沈萍萍　蒋素敏　吴益群　林琪　沙洪存　方文佳

[摘要] 目的 探讨肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖类抗原19-9（CA199）及分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）在胃癌患者血清中的表达及应用价值。 方法 选取2017年4～8月我院治疗的胃癌患者43例为胃癌组，胃镜提示非萎缩性胃炎的25例体检者为对照组，采用电化学发光法和酶联免疫法检测胃癌组与对照组血清CEA、CA199及SLPI，分析其与胃癌肿瘤大小、组织分化类型、淋巴转移、浸润深度、远处转移及临床分期的关系及3项指标单一、联合检测的阳性率。 结果 CEA、CA199及SLPI在胃癌组中的表达明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;血清CEA、CA199及SLPI的表达与胃癌淋巴转移、临床分期、浸润深度、肿瘤大小有关（P<0.05）;3项指标联合检测阳性率达88.37%，明显高于单项指标检测（P<0.05）。 结论 胃癌患者血清CEA、CA199及SLPI水平与胃癌的发生、发展关系密切，聯合检测血清水平变化对胃癌诊断及病情变化的判断具有重要意义。

[关键词] 胃癌;癌胚抗原;糖类抗原19-9;分泌性白细胞蛋白酶抑制因子

[中图分类号] R735.2          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2019）22-0013-04

[Abstract] Objective To investigate the expression and application value of tumor marker carcinoembryonic antigen（CEA）， carbohydrate antigen 19-9（CA199） and secretory leukocyte protease inhibitory factor（SLPI） in serum of patients with gastric cancer. Methods 43 patients with gastric cancer who treated in our hospital from April to August 2017 were selected as gastric cancer group. 25 patients with non-atrophic gastritis showed by gastroscope were selected as control group. The serum levels of CEA， CA199 and SLPI in gastric cancer group and control group were detected by electrochemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay， and their relationship between tumor size， tissue differentiation type， lymphatic metastasis， depth of invasion， distant metastasis and clinical stage， and the positive rate of single index and combined detection were analyzed. Results The expression of CEA， CA199 and SLPI in gastric cancer group was significantly higher than that in control group， and the difference was significant （P<0.05）. The expression of serum CEA， CA199 and SLPI was related to lymph node metastasis， clinical stage， infiltration depth and tumor size of gastric cancer（P<0.05）. The positive rate of the combined detection of the three indicators was 88.37%， which was significantly higher than that of the single index（P<0.05）. Conclusion The levels of serum CEA， CA199 and SLPI in patients with gastric cancer are closely related to the occurrence and development of gastric cancer. Combined detection of serum levels is important for the diagnosis of gastric cancer and the change of disease condition.

[Key words] Gastric cancer;Carcinoembryonic antigen;Carbohydrate antigen 19-9;Secretory leukocyte protease inhibitor

全球范围内三大常见的恶性肿瘤之一胃癌起源于胃黏膜。胃癌发病有特别明显的地域性差异，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。好发年龄在50岁以上，男女发病率之比为2∶1。胃癌逐渐呈现年轻化的倾向，这是由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因，胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。胃癌的预后与胃癌的病理分期、部位、组织类型、生物学行为以及治疗措施有关。相关统计结果显示，国内的胃癌患者经手术治疗后，5年生存率仅为30%～50%。如果胃癌能够在早期就被诊断，5年生存率可达90%以上[1-2]。因此，对于降低胃癌的病死率及提高胃癌治疗预后起十分重要作用的是早期胃癌的诊断。胃癌有效治疗的基础是胃癌的早发现和早诊断，但是目前对于胃癌的早期发现和诊断多采用胃镜病理活检等影像学检测，专业性较高且费时费力，不易大范围的普及应用[3]。有研究发现，肿瘤标志物的联合检测有助于肿瘤的诊断[4]。

