曹 丁， 李学优， 肖宏艳， 昝继清

（广州市微生物研究所，广东广州510663）

近年来家禽肿瘤和病毒感染引起的鸡马立克病、新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎等烈性传染性疾病呈地方性流行趋势，每年造成数十亿元的经济损失，是当前养禽业发展的大敌，如何有效治疗家禽肿瘤和病毒感染性疾病一直是困扰禽病防治的重大难题之一（蔡梅红等，2007）。 对于兽用抗病毒生物制品来说，与传统的化学药物和疫苗相比，干扰素（IFN）作为免疫应答的自然介导物和调节物之一，具有广谱的抗病毒活性，在临床上具有良好的应用前景（Galligan 等，2006）。尤其是鸡a干扰素是一种抗病毒性较强的生物制品，具有作用广泛、残留小、几乎无毒性等特点，为这些疾病的防治提供了新的手段（Platanias 等，2005）。

目前国内对于鸡a 干扰素的研究多数处于实验室阶段及小试水平， 对于其下游大规模高密度发酵技术研究缺乏， 其生产还存在着生产成本过高、表达效价低、工艺控制复杂、生产稳定性差、养殖业对其用量大等问题，难以实现规模化生产（岳道友等，2010）。

本课题组前期构建了含有鸡α 干扰素优化基因的真核表达载体pPIC9k，并将其5＇端非翻译区（5＇UTR）序列进行改造，去除多余的8 个碱基序列，使其与毕赤酵母AOX1（醇氧化酶）的mRNA 序列完全一致， 并初步研究了改造载体在毕赤酵母SMD1168 中的表达和抗病毒活性，在摇瓶水平其抗病毒活性达到1.5×106U/mL。 本研究在此基础上，在500 L 中试水平，通过研究pH、装液量、溶氧、诱导条件等因素对毕赤酵母工程菌发酵产鸡α 干扰素的影响，优化一套成熟的产鸡α 干扰素的毕赤酵母高密度发酵工艺，为鸡α 干扰素的放大生产奠定基础。……