张 璐,党秀丽,刘珍珍,胡苏辉,王臣荣,菅复春∗ (.河南农业大学 牧医工程学院/河南省人兽共患病国际联合实验室,河南 郑州45000;.河南农业大学 理学院,河南 郑州45000)

卵黄抗体(immunoglobulin of egg yolk,Ig Y)是通过免疫产蛋鸡,由其生产的蛋黄中提取相应的抗体,并可用于相应疾病的预防和治疗的制剂。Ig Y 具有化学性质稳定、产量高、利于生产、成本低廉,产生有效免疫反应所需抗原量小等优点[1],并可作为捕获或检测抗体用来检测哺乳动物免疫球蛋白,且具有更强的特异性和灵敏度。目前,Ig Y 的应用范围已经扩展到保健品、医药卫生及生物技术等相关领域,应用前景良好[2-4]。

近年来,ELISA 方法以其较强的特异性,高灵敏度,操作简便等优点,在隐孢子虫的检测中得到应用[5-7],但目前仍然没有国产商品化的ELSIA 试剂盒可供使用,因此,建立检测隐孢子虫抗体的间接ELISA 方法很有必要[8-9]。本试验尝试制备抗隐孢子虫的特异性Ig Y 抗体,可用于隐孢子虫病的治疗。在获取特异性Ig Y 过程中,为检测免疫鸡群的抗体水平、Ig Y 抗体产生变化的动态,建立了间接ELISA 检测特异性Ig Y 抗体。

1 材料与方法

1.1 试验动物从郑州市某养鸡场选择并购买8只120日龄开产健康海兰蛋鸡,粪便检查为隐孢子虫阴性,血清学检测显示无抗隐孢子虫抗体。

1.2 仪器及试剂超声波细胞粉碎仪:Cole Parmer Instrument公司;紫外分光光度计:北京普析通用仪器有限公司;全自动酶标仪:Thermo 公司;HRP-兔抗鸡Ig Y:上海艾博抗贸易有限公司;透析袋:北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。

1.3 抗原的制……