段雅婕 梅志刚 孙德权 李伟明 庞振才 胡会刚

摘  要：FS-4是1株对香蕉枯萎病菌有较好拮抗作用的放线菌。以高氏一号培养基为基础，通过单因素和响应面实验进行了相关优化，对FS-4菌株的发酵工艺进行筛选。结果表明：0.5%蛋白胨，2.4%蔗糖，0.05%的磷酸氢二钾、氯化钠和硫酸镁，发酵温度28 ℃，初始pH为7为最佳培养基配方及最优发酵条件。发酵62 h后，发酵液中抑菌物质活性达到最高水平，对香蕉枯萎病菌的抑菌圈直径达到27.1 mm。

关键词：放线菌菌株FS-4;发酵工艺;响应面法

中图分类号：Q949.748.5      文献标识码：A

Abstract： The screening of antagonistic bacteria from soil microorganisms in the areas with banana Fusarium wilt is of great practical significance for controlling this disease. In this report， a strain， designated FS-4， was isolated from healthy banana rhizosphere soil in the area affected by Fusarium wilt. Based on Gauses No. 1 synthetic medium， the optimization of medium， single factor experiments and response surface experiments were conducted to maximize the production of the antibacterial substances of actinomycete FS-4. The best fermentation medium and fermentation conditions were as follows： sucrose 2.4%， peptone 0.5%， K2HPO4 0.05%， NaCl 0.05%， MgSO4 0.05%， fermentation temperature 28 ℃， initial pH 7. Under the conditions， the inhibition zone diameter of actinomycete FS-4 fermentation filtrate reached 27.1 mm on the test plates of Bacillus subtilis after 62 h incubation

Keywords： actinomycetes FS-4; fermentation conditions; response surface method

由尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum f. sp. cubense）侵染引起的枯萎病是香蕉种植中的毁灭性病害，对相关产业的健康发展具有重要影响[1]。抗病育种、化学农药、轮作等方法在对香蕉枯萎病的防治中均存在不同的缺陷，难以规模化推广应用。利用包括拮抗微生物在内的生物防治方法具有安全、环保、经济效益高等优点，是当前该类病害防治研究中的热点[2]。FS-4是本团队从香蕉枯萎病发病田土壤中分离筛选出的1株放线菌，其对香蕉枯萎病菌具有较好拮抗作用[3-4]。

本团队采用16S rDNA 序列分析其放线菌为曼尼普尔链霉菌（Streptomyces manipurensis），命名为曼尼普尔链霉菌FS-4（Streptomyces manipurensis FS-4）[3-4]。采用国际链霉菌规划中的标准培养基（1976），28 ℃培养7～21 d，观察FS-4菌株培养特征。结果发现：FS-4菌株能使硝酸盐还原，淀粉水解，能产生H2S、黑色素、尿素酶和酪氨酸酶，但不能使明胶液化、牛奶胨化与凝固。生长pH范围为5.0～10.0，最适生长pH为7.0。最适生长温度为28～32 ℃，不能生长在NaCl含量大于3%的培养基。FS-4菌株对香蕉枯萎病1号（Foc 1）和4号（Foc 4）小种均有拮抗作用，对香蕉枯萎病菌1号小种的拮抗性较弱，显著低于香蕉枯萎病菌4号小种，2者的抑菌带宽度分别为12.07和15.12 mm。……