熊 强，姜晓燕，丁立新，刘晓丹，周平坤，丁库克，

(1．中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所，北京 100088；2．军事医学科学院军事医学研究院辐射医学研究所，北京市放射生物学重点实验室，北京 100850)

【关键字】IER5；Sf9细胞；杆状病毒表达系统；鉴定

早期快速反应基因5(immediate-early response gene 5，IER5)是早期慢反应基因家族的一员，最早是由Williams等人发现并命名[1]。该基因位于1号染色体长臂2区5带3亚带(1q25.3)，含2 350个核苷酸，无内含子。IER5基因的开放阅读框编码327个氨基酸，和其他早期慢反应基因家族pip92、IER2、ETR101一样，氨基酸末端含丰富的脯氨酸，但与pip92、IER2、ETR101基因不同的是，IER5的转录激活不需要磷酸激酶C诱导[2]。

我们的前期工作发现，辐射能够诱导肿瘤细胞IER5基因表达上调[3]；IER5基因的表达抑制可提高细胞分裂进入G2/M期的比例，促进细胞分裂，提高细胞对辐射的拮抗性，即IER5基因沉默使受辐射的宫颈癌与肝癌细胞发生G2/M期阻滞，参与了细胞周期调控[4]；IER5的表达显著降低HeLa细胞电离辐射诱导DNA双链断裂的修复效果[5]；辐射刺激下IER5抑制了CDC25B基因的表达，参与了对CDC25B基因的调控[6-7]。但我们尚未进行IER5蛋白结构方面的探索。

近年来，昆虫杆状病毒表达系统由于具有安全性好、重组蛋白表达量高、能同时表达多个基因、重组蛋白翻译后加工完整等特点，因而受到广泛应用[8-9]。昆虫杆状病毒表达系统始于20世纪80年代，Smith等[10]人在昆虫细胞中通过以杆状病毒作为载体表达出了具有生物活性的人β干扰素。自此之后，经过研究者们不断地改进优化，昆虫杆状病毒表达载体已经有非常成熟的应用。……