陈永灿 杨汐茵 陈 宇 曾国良 白 钰,2 王恒苍,2 严茂祥 范天田

1 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

2 浙江省立同德医院 浙江 杭州 310012

3 浙江省杭州市萧山区瓜沥镇社区卫生服务中心 浙江 杭州 311200

4 广西梧州市中医医院 广西 梧州 543000

5 浙江省中医院 浙江 杭州 310006

6 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

慢性萎缩性胃炎（CAG）是临床常见的消化内科疾病，是肠型胃癌Correa模式的关键环节。临床实践表明，半夏泻心汤治疗CAG作用明显[1]。本实验通过观察半夏泻心汤对CAG大鼠胃组织部分炎症因子的影响，探讨其可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物：选择健康Wistar大鼠60只，雌雄各半，6周龄，SPF级，购于上海斯莱克实验动物有限公司[SCXK（沪）2013-0016]。饲养于浙江省中医药研究院实验动物中心SPF屏障系统[SYXK（浙）2014-0003]。

1.2 半夏泻心汤制备：半夏泻心汤（半夏、炙甘草、黄芩各9g，党参、大枣各30g，干姜6g，黄连3g），由浙江省中医院中药制剂室制成流浸膏，每毫升含2.4g生药，冷藏4℃备用。

1.3 CAG模型建立：60只大鼠随机分成正常组10只和造模组50只。正常组以生理盐水代替注射或灌胃，造模组大鼠采用主动免疫-去氧胆酸-酒精综合法造模16周。

1.4 分组及给药：造模大鼠随机分成5组，每组10只。模型组给予生理盐水灌胃，半夏泻心汤（下称中药）低（6g/kg·d）、中（12g/kg·d）、高（24g/kg·d）剂量组给予中药流浸膏灌胃，阳性对照组给予叶酸（5mg/kg·d）混悬液灌胃，均连续给药8周。

1.5 检测方法：采用Realtime-PCR技术检测胃组织核因子-κB（NF-κB）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达，Western Blot技术检测NF-κB、磷酸化核因子-κB（P-NF-κB）的蛋白表达水平。

1.6 统计学方法：采用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料以±s表示。应用单因素方差分析，方差齐用LSD检验；方差不齐用Dunnett’s T3检验。

2 结果

2.1 半夏泻心汤对CAG大鼠胃组织NF-κB、IL-1β、TNF-αmRNA表达的影响：与正常组比较，模型组上述指标mRNA表达水平皆上调（P＜0.01）；与模型组比较，中药组及叶酸组上述指标mRNA表达水平降低，且中药高剂量组接近正常组，疗效优于叶酸组（P＜0.01，P＜0.05）。见图1～3。

图1 各组CAG大鼠胃组织NF-κBmRNA相对表达量

图2 各组CAG大鼠胃组织IL-1βmRNA相对表达量

图3 各组CAG大鼠胃组织TNF-αmRNA相对表达量

2.2 半夏泻心汤对CAG大鼠胃组织NF-κB、P-NF-κB蛋白表达影响：与正常组比较，模型组上述指标蛋白表达均明显增加（P＜0.01）；与模型组比较，中药组及叶酸组上述指标蛋白表达水平均下调，且中药高剂量组NF-κB及P-NF-κB蛋白降低更明显（P＜0.01，P＜0.05）。见图4～5。

图4 各组CAG大鼠胃组织NF-κB蛋白表达

图5 各组CAG大鼠胃组织P-NF-κB蛋白表达

3 讨论

CAG以胃黏膜炎症反应、固有腺体数目减少、胃黏膜变薄等为主要特点，或伴肠化生，或有异型增生，主要累及胃底和胃体。中医学将其归属于“痞满”“脘痛”等范畴，病位在胃，与肝、脾有关。脾胃失司、寒热错杂是其主要病机。半夏泻心汤为张仲景治疗心下痞主方，寒热同调、辛开苦降，近年来研究其对胃肠道疾患尤其是CAG疗效明显[2]。Notch信号通路由不同受体、配体及下游靶基因组成，参与CAG及胃癌发生[3]。其中，IL-1β、TNF-α、NF-κB、P-NF-κB等炎症因子及炎症调节因子关键分子起着重要作用。本实验研究显示，半夏泻心汤使CAG大鼠NF-κB、IL-1β、TNF-αmRNA及NF-κB、P-NF-κB蛋白表达明显下降，以高剂量组作用最明显。提示半夏泻心汤可能通过下调Notch信号通路下游靶基因NF-κB的表达，来抑制炎性细胞IL-1β、TNF-α的转录、释放，促进慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织修复，减轻胃黏膜萎缩、肠上皮化生及异型增生，阻断其向胃癌发展。