李福伟 朱连勤 李安平 陈甫

摘  要：本文旨在对疑似霉变饲料致蛋鸡产蛋率下降的原因进行诊断。通过临床症状观察和病理剖检初步诊断疑似霉变饲料引起蛋鸡产蛋率下降，应用高效液相色谱串联质谱法对饲料中黄曲霉毒素B1（AFB1）、烟曲霉毒素B1（FB1）、呕吐毒素（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）的含量进行检测，并通过细菌和霉菌培养检测饲料中的大肠杆菌、沙门氏菌和霉菌。结果发现，蛋鸡产蛋率下降约3%，口腔粘膜和眼睛周围溃疡，腹泻;剖检可见小肠点状出血;饲料中AFB1、FB1、DON和ZEN含量依次為1.79μg/kg、1380μg/kg、3.08mg/kg和228μg/kg，DON高于国家限量标准;每克饲料中霉菌含量为1.7×105个，高于国家限量标准2.8倍。因此，确诊蛋鸡产蛋率下降为饲料霉变引起。

关键词：蛋鸡;霉变饲料;霉菌毒素;霉菌;

中图分类号：S858.31     文献标识码：C    文章编号：1673-1085（2019）11-0030-03

饲料中霉菌的大量生长繁殖会导致饲料发生霉变，影响饲料的适口性，降低饲料品质、动物的采食量和生产性能[1～3]。畜禽霉变饲料中毒的症状往往不明显，主要表现为皮肤和口腔溃疡，外阴红肿、乳头肿大，不孕、假孕与流产，肺水肿和胸膜腔积水，腹泻等[4～6]。然而，临床上畜禽霉变饲料中毒往往难以诊断，且常被人们所忽视[7～9]。2019年，青岛某蛋鸡场蛋鸡产蛋率下降，我们通过临床症状观察和病理剖检初步诊断为饲料霉变引起，经霉菌毒素检测、霉菌培养和SPF鸡饲喂试验确诊。现将诊断情况如下。

1  基本情况

1.1  发病情况  2019年6月，青岛某蛋鸡场5000羽蛋鸡，采食减少，产蛋率下降大约3%，零星死亡，蛋壳变薄。

1.2  病史调查  鸡群饲养期间常规免疫，鸡场新进一批饲料饲喂后，鸡群缓慢发病，采食减少，体重下降，产蛋率下降，啄肛;使用抗生素和抗病毒药联合治疗后，并无明显效果。

1.3  临床症状  病鸡鸡冠、颜面皮肤溃疡（图1），比例大约占10%;轻度腹泻，粪中含有不消化的饲料颗粒;打开口腔发现口腔粘膜溃疡，表层覆盖一层淡黄色痂膜，比例约20%，见图2;蛋壳质量下降，血斑蛋和沙壳蛋增多。

1.4  病理剖检  挑选皮肤和口腔有溃疡的蛋鸡解剖发现，口腔中腭、舌和颊面部有溃疡灶，表面有一层黄白色坏死性痂膜覆盖;气囊有浅黄色结节;肝脏肿胀、发黄，质脆易碎;肠道粘膜点状出血，见图3。

2  饲料霉菌毒素检测

采集饲料送至青岛农业大学动物营养代谢病与中毒病研究室，应用高效液相色谱串联质谱法对饲料中黄曲霉毒素B1（AFB1）、烟曲霉毒素B1（FB1）、呕吐毒素（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）的含量进行检测，结果如表1所示。与国家限量标准（GB13078-2017）对比，AFB1、 ZEN和FB1低于限量标准，接近限量标准，DON高于限量标准。

3  细菌与霉菌培养

取霉变饲料5g，加无菌生理盐水至50mL，充分振摇混合，制成1：10悬液，取0.1mL接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基和普通营养琼脂培养基，分别于28℃和37℃的恒温培养箱中恒温培养，发现普通营养琼脂培养基上无大肠杆菌和沙门氏菌生长，在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上生成大量白色表面粗糙且菌丝呈白色棉絮状的大菌落和白色透明表面光滑的小菌落，见图4;挑取菌落镜检鉴定，结合菌落形态初步判定大菌落为曲霉菌，小菌落为芽孢杆菌。每克饲料中曲霉菌含量为1.7×105个，高于国家限量标准（GB13078-2017）2.8倍。

4  诊断与治疗

经临床症状、剖检变化、饲料霉菌毒素和霉菌检测的结果，确诊为饲料霉变导致的蛋鸡产蛋率下降。建议蛋鸡养殖户立即更换饲料，多维素添加加倍，1周后回访，蛋鸡采食量、蛋壳质量和产蛋率回升，腹泻减少。

