吴丹 李伟 刘冬冬 张夏平

(吉林省动物疫病预防控制中心, 长春 130062)

养殖业是我国现代化农业的支柱产业,在农民增收以及脱贫致富方面扮演重要角色。 但在各方面因素持续作用下,动物疫病发生以及防控日渐复杂,如何快速、准确诊断各类动物疫病已成为目前急需解决的问题。 兽医实验室是开展动物疫病诊断重要支撑平台,实验室检测结果的准确性对指导疫病防控意义重大,因此,全面、深入的分析影响检测结果的各种因素,优化检测各环节,对提高检测结果准确性至关重要。

1 环境与仪器设备

1.1 环境

环境是影响检测结果准确性的因素之一,体现在兽医实验室的湿度、温度等方面。 某些检测项目、检测方法手段对实验室环境有着比较严格的要求,检测结果的准确性和环境湿度、温度等密切相关。比如,酶联免疫吸附试验、血凝抑制试验对实验室内部温度有着较高的要求,如果温度过低,检测试剂、样品难以充分发挥作用,检测中反应速度不在规定范围内,导致检测结果不准确。 此外,实验室环境污染对检测结果会造成较大的影响,如PCR 检测时,阳性样品气溶胶污染,会造成假阳性,严重影响实验结果的准确性。 因此,必须加强实验室环境管控。

1.2 仪器设备

兽医实验室检测仪器设备多样化,其型号、规格、技术参数、性能等有着较大的差异。 一旦仪器设备使用管理不合理,加上日常校准检查、维护等不到位,将会导致检测结果较大的偏差。 比如,离心机有低速、高速以及常温、冷冻之分,检测性能、误差系数各不相同,需要检测内容和技术方法的要求,科学选择使用离心机。 又比如,某些进口检测设备,PCR仪器、全自动高压灭菌锅等其整体性能高于国产设备,它对环境要求也高于国产设备。 针对这种情况,实验室运行中必须加强对环境的管理,做好日常校准及维护工作,更换老化严重、故障频繁发生的仪器设备,在更新、升级基础上提高各类仪器设备安全性以及整体性能,避免实际应用中频繁出现故障问题,影响检测结果的准确性。

2 检测人员与样本

检测人员操作是否规范、样本制作与保存是否达到要求都会在一定程度上影响实验室检测结果的准确性。 就人为影响因素来说,不同岗位检测人员的职业道德素养、学历层次以及对仪器设备操作的熟练程度、操作是否规范等都会影响检测结果的准确性,使得检测结果存在一定的偏差。 比如,在酶联免疫吸附及血凝抑制实验中,检测人员不规范使用移液器,会影响实验样本与酶标板之间的反应,随意改变、调整实验操作步骤等,也都会让检测结果存在偏差。 加强检验人员培训,规范常规试验操作很必要。 就样本影响因素而言,试验样品的种类较多,有分泌物、全血、血清、发生病变的脏器组织样品等,采集样品是否符合要求对检测结果的准确性很重要。如血清是否溶血及溶血的程度,采集组织样品是否是根据试验目的进行采样。 进行病原的分离鉴定,要采病原感染后含量较高的组织器官。 如,检测伪狂犬可用脑组织,检测猪瘟用扁桃体,检测布病用流产胎儿、精液等,分离细菌去病变组织与正常组织交界地方等等。

3 试剂与检测方法

3.1 诊断试剂

诊断试剂、检测方法都会对检测的结果造成不同程度的影响。 诊断试剂生产厂家不同、批次、敏感性、特异性等并不完全相同,即使是同一生产厂家不同批次其特异性和敏感性均不一样,即使同一病原不同批次的试剂盒质量也存在较大的差异,这些都会对检测结果的准确性造成影响。 因此在采购试剂盒之前要仔细检查和筛选,必要时还应进行试剂盒的比对试验后再确定要采购的试剂盒。

3.2 检测方法

检测结果准确性与所选用的检测方法密切相关。 如,在进行病毒的分离鉴定时可用病毒中和试验、血凝试验(无血凝特性不适用)、酶联免疫吸附试验等。 要根据检测项目的不同选择合适的检测方法,并控制操作的影响因素,在降低检测成本的同时努力提高检测结果的准确性。 同时,要严格按照试验操作步骤进行检测。 以“伪狂犬病”抗体检测为例,可用的方法很多,包括酶联免疫吸附试验方法、乳胶凝集试验方法,前者包括gE 野毒抗体检测、gB免疫抗体检测,我们要根据检测目的不同选择试验法与检测试剂盒。