复性实验比对

表4 重复性检测

按照改进后前处理方法测定不同乳制品及各乳制品的平行样进行检测，结果如表4所示。

由表4可以看出，平行样之间的相对偏差在国标要求范围内，重复性较好。

2.4 回收率测定

按照下列方法测定回收率，结果见表5。

(1)将乳制品与磷标准品溶液进行混合，得到加标样品。

(2)分别测定加标样品及乳制品中的磷含量，并按照下列公式计算回收率。

回收率=(加标样品中磷含量-乳制品中磷含量)×称样量÷(磷标准品溶液中磷含量磷标准品溶液体积)×100%。

依据GB/T 27404-2008中被测组分含量>100 mg/kg时回收率范围为95%～105%，由表5可知，本研究的方法测得回收率均在国标要求范围内。

表5 回收率

3 结论

采用硝酸加双氧水恒温消解作为检测乳品中磷的前处理方法，检测结果的准确性好，其检测操作方便，可在非工作状态下完成，环境污染小，安全性高。