马 欢，田小飞，李红霞

(1.榆林市第一医院绥德院区a.妇产科；b.小儿一科，陕西榆林 718000；2.延安大学附属医院妇科，陕西延安 716000)

卵巢癌(ovarian cancer，OC)是常见的妇科恶性肿瘤之一，在我国妇科肿瘤导致的死亡中居第9位[1-3]，2019年美国肿瘤年报显示在女性肿瘤导致的死亡人数中OC居第5位[4-6]，根据全球癌症统计(GLOBOCAN)组织2018年肿瘤统计数据估计OC全球新发病例295 414例，死亡184 799例[7]，严重危害女性健康。目前认为OC发展到晚期才能确诊，并且并发转移、耐药、复发等因素才导致了OC的高病死率。现代肿瘤治疗中，肿瘤相关标志物的发现为肿瘤治疗和预后提供了科学依据[5-6，8]，为提高OC患者诊断和治疗的成功率，医务工作者同样开展了大量生物标志物相关研究。有研究报道抑癌基因N-myc下游调节因子4(N-myc downstream regulated gene 4，NDRG4)在OC中低表达[9]，提示NDRG4可作为OC患者生存和预后的生物标志物，但是尚未见到NDRG4蛋白质在复发性卵巢癌(recurrent ovarian cancer，ROC)患者血清中的研究报道，本研究着眼于ROC患者血清中NDRG4蛋白质的表达及其对患者生存和预后的影响，开展以下研究，以期为ROC患者生存和预后提供可行的生物标志物。

1 材料与方法

1.1 研究对象 本研究所用到的147例ROC患者血液标本均为2010年1月～2014年12月收集于榆林市第一医院，课题组每三个月对以上患者电话随访一次，追踪随访时间最短1个月，最长68个月，随访时间中位数为23个月。患者平均年龄55.4±11.3岁。患者相互之间不存在血缘关系。

1.2 仪器与试剂 本研究电化学发光法采用德国罗氏E411 全自动电化学发光仪，试剂购买于北京陆桥技术公司。

1.3 方法 本研究采用电化学发光法测定NDRG4蛋白质在血清中的含量，每次测定均进行室内质控，每个样品重复测量3次，取平均值作为最终浓度结果，血清NDRG4水平按浓度分为2组(<20.0 ng/ml，≥20.0ng/ml)。

1.4 统计学分析 采用Pearson卡方检检分析组间差异，kendall’s taub相关性检验分析等级相关性，采用K-M法绘制生存曲线，用log-rank检验不同组患者生存时间之间的差异。统计过程使用SPSS13.0软件运行，所有检验均为双侧检验，α=0.05，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同临床分期ROC患者血清NDRG4蛋白质水平对比 见表1。通过分析不同临床分期ROC患者血清NDRG4蛋白质水平发现，分期愈高者其血清NDRG4水平越低，且组间差异具有统计学意义(F=20.311，P<0.001)。

表1不同临床分期ROC患者血清NDRG4水平比较

临床分期百分比[n(%)]血清NDRG4水平(x±s,ng/ml)Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期总数38(25.9)41(27.9)18(12.2)50(34.0)147(100)150.76±88.6468.61±55.0853.78±49.6539.28±56.9181.73±79.88

2.2 ROC患者血清NDRG4蛋白质水平与临床分期之间的相关性 见表2。经kendall’s taub相关性检验分析发现，ROC患者血清NDRG4水平与临床分期之间呈正相关，且正相关差异具有统计学意义(γ=0.326，P<0.001)。

表2ROC患者血清NDRG4蛋白质水平与临床分期之间的相关性[n(%)]

血清NDRG4水平(ng/ml)Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期<20.0≥20.0合计10(26.3)28(73.7)38(100)16(39.0)25(61.0)41(100)3(16.7)15(83.3)18(100)37(74.0)13(26.0)50(100)

2.3 血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者临床特征之间的关系 见表3。通过分析血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者临床特征之间的关系可见，血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者的吸烟、饮酒、肿瘤临床分期、T分期、N分期和M分期等因素相关。

表3血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者临床特征之间的关系[n(%)]

临床特征n<20.0 ng/ml(n=66)≥20.0 ng/ml(n=81)χ2P年龄(岁) 吸烟 饮酒 临床分期 T分期 N分期 M分期 <50≥50否是否是Ⅰ+ⅡⅢ+Ⅳ1+23+40+1+2301471006483905779688364126211232422(33.3)44(66.7)19(28.8)47(71.2)47(71.2)19(28.8)26(39.4)40(60.6)20(30.3)46(69.7)64(97.0)2(3.0)61(92.4)5(7.6)25(30.9)56(69.1)45(55.6)36(44.4)43(53.1)38(46.9)53(65.4)28(34.6)63(77.8)18(22.2)62(76.5)19(23.5)62(76.5)19(23.5)0.102 10.600 5.033 9.918 33.344 12.392 6.7140.859 0.001 0.028 0.003 <0.001 <0.001 0.013

2.4 血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者预后之间的关系 通过进一步分析血清NDRG4蛋白质水平与ROC患者预后之间的关系，发现血清NDRG4蛋白质水平较高的ROC患者生存期较低表达患者生存期短，且经log rank检验差异有统计学意义(χ2=5.94，Plog rank=0.0148)。见图1。

图1 血清NDRG4水平与ROC患者预后之间的关系

3 讨论

卵巢癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤之一，但在各种生殖系统恶性肿瘤的死亡率中却位居首位[9-11]，对女性健康造成了严重威胁。因卵巢癌早期无症状或症状较轻，待有症状并最终确诊时相当一部分卵巢癌患者已是肿瘤终晚期[12-13]，故，对卵巢癌的诊断和治疗提出了巨大挑战。在造成卵巢癌患者死亡的原因中，ROC占到了很大的比重，因复发的特性，其恶性程度往往高于首发，且往往伴随着肿瘤转移，其造成的死亡率比首发卵巢癌更高[14-15]。

NDRG4在多种肿瘤中发挥抑癌基因的作用，其中包括卵巢癌[16-20]，NDRG4蛋白质在卵巢癌组织中的表达显著低于正常组织[19]，在宫颈癌细胞中的表达较正常宫颈内皮细胞低，且抑制DNRG4基因的表达能够促进宫颈癌细胞迁移和侵袭[20]。本研究中，通过分析ROC患者血清NDRG4蛋白质的表达情况，发现NDRG4蛋白质水平较高的患者临床分期较靠前，且NDRG4蛋白质水平较高的患者生存期较低水平NDRG4蛋白质患者明显延长，说明NDRG4在卵巢癌中发挥抑癌基因的效应，如早期检测发现患者血清NDRG4蛋白质水平较低，则该患者有较大可能预后较差，这与曹雪娇等[9]的研究相符。

本研究虽揭示了NDRG4蛋白质与ROC患者之间的生物学关联，但是尚未探讨其生物学机制，NDRG4如何抑制卵巢癌，特别是ROC的生物学机制尚未明确，需进一步探讨。