段志园，许欣竹，谢 鑫，刘文俊，陈 靖，柴纪严，吴成举，单德红＊＊

（1. 辽宁中医药大学教学实验中心 沈阳 110847；2. 辽宁中医药大学研究生学院 沈阳 110847；3. 辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847）

线粒体产能（三磷酸腺苷，ATP）为细胞执行生物学功能提供动力；骨骼肌富含线粒体，其收缩需消耗大量ATP，线粒体损伤则收缩力下降。线粒体不仅决定细胞生存，还决定细胞死亡，这是因为氧化磷酸化（Oxidative phosphorylation，OXPHOS）过程中活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）异常积累可损害其功能。对此，宿主细胞可启动线粒体自噬机制清除损伤，如不能及时清除，可诱导细胞凋亡[1，2]。前期研究发现，脾气虚证大鼠肌力下降与骨骼肌OXPHOS 损伤和自噬紊乱有关，但其是否诱导细胞凋亡尚不完全清楚[3]。中医学认为“脾气虚则四肢不用”，可治以四君子汤。四君子汤由人参、白术、茯苓、炙甘草组成，是健脾益气的代表方剂。已有研究发现，四君子汤可提高脾气虚证大鼠骨骼肌线粒体生物合成进而提高肌力[4，5]，但其对线粒体自噬的作用并不清楚，其是否影响细胞凋亡也未见报道。为此，本研究主要围绕线粒体自噬和细胞凋亡机制，以脾气虚证大鼠股四头肌线粒体为对象，探讨四君子汤治疗“脾气虚四肢不用”的机制。

1 材料

1.1 动物

50 只SPF级7 周龄雄性SD 大鼠，体质量（200 ±10）g，购于辽宁省本溪巿实验动物中心，许可证号：SCXK（辽）-2010-0001，饲养于辽宁中医药大学实验动物中心，许可证号：SYXK（辽）-2013-000-9。室温18-23℃，相对湿度45-55%，自由饮水进食，适应性饲养1周后，开始实验。

1.2 伦理审查

项目通过辽宁中医药大学实验动物伦理委员会审核，批准号：20151205。……