目前广泛应用CEA来筛查胃癌，其临床价值已得到肯定;但由于其特异性不强，早期胃癌阳性率不高，因而难以做到早期诊断。因此，需要寻找一种或多种肿瘤标志物与CEA联合检测，以提高胃癌的早期诊断率。分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（secretory leukocyte peptidase inhibitor，SLPI）属于Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族，具有调控细胞分化增殖的能力[5]。之前已有相关研究表明在胃癌组织SLPImRNA及蛋白明显升高[6-9]。国内尚未见该血清指标在胃癌中的研究报道。本研究联合检测分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）及CEA、CA199对胃癌进行诊断，将其与健康对照组及早期胃癌组结果进行比较，并比较这些指标在胃癌不同临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2017年4～8月于我院治疗的胃癌患者43例为胃癌组。其中男32例，女11例;年龄35～88岁，平均（67.33±13.29）歲;所有患者均经胃镜活组织病理检查确诊为胃癌，普外科手术患者术前均未给予放化疗，肿瘤科化疗患者未行手术治疗，根据影像学检查及术后病理切片检查，Ⅰ～Ⅱ期24例，Ⅲ～Ⅳ期19例。以体检正常者25例为对照组，查胃镜均为未萎缩性胃炎，其中男16例，女9例;年龄55～74岁，平均（62.33±6.54）岁。

1.2 方法

采用电化学发光法检测患者血清中的肿瘤标志物。测定仪器采用CENTAUR XP全自动免疫分析仪;试剂均为配套的CA199、CEA 试剂。对照组患者于入院体检时，抽取空腹外周静脉血5 mL，胃癌组患者于手术前抽取外周静脉血5 mL，分离出血清，于-80℃冰箱保存，用于检测。SLPI测定采用酶联免疫吸附测定法，所用试剂盒购自于上海江莱生物有限公司，SLPI标准品标准曲线的制定按照说明书进行，酶标仪450 nm波长测定光密度值（OD值）。

1.3 判定标准

CEA>10 ng/mL为阳性，CA199>37 U/mL为阳性。SLPI>50 ng/mL为阳性。联合检测判定标准：SLPI、CEA 或CA199 有一项阳性即为阳性，三者均阴性为阴性。

1.4 统计学方法

采用 SPSS17.0统计软件进行统计学分析，明确检验数据分布情况后，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，两样本比较应用样本t检验或近似t检验。计数资料阳性率比较应用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清 SLPI、CEA及CA199水平比较

胃癌组血清 SLPI、CEA及CA199水平明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 两组血清SLPI、CEA及CA199水平比较

早期胃癌组是将胃癌组织局限于胃黏膜层及黏膜下层的胃癌，不管有无淋巴结转移，共18例。检测得出早期胃癌组中血清SLPI水平明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。而血清CEA、CA199水平两者无区别。见表2。

2.3胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199表达水平与临床病理特征的关系

临床分期Ⅲ～Ⅳ期的胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差异具有统计学意义（P<0.05）。有浆膜浸润（T3、T4）及有淋巴转移的胃癌患者各血清指标表达量均显著高于无浆膜浸润（T1、T2）及无淋巴转移胃癌患者，差异具有统计学意义（P<0.05）。肿瘤直径≥5 cm的胃癌患者血清SLPI、CEA及CA199显著高于肿瘤<5 cm（P<0.05）。分化类型上低分化胃癌患者血清SLPI及CEA表达水平较高中分化高（P<0.05）。有远处转移胃癌患者血清CEA及CA199表达水平显著高于无远处转移胃癌患者（P<0.05）。三者血清水平表达与肿瘤部位、性别、年龄均无相关。见表3。

2.4 血清SLPI、CEA及CA199的联合诊断价值

CEA、CA199及SLPI单项指标在胃癌患者血清中的阳性检出率较低（27.91%～72.09%），3 项联合检测的阳性检出率达88.37%，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表4。

3 讨论

肿瘤标志物是肿瘤生长过程中，由肿瘤细胞自身产生或有机体自身免疫反应产生，一般不存在于正常成人组织，是反映肿瘤生长与存在的一类物质，包括蛋白质、酶、多胺、激素等，通常在患者血液或是体液中能检测出[10]。