5  讨论

本文通过临床症状观察、病理剖检、霉变饲料检测，最终确诊了这例蛋鸡产蛋率下降的原因是由于饲料霉变导致。首先，病例出现了眼部周围和冠等无毛区的溃疡、口腔溃疡、腹泻等;其次，蛋鸡霉变饲料中毒剖检病变主要表现为肠道和肝脏出血，其他的脏器并无明显变化;通过饲喂蛋鸡霉变饲料后，蛋鸡也表现出肝脏变性出血和肠道点状出血;第三，饲料中霉菌的含量发现曲霉菌超标2.8倍，而饲料中ZEN的含量接近限量标准，DON的含量高于限量标准。通过以上诊断，我们认为饲料霉变导致了霉菌含量超标，引起了蛋鸡采食下降，腹泻，产蛋率下降;而较高的霉菌毒素会对粘膜产生损伤，导致皮肤和口腔粘膜溃疡的发生，同时与霉菌共同作用引起霉菌性口炎。因此，我们认为本病例中蛋鸡出现的皮肤和口腔粘膜的溃疡是霉菌及呕吐毒素超量共同作用的结果。

总之，霉变饲料中毒是霉菌及其毒素共同作用的结果，在临床上缺乏典型的症状和病变，诊断起来较困难;把好饲料质量关和在饲料中添加吸附剂是防治本病的主要措施。

参考文献：

[1]  朱风华，陈甫，徐进栋，等.2018年山东省饲料原料及配合饲料霉菌毒素污染状况调查[J].中国畜牧杂志，2019，55（08）：151-156.

[2]  李安平，朱连勤，陈甫，等.2017年山东地区鸡饲料及原料中AFB_1、DON和ZEN污染情况调查[J].中国家禽，2018，40（10）：69-72.

[3]  陈甫，朱风华，朱连勤.2016年山东省主要家禽饲料中AFB1、DON和ZEN污染情况调查及风险评估[J].中国家禽，2017，39（09）：69-72.

[4]  黄凯，朱风华，陈甫，等.烟曲霉毒素B_1对鸡肝脏细胞的毒性作用[J].中国畜牧杂志，2016，52（01）：29-32.

[5]  黄凯，朱风华，宋明明，等.呕吐毒素体外对鸡脾脏淋巴细胞的毒性作用[J].中国畜牧杂志，2015，51（13）：34-37.

[6]  罗晓松，许福文. 霉變饲料引起雏鸡真菌毒素中毒的诊治[J]. 中国兽医杂志，2010，04：72-73.

[7]  欧阳焕强，赵京媛，孙晓成等. 饲料霉变对家禽的危害及防治措施[J].中国动物保健，2012，12：56-58.

[8]  邢兰君，唐乐.肉牛食霉变青贮饲料中毒的治疗[J]. 中国兽医杂志，2012，07：85-86.

[9]  贾宽青.饲料霉变中毒症状及其预防方法[J]. 饲料博览，2013，11：54-55.

Diagnosis of Feed Mildew Resulting in Decline of Laying Rate

LI Fuwei1，ZHU Lianqin2，LI Anping， CHEN Fu2

（1.Institute of Poultry Research，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan 250023，China;

2.College of Animal Science and Veterinary Medicine， Qingdao Agricultural University， Qingdao 266109， China;3.Baiaoming feed additive （Shanghai） Co.， Ltd，Shanghai 201800，China）

Abstract：To diagnose the declined reasons of laying rate caused by mildew poisoning in laying hens.By observing the clinical symptoms and the anatomy，the decline of laying rate in laying hens were initially diagnosed as the mildew poisoning; aflatoxin B1 （AFB1）， zearalenone （ZEN）， fumonisin B1 （FB1） and deoxynivalenol （DON） were determined by HPLC-MS/MS， E.coli， salmonella and mould were determined by cultivating methods，the clinical symptoms and the anatomy were observed. The results showed that the major symptoms of the laying hens included the laying rate declined by 3%，ulcer in oral mucosa and around the eyes，diarrhea，and the dotted hemorrhage in intestine. Concentrations of AFB1， FUMB1，DON and ZEN were 1.79，1380，3.08 and 228 μg/kg in feed， which were lower than the national limits;The fungus content was 1.7×105 per gram， which was 2.8 times higher than the national standard.It is concluded that the decline of laying rate in hens were diagnosed as the feed mildew.

Key words： laying hens; mildew feed; mycotoxins□