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LPS注射对家蚕幼虫MyD88基因的影响

2019-10-21李佳璇王涛李树强司徒金容刘吉升

科学导报·学术 2019年29期

李佳璇 王涛 李树强 司徒金容 刘吉升

摘  要:为探究LPS(脂多糖)等外源物质对家蚕MyD88基因表达的影响,本实验将无菌水、LPS和大肠杆菌注射到5龄家蚕幼虫体腔内,在0、3、6和24 h进行解剖取样,通过凝胶电冰分析不同时间MyD88基因在各组织中的表达水平。电泳条带显示,在脂肪体组织中,注射LPS和大肠杆菌均可引起MyD88基因上调表达,6 h效果最佳;在中肠组织中,注射LPS 3 h 时MyD88基因表达量最高,注射大肠杆菌在6 h时条带亮度最亮。结果表明MyD88基因可能响应LPS和大肠杆菌引起的家蚕免疫表达反应。

关键词:家蚕;MyD88;注射;LPS;大肠杆菌

MyD88是机体内重要的转导蛋白,在信号转导途径中起到关键作用[1]。Lord等发现髓样分化基因家族的新成员MyD88,认为MyD88能够调节髓样细胞分化[2]。在哺乳类动物中,MyD88基因主要表达于T细胞、B细胞中[3]。

在家蚕中,MyD88基因在中肠(midgut,MG)、脂肪体(fat body,FB)、表皮(epidermis,EP)等主要免疫器官中的表达量相对其他较高[4]。MyD88是家蚕先天免疫通路Toll通路上重要的接头分子,研究表明,MyD88与活化的Toll受体的TLR结构域连接,再与Tube、Pelle蛋白结合成三聚体形式,从而实现信号细胞内传导[5]。

革兰氏阴性杆菌细胞壁的主要成分为LPS(lipopolysaccharide),机体感染后会出现毒性反应,LPS作为大肠杆菌(Escherichia coli)细胞壁的主要成分,参与大肠杆菌引起的免疫反应[6]。Liu等研究发现LPS能够激起昆虫先天免疫反应,同时BmToll9-2基因在家蚕幼虫的不同组织参与LPS等外源病原体的识别过程[7]。然而,作为Toll通路的下游因子MyD88能否对LPS做出免疫反应,目前在家蚕中还未明确。

本文利用注射法,对家蚕5龄幼虫进行不同处理,通过凝胶电泳条带,分析MyD88基因在不同处理下的表达水平。……

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