CEA是癌细胞膜上的一种含糖蛋白质，常见于消化道和胚胎的胰腺、肝、肠组织中，在恶性肿瘤中表达多于良性肿瘤和正常组织，是目前研究最广泛的消化道肿瘤标志物之一。有报道称CEA升高对于Ⅲ期胃癌患者复发有着重要的意义[11]。此外还有报道证实，CEA对于胃癌手术中肿瘤切除是否彻底有重要的指示作用，且与胃部恶性肿瘤的肝转移有密切的相关性[12]。本研究中胃癌患者血清CEA阳性率达27.91%，与既往研究[13]的阳性检出率23%～45%相符。

CA199是一种非特异性的肿瘤糖类抗原，是目前报道的对胰腺癌灵敏度和特异度最高的肿瘤标志物[14]，对于胃癌也有一定的指示作用。有报道称血清CA199水平与胃癌的分期、有无浆膜浸润、有无淋巴结或腹膜转移密切相关[15]。本研究CA199在胃癌患者血清中阳性率达39.53%，与此报道一致，可见血清CA199可作为胃癌诊断和疗效观察的一个参考指标。本研究发现，胃癌晚期患者血清CEA和CA199水平较早期患者显著性增高，此结果再次证明血清肿瘤标志物CEA、CA199水平与胃癌临床病理分期密切相关，对手术方式的选择和提示预后有重要应用价值。

SLPI是一种非糖基化蛋白，是黏膜分泌的上皮特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂，它存在于人体的各种黏膜分泌液中，如唾液、胃肠道分泌液、呼吸道分泌液及宫颈黏液等。近年来较多国外文献报道，SLPI与癌症密切相关，但它在不同肿瘤中的表达水平不一，具体作用机制日前尚不完全清楚。卵巢癌及结肠癌中SLPI表达水平明显较卵巢良性上皮及正常对照组高，且与肿瘤进展相关[16，17]，而前列腺癌中，其表达会下降[18]。有研究[6，9]，SLPI mRNA及蛋白在胃癌组织中都过表达，其表达量显著高于癌旁组织，说明SLPI在胃癌组织中可能是促癌因子，癌组织可能通过SLPI表达量的变化来增加其侵袭性。其可能的作用机制：（1）通过保护颗粒蛋白前体免受降解，促进Cyclin D等的表达及抑制抗细胞增殖因子IGFBP-3等的表达，从而促进细胞增殖[5];（2）抑制分泌抗血管因子的弹性蛋白酶，或激活NF-κB[5]，可能与促进血管发生有关。本研究中胃癌组及早期胃癌组的血清SLPI水平明显高于正常对照组，临床分期Ⅲ～Ⅳ期的胃癌患者，有浆膜浸润（T3、T4）及有淋巴转移的胃癌患者各血清指标表达量均显著高于Ⅰ～Ⅱ期，无浆膜浸润（T1、T2）及无淋巴转移胃癌患者，提示血清SLPI在早期胃癌患者即升高，对早期诊断胃癌及是否存在淋巴转移及临床分期等胃癌预后评估也有重要参考价值。

本研究胃癌组血清CEA、CA199、SLPI表达水平高于对照组，提示检测上述指标在外周血中的水平对胃癌诊断意义重大。此外，本研究中CEA、CA199、SLPI单一指标在胃癌患者血清中的阳性检出率低，3项联合检测的阳性检出率达88.37%，明显高于单一检测，说明联合检测比单一指标检测更具诊断价值，尤其对胃癌的诊断阳性率远高于单一指标的检测。这也证明了今后胃癌的诊断方向将以多种肿瘤标志物联合检测为发展方向。

综上所述，SLPI可能是一个有用的胃癌肿瘤标志物，联合检测血清SLPI、CEA及CA199，可有效地弥补CEA及CA199早期诊断率低的缺点，提高胃癌的早期诊断率。血清CEA、CA199、SLPI表达量与胃癌有无淋巴转移及临床分期，浸润深度，分化类型，肿瘤大小，远处转移相关，提示监测血清CEA、CA199、SLPI水平可用于胃癌早期诊断、判定胃癌的恶性程度及转移，将3 种肿瘤标志物联合检测比单一检测更具诊断价值。

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（收稿时间：2019-02-25）