徐春志，张 海，景书灏，刘 霞2，杨 峰，陈 红，袁翠霞

(1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550008)

2017年12月，贵州省某养牛场的40头牛出现血便、血尿、流鼻涕、鼻镜干燥、怀孕母牛流产、胎衣不下等临床症状。发病后该养殖场曾使用青霉素、链霉素、磺胺嘧啶钠、黄芪多糖等药物治疗，均无明显效果。笔者根据临床症状、实验室检查确诊为附红细胞体与支原体混合感染。现将诊治情况报道如下，与同行探讨。

1 发病情况及临床症状

该场存栏牛217头(其中：安格斯牛118头、西门塔尔牛23头、利木赞牛5头、夏洛莱牛59头、鲁西黄牛10头、荷斯坦牛2头)，部分安格斯种牛是2016年12月从澳大利亚引进，刚引进时牛生长状况较好，2017年12月后相继出现精神沉郁、食欲减退、消瘦、血尿、血便、怀孕母牛流产、胎衣不下等临床症状。牛场兽医曾对发病牛使用青霉素、链霉素、磺胺嘧啶钠、黄芪多糖等药物进行治疗，无明显好转，病重牛很快死亡。共发病牛40头，死亡10头，死亡率4.61%(10/217)，病死率25%(10/40)，流产7头，流产率3.22%(7/217)。

2 实验室检查

2.1 布鲁氏菌抗体检测采集发病牛的血液4份，待血清自然析出后，以3 000 r/min离心5 min分离血清，按照国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646—2002)进行检测，同时设立阴性、阳性对照。结果：布鲁氏菌抗体阴性。

2.2 血涂片镜检现场采集4头发病牛的血液制作血涂片，带回实验室使用甲醇固定10 min，吉姆萨染色15 min，镜检。结果：4份血涂片均发现大量的红细胞变形为齿轮状、星芒状或不规则形状，经鉴定为附红细胞体感染。见图1。

图1 血涂片吉姆萨染色镜检(10×100)

2.3 支原体病原检测采集发病牛鼻拭子4份，加无菌PBS 1 mL混匀后，提取鼻拭子样本DNA，按照支原体PCR检测试剂盒(购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司)方法进行PCR扩增(目的片段602 bp)，产物通过1%琼脂糖凝胶电泳检测。结果：4份鼻棉拭子样本均检出牛支原体特异性片段，阳性率为100%(4/4)。见图2。

图2 牛支原体PCR扩增结果M：2 000 bp Marker；+：阳性对照；-：阴性对照；1～4：检测样本

3 诊断

根据发病情况、临床症状、实验室检查，确诊发病牛为附红细胞体与支原体混合感染。

4 治疗

(1)治疗附红细胞体用“贝尼尔”5 mg/kg体重，深部肌肉注射，连续用药7天；治疗支原体用泰乐菌素5 mg/kg体重，肌肉注射，连续用药7天。(2)对病情严重的牛，结合肌肉注射维生素 B121.5 mg/次，或内服硫酸亚铁，以促进机体造血机能的恢复；用止血敏10 mL/次止血，安钠咖5 g/次强心；同时配合使用磺胺嘧啶钠0.1 g/kg治疗继发感染。

5 小结与讨论

5.1附红细胞体病是由附红细胞体寄生于动物的红细胞表面及血浆中所引起的以高热稽留、贫血和黄疸为主要临床症状的传染性疾病。附红细胞体呈球形、卵圆形、月牙形等多种形态，游离于血浆中做摇摆、扭转、翻滚等运动[1]。虫体大多数位于红细胞的边缘，附着在红细胞上时红细胞呈齿轮状、星芒状或不规则形状。

5.2牛支原体是柔膜体纲，支原体目，支原体科，支原体属的成员，无细胞壁。感染牛可引起肺炎、乳房炎，以及怀孕母牛流产、生殖器感染等多种病症[2]。牛支原体病已在全世界范围内发生，对养牛业造成较大的经济损失[3]。

5.3防控措施：目前附红细胞体病还无有效的疫苗进行预防，做好饲养管理和杀灭寄生虫是预防该病的主要手段之一。牛支原体疫苗已经上市，在发病的养殖场和支原体高发区域，疫苗接种是预防本病的主要和有效手段。养牛场不要在附红细胞体病和支原体病高发的区域引种，同时在引种过程中要加强检疫，饲养过程中应加强疫病监测和防控，建立和完善基本的防疫体系。建立无害化处理、生物安全管理体系并严格执行。加强养牛场的日常管理，减少和消除应激反应等各种致病因素，在做好基础免疫的同时要有效防治其他疾病特别是导致机体免疫力下降的疾病发生。做好粪污处理，保持良好的养殖环境卫生，同时加强环境消毒和杀虫灭鼠。注意防治、消毒药物的交替使用，避免产生耐药性。