敖莉丝 王伟 任董董 李慧静 黄嘉琪 纪春艳

摘  要：由可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）引致的溃疡病是目前威胁南洋楹健康生产和品质的重要病害。快速、准确检测病原菌是进行病害有效防控的基础。本研究用南洋楹溃疡病菌翻译延伸因子（EF 1-α）编码基因上保守靶基因区域的序列设计特异性引物EF-AF/AR。利用EF 1-α编码基因通用引物EF-688F/986R和特异性引物EF-AF/AR组合进行巢式PCR扩增，获得264 bp的单一条带，灵敏度检测最低限度为1 fg/?L。利用建立的巢式PCR方法对林间疑似溃疡病的病样进行检测，能够特异性地检测到L. theobromae。本研究建立的巢式PCR检测方法准确、特异且灵敏性高，可为南洋楹溃疡病的早期诊断和及时防控提供基础的理论和实践依据。

关键词：南洋楹溃疡病;可可毛色二孢;巢式PCR

中图分类号：S432.4      文献标识码：A

Abstract： A rapid nested-PCR detection system for Falcataria moluccana stem canker disease was established. The outer pair of primers EF-688F/986R and the inner pair of primers EF-AF/AR were designed based on the EF 1-α gene sequences of Lasiodiplodia theobromae. The established specific nested-PCR could amplified a single product of 264 bp with annealing temperature of 63 ℃， reaction cycles of 37. The lowest detectable concentration was 1 fg/?L. L. theobromae could be specifically detected by nested-PCR from the diseased plant samples. The establishment of rapid， sensitive nested-PCR detection system of L. theobromae might have significance in early diagnosis， and disease control of F. moluccana stem canker.

Keywords： Falcataria moluccana stem canker; Lasiodiplodia theobromae; nested-PCR

南洋楹（Falcataria moluccana）是世界著名的热带速生树种，树形美观，木质纤维丰富，韧性强，材质轻，经营周期短，是家具、造纸制浆等的优良原料。此外，其用途十分广泛，经济效益和景观价值高。南洋楹原产地为马来西亚马六甲和印尼马鲁古群岛，我国于1940年前后引种该树种。目前，在广东、广西、海南和福建等地广泛种植[1]。有关南洋楹病害的相关研究报道较少。Colletotrichum truncatum和C. capsiciaa能够侵染南洋楹1年生的小树，引起炭疽病[2]。由Urom?ycladium tepperianum引起的瘤锈病对马来西亚、印尼等地的南洋楹健康生产造成威胁，病树的枝叶形成众多瘿瘤，树冠大量落叶落枝，植株生长受阻[3]。南洋楹丛枝病由类菌原体（MLO）引起，既为害幼树，也为害老树，病树腋芽或侧芽大量萌发，节间缩短，丛枝状，发病后期，枝条干枯，植株死亡[4]。……