王 宇，杨文丽，李嘉钰，向雪静，李月萍，蔡佳丽

（1.攀枝花学院附属医院，四川 攀枝花617000；2.攀枝花学院医学院，四川攀枝花617000）

白芨是多年生草本植物，属于兰科白芨属。主要分布在云南、四川、贵州、湖南、湖北、江西等省，多生长在海拔高度为950-3500 m的阔叶林下。白芨及其块茎是我国药典记录的传统中药材之一，最早在《神农本草经》中就有记载，其块茎中含有较丰富的苄类、萜类和多糖类化学成分，具有止血润肺、消肿生肌、抗氧化、清除自由基、预防心血管疾病、抗菌和抗肿瘤等功效，在医药食品等领域已广泛应用［1-4］。

目前，通过构建cDNA文库和高通量转录组测序，已对多种药用植物进行分子生物学研究，挖掘出了一些重要功能基因，对于揭示不同生物学性状的分子机制具有重要意义［5］。

本研究采用高通量测序技术对白芨块茎进行转录组分析，得到白芨的重要功能基因，对其进行功能注释、分类和代谢通路分析，这为下一步研究白芨的药用成分、次生代谢等机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验材料

植株由攀枝花市丰盛源农林开发有限公司提供。

1.1.2主要仪器与试剂

凝胶成像系统和电泳仪购于美国伯乐公司、超微量核酸分析仪购于杭州奥盛仪器有限公司、RNA提取试剂盒购于天根生化科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1RNA提取

按照RNA提取试剂盒说明提取总RNA，使用凝胶电泳和超微量核酸分析仪对其质量和浓度进行分析。

1.2.2cDNA文库的构建

首先用磁珠富集poly（A）mRNA，然后以mRNA为模板，经逆转录反应合成第一链cDNA和第二链cDNA，对双链cDNA进行纯化后再进行末端修复、加尾和加接头，片段分选以及PCR扩增，最后构建成cDNA文库，对文库质检后进行测序。……