金 月,金明光,魏 来,崔云峰

(1.长春工业大学 口腔科,吉林 长春130012;2.吉林大学 口腔医院;3.长春市中医院 口腔科;4.北京劲松口腔医院)

舌癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤，治疗比较棘手[1]，因此有必要进一步研究舌癌的发病抑制以及发现及探求有价值的治疗药物，为舌癌的治疗提供依据。姜黄素(curcumin)是从草本植物姜黄根茎中提取出的一种酚性色素，具有抗肿瘤，抗氧化，抗突变等多种生物学作用，且毒副作用小，获取方便，对多种肿瘤细胞增殖有明显抑制作用[2]。因此，本研究依Tca8113细胞为靶点探讨姜黄素的生物学机制，为舌癌治疗开辟一新治疗途径。

1 材料与方法

1.1 材料

人舌癌细胞株(Tca8113)由北京大学口腔医学院惠赠。姜黄素试剂购于北京化工二厂。96孔细胞培养板。四甲基偶氮唑蓝(MTT)购于美国sigma公司，胎牛血清购于长春生物制品研究所。

1.2 方法

1.2.1细胞培养，分组，MTT试验，流式细胞术等实验方法参照文献[3],并略加改进。

2 结果

2.1MTT结果显示，不同浓度的姜黄素制剂对Tca8113细胞增殖均有抑制作用，且呈剂量依赖性，与对照组相比细胞存活率显著降低。可抑制Tca8113细胞生长，诱导细胞凋亡。差异有统计学意义，P<0.01(表1)。

表1 不同浓度的姜黄素制剂对Tca8113细胞增殖抑制率

2.2流式细胞术结果，不同浓度的姜黄素制剂作用于Tca8113细胞后，G0/G1期细胞显著增多，G0/G1期细胞阻滞，从而使S期细胞减少，导致G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高。组间比较差异有统计学意义，P<0.01，提示姜黄素制剂可阻滞Tca8113细胞周期进程改变及诱导细胞凋亡(表2)。

表2 不同浓度的姜黄素制剂对Tca8113细胞周期进程改变及凋亡率

2 讨论

舌癌的基础研究和临床治疗是口腔颌面——头颈肿瘤外科的重点研究内容。五年生存率为50-60%左右，且一直徘徊迟滞不前[3]。因此，寻找不良反应小或无不良反应的药物成为目前舌癌综合治疗的热点和难点，近年来姜黄素抗肿瘤研究方面受到重视：一方面因其来源广泛，价格低廉，不良反应小，抗肿瘤谱广，具较大的开发潜力。

MTT实验结果表明，不同浓度姜黄素制剂对Tca8113细胞增殖均有抑制作用。呈明显剂量依赖性，与对照组细胞相比差异有统计学意义，MTT实验检测细胞存活率，具有一定的客观性。被广泛用于抗肿瘤药物筛选和细胞毒性的试验研究。姜黄素抗肿瘤机制比较复杂，主要包括抑制肿瘤细胞增殖，诱导凋亡，阻滞细胞周期进程，抑制新生血管生成，抑制环氧合酶-2(cox2)等多个方面[4]。

流式细胞术结果显示，姜黄素能使Tca8113细胞周期发生明显改变，G0/G1细胞阻滞，不能进入S期，故S期细胞减少，从而造成G2/M期细胞相对增多，细胞各期间比例失衡，G0/G1期细胞为DNA合成期。是制造和产生的mRNA.tRNA.rRNA和核蛋白体，故一旦G0/G1期受阻，细胞则不能顺利进入G2/M期，从而使肿瘤细胞生长延迟并逐渐走向凋亡或死亡，姜黄素的这种作用主要是通过抑制胸腺嘧啶脱氧核苷激酶的活性来实现的，由于G1期细胞是发育完成增值周期的启动点[5]。细胞周期由G1期进入S期，存在G1→S阻滞点。如果这一调控功能一旦丧失，导致细胞增殖失控，从而形成肿瘤[6]。研究结果表明，姜黄素能降低Tca8113细胞停滞于G1→S阻滞点，引起G1期细胞的阻滞，从而起到抑制肿瘤细胞增殖的作用。

综上所述，本实验证实了姜黄素制剂能够抑制Tca8113细胞增殖，引起细胞损伤，阻滞细胞周期进程，诱导细胞凋亡，但是，由于细胞生物学机制十分复杂仍然需要更深入的研究[7]，以进一步明确姜黄素诱导Tca8113细胞周期阻滞及凋亡机制。以期达到提高疗效及其治疗应用的顺应性。