王国强，马红芳，曾华辉，贾 媛，苏运芳，毛梦迪，刘保光，尚立芝*，张振强*

(1.河南中医药大学中医药科学院，河南 郑州 450046；2.河南省农业科学院，河南 郑州 450002；3.河南中医药大学药学院，河南 郑州 450046；4.河南中医药大学基础医学院，河南 郑州 450046)

【研究意义】猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea，PED)，由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)引起仔猪和育肥猪的一种以呕吐和水样腹泻为特征的高度接触性肠道传染病，其可感染各年龄段的猪，导致较高的发病率和死亡率，3 日龄以内的哺乳仔猪感染后死亡率最高可达100 %，临床变化和症状与猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus，TGEV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(Porcine hemmagglutinatipg Encephalomyelitis Virus，PHEV) 及猪丁型冠状病毒(Porcine Deltacorona Virus，PDCo V)极为相似[1]。该病于1971年在英格兰首次被发现和报道，在比利时流行期间被确认其病原为PEDV[2-4]。PEDV属于尼多病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的Ⅰ型成员，其基因组为约28 kb大小的单链正义RNA，可编码4个结构蛋白(S，E，M和N)和非结构蛋白(1a，1ab和ORF3)[5]。从2010年下半年开始，我国全国范围内爆发PEDV，给我国养猪业造成了严重的经济损失。在形态学、临床变化和症状上，PEDV和TGEV、PHEV以及PDCo V极为相似，又很难做到鉴别区分。因此，实验室快速、准确诊断PEDV对防控尤为重要，逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)可以用来检测组织和粪便的病料，其便捷、快速、准确，灵敏性高、特异性强、重复性好等特点，成为PEDV检测的首选。【前人研究进展】自1990年代初以来，聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ，PCR)被广泛用作诊断工具，改变了微生物诊断方法，尤其是RT-PCR的使用彻底改变了RNA病毒的诊断检测方法，可对各种样品中的RNA进行快速，特异和灵敏的检测。……